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[发明专利]一种基于流式细胞术检测鸡脾脏CD8+-CN201910405117.0有效
发明人：焦新安;唐娟;潘志明;胡茂志;康喜龙;孟闯;顾丹;王晶 -专利权人：扬州大学
申请日： 2019-05-16 - 公布日： 2022-06-03 - 主分类号： G01N15/14 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于流式细胞术检测鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用的方法，包括如下步骤：（1）细菌培养，所述的细菌为鸡白痢沙门菌S06004和S06004ΔspiC；（2）鸡的免疫及采样；（3）靶细胞—巨噬细胞的制备；（4）效应细胞—鸡脾脏CD8+T细胞的制备：包括鸡脾脏淋巴细胞悬液的制备步骤和磁珠分选鸡脾脏相对于现有技术，本发明具有如下有益效果：本发明贴壁获得的巨噬细胞（靶细胞）纯度较高，且鸡脾脏CD8+T细胞分选效果明显，分离时间短；以沙门菌宿主细胞—巨噬细胞作为靶细胞，可更精确反映宿主对沙门菌的清除能力；将流式细胞术用于鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用，可在单细胞水平检测鸡脾脏CD8+T细胞的CTL效应。
一种基于细胞检测脾脏 cd8 base sup

[发明专利]一种髓系来源抑制性细胞的体外培养方法-CN202310076267.8有效
发明人：徐剑锋;袁媛;林晓曦 -专利权人：上海诚益生物科技有限公司
申请日： 2023-02-08 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明涉及一种小鼠原代髓系来源抑制性细胞(MDSC)的体外培养方法。其包括步骤：S11、取荷瘤小鼠脾脏，经物理研磨和过滤后获得脾脏细胞悬液；S12、将脾脏细胞悬液混合生物素偶联的红细胞表面抗原抗体，经孵育后磁选分离去除红细胞；S13、将去除红细胞的所述脾脏细胞与生物素偶联的T细胞表面抗原抗体混合，经孵育后磁选分离去除T细胞；S20、将SET加入含有GM‑CSF的培养基中培养。本发明描述了一种新型的原代MDSC的体外培养方法，保留了对MDSC生存有益的脾脏基底细胞，去除了对MDSC生存有害的T细胞，提供了支持MDSC生存的合适浓度的GM‑CSF，规避体内外研究差异的同时提高体外培养细胞的存活率
一种来源抑制细胞体外培养方法

[发明专利]胸腺素α原在制备预防和治疗肝癌药物中的应用-CN201210086166.0无效
发明人：周克夫;王世媛;粟华;蔡报伟;朱苑婷 -专利权人：厦门大学;厦门伯赛基因转录技术有限公司
申请日： 2012-03-28 - 公布日： 2012-07-18 - 主分类号： A61K38/22 文献下载
摘要：提供胸腺素α原在抑制调节性T淋巴细胞活性中的用途，以及胸腺素α原在制备预防和治疗肝癌药物中的应用。采用腹腔注射胸腺素α原，观察该重组蛋白在预防及治疗肝癌中的作用，包括肝肿瘤的大小以及防止腹水的形成。通过检测小鼠脾脏调节性T淋巴细胞的水平，证明肝癌对照组脾脏调节性T淋巴细胞的水平明显比正常小鼠脾脏调节性T淋巴细胞的水平高差异极显著(P＜0.01)；而用药组调节性T淋巴细胞的水平则明显比正常对照组和实验对照组低
胸腺制备预防治疗肝癌药物中的应用

[发明专利]脾脏多肽制品的生物活性的测定方法-CN201811347374.5有效
发明人：王瑾;宋宇;郑新越 -专利权人：北京第一生物化学药业有限公司
申请日： 2018-11-13 - 公布日： 2022-06-21 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种脾脏多肽制品的生物活性的测定方法。所述方法包括如下步骤：脱E受体胸腺T细胞悬液制备步骤：通过加热后离心，从动物胸腺制备脱E受体胸腺T细胞悬液；供试样品准备步骤：准备包含所述脾脏多肽制品的供试样品；混合步骤：将所述脱E受体胸腺T细胞悬液和所述供试样品混合；检测步骤：将得到的混合液离心重悬后用E玫瑰花结受体染色，并通过流式细胞仪检测所述供试样品恢复E受体功能的胸腺T细胞数量的比例。
脾脏多肽制品生物活性测定方法

[发明专利]小鼠自身免疫性骨髓纤维化模型的建立方法-CN202111657173.7有效
发明人：金华;刘启发;张海燕;戚寒洲;刘家沛 -专利权人：南方医科大学南方医院
申请日： 2021-12-30 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明的建立方法，包括以下步骤：以C57BL/6小鼠作为供鼠，取供鼠的骨髓，用缓冲液冲洗骨髓腔，收集和过滤洗涤液，制成单细胞悬液，去除CD4+T细胞和CD8+T细胞，得到去除T细胞的骨髓细胞悬液；取供鼠的脾脏，研磨后用缓冲液清洗，收集和过滤洗涤液，制成单细胞悬液，得到脾脏细胞悬液；以BALB/c小鼠作为受鼠，对受鼠进行全身电离辐射，将去除T细胞的骨髓细胞悬液和脾脏细胞悬液输入受鼠体内，饲喂一段时间后，得到小鼠自身免疫性骨髓纤维化模型。
小鼠自身免疫性骨髓纤维化模型建立方法

[发明专利]一种真菌多糖及其制备方法和用途-CN202010108509.3在审
发明人：王红广;车建途;安娜 -专利权人：北京威力格生物科技有限公司;山西水塔醋业股份有限公司
申请日： 2020-02-21 - 公布日： 2023-07-11 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：具体涉及一种真菌多糖及其制备方法和用途，真菌多糖提取自特罗格栓菌菌丝体，为特罗格栓菌菌丝体多糖(TGM)，用复合酶高压热水提取法提取，纯度高，平均分子量之间的差异小，处于一个分子量水平，其生物活性好，使用安全，能提高胸腺和脾脏指数，增高脾脏T和B淋巴细胞的增殖能力，提高脾脏NK细胞活性，增高周围白细胞和淋巴细胞数量，提高脾淋巴细胞的存活率，促使脾脏淋巴细胞大量释放细胞炎症因子─TNF-ɑ，增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，用于制备免疫功能调节产品和
一种真菌多糖及其制备方法用途

[发明专利]一种体外免疫细胞制剂的修饰方法及其应用-CN201611160344.4在审
发明人：刘春云;郭尚德;尉杰忠;李艳花;肖保国;马存根 -专利权人：山西大同大学
申请日： 2016-12-15 - 公布日： 2017-06-13 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明提供了一种体外免疫细胞制剂的修饰方法及应用。该方法用MOG35‑55肽段免疫制备EAE模型，诱导致脑炎性免疫细胞免疫后第9天脾脏T细胞和脾脏巨噬细胞，将上述细胞与Fasudil共培养72小时，即获得治脑炎性免疫细胞Fasudil修饰的T细胞和Fasudil修饰的巨噬细胞。观察Fasudil修饰的免疫细胞对EAE小鼠的治疗效果，结果证实，Fasudil体外修饰的免疫细胞能有效缓解EAE小鼠的临床症状，且Fasudil修饰的巨噬细胞治疗效果优于Fasudil修饰的T细胞。此外，Fasudil体外修饰的免疫细胞还具有副作用小，治疗费用低等优点，对神经变性疾病的治疗将产生良好的临床应用前景。
一种体外免疫细胞制剂修饰方法及其应用

[发明专利]疟原虫在制备联合放射疗法用于抗肿瘤的制剂中的应用-CN202110281102.5在审
发明人：陶铸;丁文婷;程智鹏;冯银芳;秦莉;陈小平 -专利权人：广州中科蓝华生物科技有限公司
申请日： 2021-03-16 - 公布日： 2021-08-13 - 主分类号： A61K35/68 文献下载
摘要：疟原虫免疫疗法通过感染增加机体的外周血和脾脏中产生更多的CD4+T、CD8+T细胞比例或者绝对数，降低外周血和脾脏中的Tregs和MDSCs细胞比例，抑制肿瘤生长；放疗通过直接杀伤肿瘤细胞，降低肿瘤负荷，但是放疗会降低脾脏中的CD4+T、CD8+T细胞的绝对数，损伤一定的抗肿瘤免疫能力，疟原虫免疫疗法和放疗都能促进免疫细胞浸润肿瘤，发挥互补和协同的抗肿瘤效应。
疟原虫制备联合放射疗法用于肿瘤制剂中的应用

[发明专利]Ⅰ型干扰素受体基因敲除小鼠脾脏网状成纤维永生化细胞系的培养方法及应用-CN202110626105.8在审
发明人：李家斌;李嘉嘉;胡立芬;伍婷;刘艳艳;魏艳艳 -专利权人：安徽医科大学第一附属医院
申请日： 2021-06-29 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明属于生物医学技术领域，尤其是Ⅰ型干扰素受体基因敲除小鼠脾脏网状成纤维永生化细胞系的培养方法及应用，解决了现有技术中建立的小鼠FRCs原代永生化细胞系，病毒感染率虽高，但是病毒感染后上清液病毒含量却很低，且关键的细胞因子表达不高等问题，所述Ⅰ型干扰素受体基因敲除小鼠脾脏网状成纤维永生化细胞系的培养方法，包括使用Ⅰ型干扰素受体敲除小鼠脾脏，加消化液消化小鼠脾脏碎块；运用磁珠分选富集和流式细胞仪精确分选逐级分选方法；最后使用SV40大T抗原感染FRCs细胞，筛选、克隆并培养50代以上，得到了稳定的细胞系。本发明细胞系分离培养周期短，成本低，无磁珠富集过程。
干扰素受体基因小鼠脾脏网状纤维永生细胞系培养方法应用

[发明专利]双氢青蒿素在制备防治移植物慢性排斥反应的药物中的应用-CN202310978581.5在审
发明人：苗芸;廖涛 -专利权人：南方医科大学南方医院
申请日： 2023-08-04 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： A61K31/357 文献下载
摘要：双氢青蒿素还能够降低慢性排斥受体的供体特异性抗体IgG的水平，抑制IgG的产生；能够降低慢性排斥受体脾脏、淋巴结、骨髓和外周血的滤泡辅助性T细胞、生发中心滤泡辅助性T细胞水平，抑制滤泡辅助性T细胞激活和分化；能够降低慢性排斥受体脾脏、淋巴结、骨髓和外周血的B细胞、生发中心B细胞、浆细胞和IgG抗体产生细胞水平，抑制B细胞的激活和分化以及抗体的产生。
青蒿素制备防治移植慢性排斥反应药物中的应用

[发明专利]一种用于活化干细胞的方法和装置-CN201811298700.8在审
发明人：杜玲娟;杨镛;杨国凯;马振桓;万嘉;李国剑;侯毅 -专利权人：杜玲娟
申请日： 2018-11-02 - 公布日： 2019-03-08 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，公开了一种用于活化干细胞的方法和装置，取健康BALB/cl和C57BL/6小鼠，雌雄不限，6～8周龄；小鼠脾脏干细胞的培养和分化：小鼠脾脏干细胞的培养条件；培养皿用gelatin 0.1％包被,加小鼠脾脏成纤维细胞为滋养层,克隆形成能力和胚样小体形成能力检测；Sp‑MSCs的分离培养；分化能力鉴定；小鼠T淋巴细胞分离；细胞因子处理,抗体阵列以及Westernblot；淋巴细胞转化实验和混合淋巴细胞反应本发明提出了通过分析细胞信号传导网络来表征细胞状态的一个新概念。通过同时检测细胞内的多个信号网络节点,就能够揭示细胞内各种激酶的活力动态。
干细胞小鼠脾脏方法和装置活化培养皿混合淋巴细胞反应淋巴细胞转化实验生物技术领域细胞信号传导成纤维细胞细胞表征细胞分化能力分离培养抗体阵列能力检测培养条件细胞因子信号网络激酶统计学新概念滋养层包被胚样小体克隆分化检测分析网络健康

[发明专利]促进脾脏来源的CD8阳性T细胞增殖的诱导培养组合物及其应用-CN201810938028.8在审
发明人：饶秀茸;王康;易艳琼;李鹏;李泓彦 -专利权人：深圳市拓普生物科技有限公司
申请日： 2018-08-16 - 公布日： 2018-11-23 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明涉及一种促进脾脏来源的CD8阳性T细胞增殖的诱导培养组合物及其应用。该诱导培养组合物包括细胞培养基及添加于细胞培养基的诱导因子，诱导因子包括植物血凝素、CD3抗体及CD28抗体，植物血凝素的终浓度为1μg/mL～10μg/mL，CD3抗体的终浓度为1μg/mL～10μg上述诱导培养组合物能够促进脾脏来源的CD8阳性T细胞大量增殖。
诱导培养阳性T细胞脾脏细胞培养基诱导因子血凝素增殖的增殖应用

[发明专利]一种乳酸菌胞外多糖及免疫佐剂-CN201811092741.1有效
发明人：王潇;修磊;杜瑞平 -专利权人：内蒙古大学
申请日： 2018-09-19 - 公布日： 2022-02-01 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：其胞外多糖能显著增强小鼠骨髓来源树突状细胞分泌细胞因子。将胞外多糖与OVA抗原免疫小鼠，可以显著提高小鼠血清中OVA特异性IgG抗体以及IgG抗体亚类的滴度；胞外多糖还能显著促进脾脏T淋巴细胞增殖以及INF‑γ和IL‑4的分泌；显著提高脾脏IL‑4+CD4+T细胞、IFN‑γ+CD4+T细胞以及IFN‑γ+CD8+T细胞的比例；此外，胞外多糖还可以显著增强口蹄疫灭活疫苗在小鼠上诱发的特异性抗体滴度。
一种乳酸菌多糖免疫佐剂

[发明专利]SOD3在调控双氢青蒿素诱导的脾脏增大及免疫细胞异质性药物筛选或疫苗评价中的应用-CN202210048341.0在审
发明人：陈启军;姜宁;张义伟;李其龙;陈冉;冯颖 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2022-01-17 - 公布日： 2022-05-13 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种SOD3在调控双氢青蒿素诱导的脾脏增大及免疫细胞异质性药物筛选或疫苗评价中的应用；本发明的意义在于：双氢青蒿素可调控脾脏免疫细胞的异质性。SOD3‑/‑小鼠用等量的双氢青蒿素进行灌胃处理后未发现脾脏增大，脾指数也未升高。流式细胞分析发现SOD3‑/‑小鼠脾脏免疫细胞亚群中CD11b+Gr‑1+中性粒细胞和B220+B细胞、CD3+CD4+T细胞的比例也未发生显著变化。因此，SOD3蛋白缺失在逆转双氢青蒿素诱导的脾增大及免疫细胞异质性方面有一定的作用，验证SOD3是双氢青蒿素作用的靶点之一。
sod3 调控青蒿素诱导脾脏增大免疫细胞异质性药物筛选疫苗评价中的应用

[发明专利]用于评价物质具有免疫调节功能的方法-CN202111226760.0在审
发明人：刘庆梅;刘光明;周钰;刘文贤;刘晨风 -专利权人：集美大学;厦门大学
申请日： 2021-10-21 - 公布日： 2022-02-25 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明公开了一种评价物质具有免疫调节功能的方法，包括：取后天免疫细胞缺陷小鼠的脾脏，制成原代天然免疫细胞悬液；将免疫细胞与OVA培养，获得培养体系；收集T细胞受体转基因小鼠的脾脏和淋巴结单细胞悬液，磁珠分选获得CD4+CD62L+Naive T细胞；将CD4+CD62L+Naive T细胞加入培养体系中，培养过程中，待评价物质以100～500μg/mL的浓度加入培养体系中；收集全部细胞，细胞用佛波醇和离子霉素刺激培养，破膜配合固定后添加荧光抗体，再利用流式细胞仪检测Th1、Th2或Treg的比例，以评估物质的免疫调节功能。
用于评价物质具有免疫调节功能方法

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