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[发明专利]利用毕赤酵母分泌表达精氨酸脱亚胺酶及构建方法-CN202010627909.5在审
发明人：王亚平;马立新;彭艳红;饶犇 -专利权人：湖北大学
申请日： 2020-07-01 - 公布日： 2020-11-17 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，公开了一种利用毕赤酵母分泌表达精氨酸脱亚胺酶及构建方法，将优化的精氨酸脱亚胺酶基因融合在酵母表达载体BDM上，构建单拷贝表达载体；利用限制性内切酶EcoRⅠ、SPeⅠ、BamHⅠ、XbaⅠ四个酶进行酶切，根据SpeⅠ和XbaⅠ粘性末端能互补配对的原则，通过反复酶切、连接和转化操作，获得含精氨酸脱亚胺酶的重组质粒，电转毕赤酵母后，在甲醇诱导下能高效分泌表达精氨酸脱亚胺酶。本发明所构建的多拷贝高效表达精氨酸脱亚胺酶可用于提高产量、降低成本，实现精氨酸脱亚胺酶的胞外分泌表达，适用于精氨酸脱亚胺酶的规模化生产。
利用酵母分泌表达精氨酸亚胺构建方法

[发明专利]一种精氨酸脱亚胺酶及其重组表达方法和应用-CN200910205114.9无效
发明人：李川江 -专利权人：广州华银医药科技有限公司
申请日： 2009-09-25 - 公布日： 2010-08-04 - 主分类号： C12N9/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种为优化与聚乙二醇交联而基因重组的精氨酸脱亚胺酶及其应用。与现有的精氨酸脱亚胺酶相比，该精氨酸脱亚胺酶分子表面与聚乙二醇交联的赖氨酸位点分布均匀。重组的精氨酸脱亚胺酶基因是以设计的DNA为模板由链式聚合酶反应扩增而成，再克隆进质粒中并转化到受体细胞内表达。纯化的重组精氨酸脱亚胺酶与聚乙二醇的交联物可用于治疗与自身不能合成精氨酸相关的多种肿瘤疾病。本发明公开的基因重组精氨酸脱亚胺酶及其交联物比现有的精氨酸脱亚胺酶及其交联物能更有效地抑制肿瘤细胞生长，具有更低的免疫原性。
一种精氨酸亚胺及其重组表达方法应用

[发明专利]一种肺癌细胞膜包裹精氨酸脱亚胺酶脂质纳米粒及其制备方法-CN202110999620.0有效
发明人：张景勍;袁誉铭;杨强;袁子怡;何丹;吴诗情 -专利权人：重庆医科大学
申请日： 2021-08-29 - 公布日： 2022-10-28 - 主分类号： A61K9/51 文献下载
摘要：本发明涉及肺癌细胞膜包裹精氨酸脱亚胺酶脂质纳米粒及其制备方法。本发明制备得到肺癌细胞膜包裹精氨酸脱亚胺酶脂质纳米粒可以增加精氨酸脱亚胺酶的稳定性，提高精氨酸脱亚胺酶抗蛋白酶水解的能力，提高生物利用度，且具有靶向性。
一种肺癌细胞膜包裹精氨酸亚胺酶脂质纳米及其制备方法

[发明专利]酶活提高的精氨酸脱亚胺酶突变体T32Y-CN202310779377.0在审
发明人：张涛;王文玉;江波;高巍 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-03-30 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明公开了酶活提高的精氨酸脱亚胺酶突变体T32Y，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明利用定点突变技术对野生型精氨酸脱亚胺酶arcA编码基因进行分子改造，得到了突变体酶ADIT32Y，相对于野生型精氨酸脱亚胺酶氨基酸序列的第32位苏氨酸突变为酪氨酸本发明所述的定点突变改造的精氨酸脱亚胺酶正向突变体与野生酶相比其酶活力提高了1.78倍，解决了精氨酸脱亚胺酶催化能力低的问题。
提高精氨酸亚胺突变体 t32y

[发明专利]酶活提高的精氨酸脱亚胺酶突变体T203G-CN202310776976.7在审
发明人：张涛;王文玉;江波;高巍 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-03-30 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明公开了酶活提高的精氨酸脱亚胺酶突变体T203G，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明利用定点突变技术对野生型精氨酸脱亚胺酶arcA编码基因进行分子改造，得到了突变体酶ADIT203G，相对于野生型精氨酸脱亚胺酶氨基酸序列的第203位苏氨酸突变为甘氨酸本发明所述的定点突变改造的精氨酸脱亚胺酶正向突变体与野生酶相比其酶活力提高了1.69倍，解决了精氨酸脱亚胺酶催化能力低的问题。
提高精氨酸亚胺突变体 t203g

[发明专利]酶活提高的精氨酸脱亚胺酶突变体A103Y-CN202310779328.7在审
发明人：张涛;高巍;王文玉;江波 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-03-30 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明公开了酶活提高的精氨酸脱亚胺酶突变体A103Y，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明利用定点突变技术对野生型精氨酸脱亚胺酶arcA编码基因进行分子改造，得到了突变体酶ADIA103Y，相对于野生型精氨酸脱亚胺酶氨基酸序列的第103位丙氨酸突变为酪氨酸本发明所述的定点突变改造的精氨酸脱亚胺酶正向突变体与野生酶相比其酶活力提高了1.72倍，解决了精氨酸脱亚胺酶催化能力低的问题。
提高精氨酸亚胺突变体 a103y

[发明专利]酶活提高的精氨酸脱亚胺酶突变体G345A-CN202310779343.1在审
发明人：张涛;王文玉;江波;高巍 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-03-30 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明公开了酶活提高的精氨酸脱亚胺酶突变体G345A，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明利用定点突变技术对野生型精氨酸脱亚胺酶arcA编码基因进行分子改造，得到了突变体酶ADIG345A，相对于野生型精氨酸脱亚胺酶氨基酸序列的第345位甘氨酸突变为丙氨酸本发明所述的定点突变改造的精氨酸脱亚胺酶正向突变体与野生酶相比其酶活力提高了2.11倍，解决了精氨酸脱亚胺酶催化能力低的问题。
提高精氨酸亚胺突变体 g345a

[发明专利]重组精氨酸脱亚胺酶及其产业化制备方法和应用-CN201711371748.2有效
发明人：马永;赵百学;王俊 -专利权人：江苏众红生物工程创药研究院有限公司
申请日： 2017-12-19 - 公布日： 2021-06-15 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明提供了重组精氨酸脱亚胺酶及其编码基因、制备方法、应用。本发明针对大肠杆菌表达系统对编码基因、载体、菌株、制备工艺及缓冲体系都进行了全面的优化及筛选，相比密码子优化前，优化后的精氨酸脱亚胺酶编码基因重组表达获得的精氨酸脱亚胺酶表达量和活性都有了大幅提高。同时，本专利通过对重组精氨酸脱亚胺酶重组菌发酵工艺的优化，可稳定获得高产量及活性的目的蛋白。此外，本专利还提供了体系优良的重组精氨酸脱亚胺酶酶活测定系统，真实的反应了重组蛋白的酶活。体外活性表明，本专利提供的重组精氨酸脱亚胺酶可有效抑制多种肿瘤细胞的生长，具有广阔的药用前景及产业化生产可能性。
重组精氨酸亚胺及其产业化制备方法应用

[发明专利]一种突变的精氨酸脱亚胺酶及其制备方法和应用-CN201510012021.X有效
发明人：任丽梅;刘健;袁国强;郭军臣;赵英杰;徐永龙;李鹤;李晓静;成志远 -专利权人：石药集团中诺药业(石家庄)有限公司
申请日： 2015-01-09 - 公布日： 2017-07-14 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明公开了一种突变的精氨酸脱亚胺酶及其制备方法和应用，所述突变的精氨酸脱亚胺酶在K137A、F198W、V230A、R257L、A260D中的任意一个或多个位点发生突变，突变后的精氨酸脱亚胺酶的活性明显提高突变的精氨酸脱亚胺酶采用易错PCR体系制备得到。
一种突变精氨酸亚胺及其制备方法应用

[发明专利]改性乳的制造方法-CN200980138200.0有效
发明人：三轮典子 -专利权人：味之素株式会社;天野酶株式会社
申请日： 2009-09-28 - 公布日： 2011-08-24 - 主分类号： A23C9/152 文献下载
摘要：提供通过减少、除去热经历低的原料乳中存在的蛋白质脱酰胺酶的反应抑制物质，进一步效率良好且有效果地使蛋白质脱酰胺酶作用于热经历低的原料乳，得到具有浓厚且奶油般口感的乳制品的方法。实施钙螯合剂添加处理等减少蛋白质脱酰胺酶的抑制物质的处理后或者在实施的同时，使蛋白质脱酰胺酶作用于热经历低的原料乳。
改性制造方法

[发明专利]关节炎型支原体精氨酸脱亚胺酶突变体及其应用-CN201310159336.8有效
发明人：胡海峰;李小灵;刘英 -专利权人：上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院
申请日： 2013-05-03 - 公布日： 2017-05-10 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明公开了一种关节炎型支原体精氨酸脱亚胺酶突变体及其基因、聚乙二醇修饰物和应用。所述精氨酸脱亚胺酶突变体为由两氨基酸序列如序列表中SEQ ID No2所示的蛋白质亚基构成的二聚体。本发明的精氨酸脱亚胺酶突变体在大肠杆菌中表达量增加，精氨酸脱亚胺酶的复性效率提高，酶活性不改变，适合产业化生产。精氨酸脱亚胺酶突变体的聚乙二醇修饰物可用于制备抗肿瘤（抗肝癌、白血病、黑色素瘤等）药物。
关节炎支原体精氨酸亚胺突变体及其应用

[发明专利]液体酶制剂-CN202180080379.X在审
发明人：乘船沙纪;田中裕介 -专利权人：天野酶制品株式会社
申请日： 2021-12-02 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12N9/80 文献下载
摘要：本发明提供一种活性稳定性优异的蛋白质脱酰胺酶的液体酶制剂。一种液体酶制剂，包含蛋白质脱酰胺酶和30w/v％以上的山梨醇，pH为5.5以上，该液体酶制剂能够提高蛋白质脱酰胺酶活性的稳定性。
液体酶制剂

[发明专利]一株酶活和温度稳定性提高的精氨酸脱亚胺酶突变体及其应用-CN201710119423.9有效
发明人：张涛;江波;蒋航宇;沐万孟;缪铭 -专利权人：江南大学
申请日： 2017-03-02 - 公布日： 2019-07-16 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：一种酶活和温度稳定性提高的精氨酸脱亚胺酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。该精氨酸脱亚胺酶突变体为酶活性中心附近的甘氨酸突变为脯氨酸，即Gly292 Pro。本发明利用定点突变技术对野生型精氨酸脱亚胺酶arcA编码基因进行分子改造，得到了一种突变体酶ADI^G292P，相对于野生型精氨酸脱亚胺酶氨基酸序列的第292位甘氨酸突变为脯氨酸。本发明所述的定点突变改造的精氨酸脱亚胺酶与野生酶相比其酶活力提高了1.5倍，在40℃下的半衰期提高了5.43倍，解决了精氨酸脱亚胺酶催化瓜氨酸合成时，催化能力和温度稳定性低的问题，为高效合成瓜氨酸的工业化生产及医药应用奠定了基础
一株酶活温度稳定性提高精氨酸亚胺突变体及其应用

[发明专利]包载精氨酸脱亚胺酶纳米反应器的构建-CN201711241282.4在审
发明人：殷以华;万燕鸣;代悦;潘茜;郑丽敏 -专利权人：武汉理工大学
申请日： 2017-11-30 - 公布日： 2018-05-08 - 主分类号： A61K38/50 文献下载
摘要：本发明涉及包载精氨酸脱亚胺酶纳米反应器的构建，其有效成分别为一种光交联两亲性聚合物和精氨酸脱亚胺酶，该酶纳米反应器采用以下方法制成：采用pH诱导可光交联的羧甲基壳聚糖钠盐胶束转化成纳米囊，实现温和条件下封装精氨酸脱亚胺酶；通过紫外光光辐射交联，快速锁定纳米囊构造，获得稳定高活性的包载精氨酸脱亚胺酶纳米反应器。本发明制得的精氨酸脱亚胺酶纳米反应器集自组装与载酶于一体，制备方法简单，并且对精氨酸代谢显示高活性，在癌症治疗等领域有潜在的应用价值。
精氨酸亚胺纳米反应器构建

[发明专利]工程化嵌合聚乙二醇化ADI和使用方法-CN201580022377.X有效
发明人： B-W·吴;R·阿尔玛西;何玮;R·E·肖沃尔特;何娇娟;郭云云;J·A·汤姆森 -专利权人：瑞华药业集团
申请日： 2015-03-18 - 公布日： 2020-12-18 - 主分类号： A61K38/50 文献下载
摘要：本发明提供了嵌合精氨酸脱亚胺酶(包括聚乙二醇化嵌合精氨酸脱亚胺酶)，和有关组合物及其使用方法(包括治疗癌症的方法)。
工程嵌合聚乙二醇 adi 使用方法

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