本发明公开了一种来源于海洋放线菌的热稳定脂肪酶及其应用，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；该热稳定脂肪酶基因序列如SEQ ID NO:1所示。本发明获得中性脂肪酶，在pH7.0具有最适酶活性，其对橄榄油的水解反应中，最适温度为70℃；对大豆卵磷脂为底物的水解反应中，最适反应温度为40℃。同时该脂肪酶还具有极好的热稳定性，60℃处理半小时仍然具有95％的酶活性剩余。对有机溶剂有较强的耐受性。本发明的脂肪酶可适用于高温下催化植物油进行甘油酯的水解和生成甘油二酯。采用所述方法得到的重组脂肪酶，具有较高的催化活性和热稳定性。
本发明提供了一种脂肪酶及其编码基因，含有该编码基因的载体、工程菌及其应用。所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码基因如SEQ ID NO.2所示。本发明脂肪酶基因可与表达载体连接构建得到含该基因的胞内表达重组质粒，再转化至大肠杆菌菌株中，获得重组大肠杆菌；该重组大肠杆菌经细胞破碎，分离纯化获得重组脂肪酶；该重组脂肪酶具有催化拆分(R,S)‑扁桃酸甲酯的能力
本发明涉及生物技术领域，涉及一种脂肪酶突变体及其用途，该突变体是由野生型南极假丝酵母菌脂肪酶B（CALB）出发经过突变得到的，具体涉及一种脂肪酶突变体和其制备方法以及利用该脂肪酶突变体通过催化布洛芬类化合物的酯衍生物水解本发明中，野生型南极假丝酵母菌脂肪酶B通过突变得到具有改良性质的脂肪酶，该酶在毕氏酵母工程菌中表达，该脂肪酶包括与SEQ ID NO.02至少85%同一性的氨基酸序列，并且具有对应于SEQ ID NO.02本发明通过对南极假丝酵母菌脂肪酶B进行突变，提高了其对布洛芬类化合物的对映选择性。
本发明公开了一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用，一种枯草芽孢杆菌脂肪酶，大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a-Lip A f12-C2(R33W/L140F)，CCTCC这种高活力脂肪酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，其步骤是：第一是通过PCR扩增出枯草芽孢杆菌脂肪酶Lip A结构基因；第二是设计二对诱变引物，通过重叠PCR法将两个突变位点依次引入脂肪酶Lip A基因；第三获得高活力脂肪酶产生菌BL21(DE3)/Lip A(R33W/L140F)；第四是在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达目的蛋白一种枯草芽孢杆菌脂肪酶在皮革加工中的应用。本发明方法易行，成本低廉，高酶活脂肪酶突变株蛋白在食品、化工和医药等行业具有重要应用价值。
本发明公开了一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用，一种枯草芽孢杆菌脂肪酶，大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a-/Lip A f10-H1(I12V/L140F/D144E这种高活力脂肪酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，其步骤是：第一是通过PCR扩增出枯草芽孢杆菌脂肪酶Lip A结构基因；第二是设计3对诱变引物，通过重叠PCR将突变引入脂肪酶Lip A基因；第三获得高活力脂肪酶产生菌BL21(DE3)/Lip A(I12V/L140F/D144E)；第四是在大肠杆菌中诱导表达目的蛋白；第五是纯化蛋白一种枯草芽孢杆菌脂肪酶在洗涤剂工业中的应用。本发明方法易行，成本低廉，高酶活脂肪酶突变株蛋白在食品、能源、化工和医药等行业具有重要应用价值。
