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[发明专利]胆固醇氧化酶的稳定化方法-CN201380021290.1有效
发明人：荒武知子;金城健太 -专利权人：协和梅迪克斯株式会社
申请日： 2013-04-18 - 公布日： 2017-06-09 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本发明提供胆固醇氧化酶的稳定化方法、胆固醇氧化酶的保存方法及胆固醇氧化酶的稳定化组合物。一种胆固醇氧化酶的稳定化方法及胆固醇氧化酶的保存方法，其特征在于，使α‑酮酸在水性介质中与胆固醇氧化酶共存；一种胆固醇氧化酶的稳定化组合物，其特征在于，使α‑酮酸在水性介质中与胆固醇氧化酶共存。本发明的胆固醇氧化酶的稳定化方法、胆固醇氧化酶的保存方法及胆固醇氧化酶的稳定化组合物在代谢综合征等的临床诊断中有用。
胆固醇氧化酶稳定方法

[发明专利]一种胆固醇氧化酶亲和介质及其合成和大规模纯化胆固醇氧化酶方法-CN201010273489.1有效
发明人：辛瑜;杨海麟;张玲;夏小乐;张玉然;仝艳军;王武 -专利权人：江南大学
申请日： 2010-09-06 - 公布日： 2012-03-21 - 主分类号： B01J20/24 文献下载
摘要：本发明涉及一种胆固醇氧化酶亲和介质，由胆固醇氧化酶亲和配体和层析介质连接而成，较佳地，胆固醇氧化酶亲和配体是FAD片段核黄素，所述层析介质是Sepharose、壳聚糖或聚苯乙烯，还提供了上述胆固醇氧化酶亲和介质的合成方法，以及利用上述的胆固醇氧化酶亲和介质大规模纯化胆固醇氧化酶的方法，利用本发明的胆固醇氧化酶亲和介质可以大规模快速分离纯化胆固醇氧化酶，可在仅用一步亲和层析的情况下，得到胆固醇氧化酶纯品，整个纯化步骤消耗时间段
一种胆固醇氧化酶亲和介质及其合成大规模纯化方法

[发明专利]新胆固醇氧化酶基因及其应用-CN200310113796.3无效
发明人：郭三堆;张锐 -专利权人：中国农业科学院生物技术研究所;郭三堆;张锐
申请日： 2003-11-26 - 公布日： 2004-12-29 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种新胆固醇氧化酶基因以及该基因编码的蛋白质。该胆固醇氧化酶基因来源于马红球菌，这种基因所编码的胆固醇氧化酶可用于降低食品中的胆固醇含量，用于食品加工。同时，这种基因所编码的胆固醇氧化酶可高效毒杀棉铃象甲，并抑制鳞翅目昆虫的生长繁殖，可用于作物的虫害防治。
胆固醇氧化酶基因及其应用

[发明专利]一种胆固醇氧化酶突变体及其制备方法与应用-CN201710863361.2在审
发明人：秦慧民;路福平;毛淑红;朱张亮 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2017-09-22 - 公布日： 2018-03-02 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明提供一种通过定向改造构建的酶活力提高的胆固醇氧化酶突变体、制备方法与应用，以简单脂肪杆菌(Pimelobacter simplex)TCCC11037基因组为模板克隆出胆固醇氧化酶PsCO基因，构建重组菌株，通过反向PCR和定点突变技术获得酶活力提高的胆固醇氧化酶突变体F70L。获得的胆固醇氧化酶突变体F70L比酶活为33.35U/mg，较野生型提高了163.24％，催化胆固醇生产胆甾4‑烯‑3‑酮的催化效率提高了250％。本发明提供的胆固醇氧化酶突变体的比酶活有较大幅度提高，为今后生物酶法高效催化生产甾体药物提供了理论依据与技术保障，并且也为胆固醇氧化酶在临床上用于胆固醇的检测提供新的思路。
一种胆固醇氧化酶突变体及其制备方法应用

[实用新型]同时测定胆固醇和葡萄糖的微型三电极传感器-CN202021438472.2有效
发明人：孙立勇;林启敬;张赟 -专利权人：明石创新（烟台）微纳传感技术研究院有限公司
申请日： 2020-07-21 - 公布日： 2021-02-19 - 主分类号： G01N27/327 文献下载
摘要：本实用新型涉及生物传感技术领域，尤其涉及同时测定胆固醇和葡萄糖的微型三电极传感器，包括硅片衬底及硅片衬底上分别设有的对电极、工作电极组与参比电极；工作电极组包括各自呈圆形的胆固醇氧化酶工作电极和葡萄糖氧化酶工作电极；对电极半包裹并隔开胆固醇氧化酶工作电极和葡萄糖氧化酶工作电极；参比电极位于胆固醇氧化酶工作电极和葡萄糖氧化酶工作电极之间；对电极、胆固醇氧化酶工作电极、葡萄糖氧化酶工作电极和参比电极依次分别通过一级铂导线、二级铂导线、四级铂导线、三级铂导线连接外部设备，本实用新型采用氧化还原反应原理检测葡萄糖和胆固醇浓度，使得灵敏度高，有较好的稳定性和同步性。
同时测定胆固醇葡萄糖微型电极传感器

[发明专利]一种胆固醇氧化酶及其应用-CN201910266761.4有效
发明人：张玲;王武;武迪;杨海麟;辛瑜 -专利权人：江南大学
申请日： 2019-04-03 - 公布日： 2020-12-15 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种胆固醇氧化酶及其应用，属于酶工程技术领域。本发明首先构建得到胆固醇氧化酶的基因工程菌E.coli BL21(DE3)‑pET20b(+)‑COD，其发酵所得的粗酶液中胆固醇氧化酶酶活高达700U·L‑1，纯化得到的胆固醇氧化酶比酶活为18.5U·mg‑1，其分子量约60,000kDa，该胆固醇氧化酶具有良好的温度耐受性和有机溶剂耐受性。利用工程菌发酵液制备胆甾‑4‑烯‑3‑酮和胆甾‑4‑烯‑3,6‑二酮，在有机相为甲苯的两相转化体系中，以胆固醇为底物制备胆甾‑4‑烯‑3‑酮的转化率为30％；制备胆甾‑4‑烯‑3,6‑二酮的转化率为45
一种胆固醇氧化酶及其应用

[发明专利]胆固醇氧化酶基因和工程菌及应用-CN201110024406.X有效
发明人：魏东芝;王风清;姚抗;陶欣艺 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2011-01-21 - 公布日： 2011-08-31 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明提供了胆固醇氧化酶基因及其编码的胆固醇氧化酶，提供了含有其基因序列的表达载体和含有该表达载体的基因工程重组菌株，提供了制备该胆固醇氧化酶的方法。本发明提供的胆固醇氧化酶重组菌株可用于对3-羟基类甾体化合物进行3位羟基脱氢或甾醇代谢，还可用于降解甾醇的应用，从而解决了甾体医药工业中分枝杆菌和红球菌降解甾醇利用率低的问题。
胆固醇氧化酶基因工程应用

[发明专利]生物传感器-CN200310113176.X无效
发明人：渡边基一;中南贵裕;谷池优子;宫下万里子;吉冈俊彦 -专利权人：松下电器产业株式会社
申请日： 2003-12-25 - 公布日： 2004-07-07 - 主分类号： C12Q1/44 文献下载
摘要：本发明提供仅一次供给试样，就可以准确且简便地测定LDL胆固醇的生物传感器和测定方法。通过将胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶或者胆固醇脱氢酶、对LDL选择性进行酶反应的试剂、过氧化酶和色素源担载在基板上，构成生物传感器。
生物传感器

[发明专利]在表面活性剂存在下稳定的胆固醇氧化酶-CN200610091280.7有效
发明人：阪上了一;梶山直树 -专利权人：龟甲万株式会社
申请日： 2006-06-08 - 公布日： 2007-01-10 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：在表面活性剂存在下具有稳定性的新的胆固醇氧化酶与编码该新胆固醇氧化酶的基因。
表面活性剂在下稳定胆固醇氧化酶

[发明专利]一种胆固醇氧化酶产生菌的筛选方法-CN201310253449.4无效
发明人：杨严俊;苏宇杰;王冠超 -专利权人：江南大学
申请日： 2013-06-20 - 公布日： 2013-10-23 - 主分类号： C12Q1/60 文献下载
摘要：本发明公开了一种胆固醇氧化酶产生菌的筛选方法，属于应用微生物技术领域。本发明采用改进的初筛和复筛相结合的方法，可高效、准确地用于胆固醇氧化酶产生菌的筛选；采用本发明方法筛选出的菌株，其产出的胆固醇氧化酶的活力高达880U/L。
一种胆固醇氧化酶产生筛选方法

[发明专利]一种提高胆固醇氧化酶对底物谷甾醇的特异性的方法-CN201611154117.0在审
发明人：曹书华 -专利权人：曹书华
申请日： 2016-12-14 - 公布日： 2017-03-22 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高胆固醇氧化酶对底物谷甾醇的特异性的方法，属于酶工程技术领域。本发明的突变体，是在Rhodococcus sp.源(以前被分类命名为Brevibacterium sp.DGCDC‑82)的胆固醇氧化酶的基础上进行氨基酸删除突变得到的。原始的Rhodococcus sp.源的胆固醇氧化酶对胆固醇，谷甾醇，孕烯酮醇，胆甾烷醇这4种底物的活性差不多，而本发明的突变体的底物特异性有显著变化，对谷甾醇的活性最高，是对胆固醇的活性的6.2倍。通过本发明的方法，有效提高了胆固醇氧化酶对底物谷甾醇的特异性。
一种提高胆固醇氧化酶底物谷甾醇特异性方法

[发明专利]纳米氧化铜为催化剂的流动注射化学发光测定胆固醇的方法-CN201210272449.4有效
发明人：陈伟;洪磊;刘爱林;李光文;林新华 -专利权人：福建医科大学
申请日： 2012-08-01 - 公布日： 2012-11-28 - 主分类号： G01N21/76 文献下载
摘要：本发明公开一种纳米氧化铜为催化剂的流动注射化学发光测定胆固醇的方法，包括如下步骤：将胆固醇、胆固醇氧化酶和磷酸盐缓冲溶液混合温浴后成反应液，将反应液稀释后，经蠕动泵运输进入混合器中与纳米氧化铜胶体溶液混合，而后与鲁米诺溶液混合，三者混合后进入流动池反应，产生的化学发光强度经光电倍增管检测以测定胆固醇。利用胆固醇氧化酶催化胆固醇氧化产生过氧化氢，结合流动注射技术，增强胆固醇测定中的化学发光信号，增强倍数约为600，利用胆固醇-胆固醇氧化酶-鲁米诺-纳米氧化铜流动注射化学发光法对胆固醇含量进行测定，线性范围为可应用于食品中胆固醇含量测定以及血清中游离胆固醇与总胆固醇的测定。
纳米氧化铜催化剂流动注射化学发光测定胆固醇方法

[发明专利]一种PEG修饰胆固醇氧化酶和胆固醇脂酶的制备方法-CN201810306747.8在审
发明人：罗维晓;魏海明;王美丽;胡晓飞 -专利权人：山东博科生物产业有限公司
申请日： 2018-04-08 - 公布日： 2018-09-28 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种PEG修饰胆固醇氧化酶和胆固醇脂酶的制备方法，属于临床体外检测技术领域，其基本步骤为首先配置缓冲液，然后加入对氨基苯磺酸和AEO‑9两种物质作为激活剂，然后加入载体PEG20000（sigma），再加入保护剂以及乳化剂和离子物质搅拌均匀后，依次加入胆固醇氧化酶和胆固醇脂酶，慢中速搅拌10分钟，然后使用低转速离心机离心后，取出上清液即可得到同等效果的PEG修饰酶。配方组成成分：PIEPES、对氨基苯磺酸、AEO‑9、PEG20000、保护剂、乳化剂、离子物质、胆固醇氧化酶、胆固醇脂酶、MIT，本方法操作简单、成本低，与PEG修饰酶法检测高密度脂蛋白胆固醇具有良好的兼容性
胆固醇氧化酶胆固醇脂酶对氨基苯磺酸离子物质保护剂乳化剂制备高密度脂蛋白胆固醇离心机离心酶法检测配方组成体外检测低转速缓冲液激活剂兼容性上清液取出配置

[发明专利]一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法-CN201510579285.3在审
发明人：黄争上 -专利权人：绍兴圣康生物科技有限公司
申请日： 2015-09-14 - 公布日： 2015-12-09 - 主分类号： G01N33/92 文献下载
摘要：本发明公开了一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括聚乙二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇:抗坏血酸氧化酶:过氧化物酶=（1—3）:（4—6）:（9—11）；第二检测液包括4—氨基安替吡啉、过氧化物酶、胆固醇氧化酶，原材料浓度比份为：4—氨基安替吡啉:过氧化物酶:胆固醇氧化酶=（1—3）:（9—11）:（4—6）。本发明所述的一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，其通过酶比色法，操作简单，准确性高，便于推广。
一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法

[发明专利]残粒样脂蛋白中的胆固醇测定方法、试剂及试剂盒-CN200680046439.1无效
发明人：三岛慎刚;宫内一人 -专利权人：协和梅迪克斯株式会社
申请日： 2006-12-08 - 公布日： 2008-12-17 - 主分类号： C12Q1/60 文献下载
摘要：本发明提供用于简便且准确地测定检体中所含的残粒样脂蛋白(RLP)中的胆固醇(RLP－C)的方法。一种测定检体中的RLP－C的方法，包括步骤：(i)在含有表面活性剂A的水性介质中，使检体与胆固醇氧化酶或者胆固醇脱氢酶及氧化型辅酶反应，除去RLP以外的脂蛋白中的胆固醇的步骤；(ii)使前述步骤(i)中除去了RLP以外的脂蛋白中的胆固醇后的反应液中存在表面活性剂B，并与胆固醇酯水解酶及胆固醇氧化酶、或者胆固醇酯水解酶、胆固醇脱氢酶及氧化型辅酶反应，生成过氧化氢或还原型辅酶的步骤；和(iii)测定前述步骤(ii)中生成的过氧化氢或还原型辅酶的步骤。
残粒样脂蛋白中的胆固醇测定方法试剂试剂盒

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