本发明公开了一种糖基转移酶及其应用。糖基转移酶，其为(a)、(b)或(c)所示的蛋白质：(a)：如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)：在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有碳‑糖基化和氧‑糖基化的催化活性的由(a)衍生的蛋白质。(c)：与(a)的氨基酸序列同源性≥90％，且具有碳‑糖基化和氧‑糖基化的催化活性的氨基酸序列。本发明首次发现天然的微生物来源的糖基转移酶Gra‑ORF14同时具有碳‑糖基化和氧‑糖基化的催化活性。同时，本发明也在国内外首次公开了糖基转移酶Gra‑ORF14在催化芳香聚酮化合物生成相应的同时含有碳‑糖基化和氧‑糖基化形式的芳香聚酮化合物中的应用。
本发明属于蛋白重组的技术领域，具体涉及一种用于重组蛋白的高糖基化修饰序列及其重组猪促卵泡激素和应用。所述高糖基化修饰序列的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示，经毕赤酵母密码子优化后的核酸序列如序列表SEQ ID NO.2所示。所述重组猪促卵泡激素为猪促卵泡激素的重组蛋白，其为猪促卵泡激素基因与高糖基化修饰序列进行重组融合得到；将本发明经优化的高糖基化修饰序列与猪FSH融合得到重组蛋白，对该蛋白进行毕赤酵母密码子优化修饰后进行高效表达，适度的糖基化修饰以及二硫键的形成提高了重组FSH蛋白的生物学活性和蛋白稳定性，能够高效刺激动物卵巢的增重，具有优异的生物学活性。
本发明公开了一种N糖基转移酶突变体F13，是对来源于胸膜肺炎放线杆菌中的N‑糖基转移酶基因经过N471I、S275A、P497R三点突变获得；其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了所述突变体F13作为多肽糖基化修饰的工具酶将含有N‑X‑S/T序列的多肽进行糖基化形成糖肽或糖蛋白中的应用。本发明的突变体F13相较野生型NGT糖基化效率和底物范围显著提高，能够广泛糖基化野生型NGT不能糖基化的片段例如IgG片段并且能够利用野生型不能利用的糖供体UDP‑GlcA，可以实现简单快速的利用UDP‑Glc/UDP‑Gal/UDP‑GlcA将含有N‑X‑S/T序列的多肽进行糖基化修饰，并可进一步利用其他的糖基转移酶对糖肽的糖链进行修饰获得目的糖肽。这为多肽与蛋白的糖基化修饰提供了一种新途径，为糖蛋白疫苗的合成提供了一种简便方法。
