本发明属于生物基因工程的技术领域,具体涉及一种猫粒细胞集落刺激因子突变体、融合蛋白和应用。所述突变体为将猫粒细胞集落刺激因子进行氨基酸位点突变得到,所得突变体的氨基酸序列分别如序列表SEQ ID NO.1~3所示。所述融合蛋白为猫粒细胞集落刺激因子及其突变体与蛋白标签分别进行密码子优化之后,融合得到,所述猫粒细胞集落刺激因子及其突变体进行密码子优化之后的核酸序列如序列表5~8所示;所得突变体以及融合蛋白,具有高表达量以及高活性,融合标签蛋白小,注射使用不容易产生抗体,解决了现有技术中犬或其它源G‑CSF及其融合蛋白用于猫的治疗上的一些异源反应,活性不高等问题。
本发明属于生物工程的技术领域,具体涉及一种猪圆环病毒2型和3型的重组基因及其应用。所述重组基因为经过优化的PCV2d株ORF2蛋白的编码基因与经过优化的PCV3型表位的编码基因的融合而成;所述重组基因的核酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示;所述重组基因为经过优化的PCV3型表位的编码基因融合在经过优化的PCV2d株ORF2蛋白的编码基因的C端得到;通过获得有效的PCV3C病毒抗原表位的编码基因,根据PCV2d ORF2蛋白的结构特点,在其C端融合PCV3C抗原表位,获得重组基因,翻译得到的融合蛋白能在大肠杆菌实现高水平的可溶表达,且能组装成VLPs,小鼠中验证其免疫效果,初步结论证明该重组基因的设计具有较大的应用价值。
本发明属于GnRH检测试剂盒的技术领域,具体涉及一种用于检测动物血清中GnRH抗体滴度的ELISA试剂盒,所述试剂盒包括预先包被和封闭的ELISA反应板,为以GnRH多肽作为包被抗原,还包括包被液和封闭液;所述GnRH多肽的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示;所述GnRH试剂盒还包括标准阴性血清、标准阳性血清、辣根过氧化酶HRP标记山羊抗猫IgG、洗涤液、稀释液、底物液以及终止液;采用GnRH多肽抗原作为包被抗原,采用了ELISA检测方法用以检测GnRH抗体滴度,从而了解动物该阶段的生殖能力,节约包被和封闭的时间,缩短了对GnRH的检测流程,能够稳定地检测动物血清中GnRH抗体滴度。
本发明属于干扰素基因工程的技术领域,具体涉及一种猫ω干扰素突变体及其制备方法和应用。所述突变体包括成熟肽猫ω干扰素突变体;所述成熟肽猫ω干扰素突变体为将成熟肽猫ω干扰素进行定点突变得到,其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.6所示;对猫ω干扰素进行氨基酸位点的突变形成具有糖基化位点的突变体,对毕赤酵母密码子优化修饰后的猫ω干扰素及猫ω干扰素突变体进行表达,适度的糖基化修饰提高了猫干扰素突变体的生物活性及延长了半衰期,解决现有表达系统及相关生物技术制备的猫干扰素含量低、生物学活性低、半衰期短、稳定性差、二硫键难以形成、生产工艺复杂、纯化制备成本高等问题。
本发明属于狂犬病毒重组蛋白的技术领域,具体涉及一种狂犬病毒的preG改性蛋白及其应用。所述preG改性蛋白为将狂犬病毒preG蛋白中qc连接区(Leu257‑Val273)的氨基酸突变成、插入或替换其它氨基酸而得到,所述其它氨基酸包括脯氨酸。所述preG改性蛋白的氨基酸序列包括如序列表SEQ ID NO.2~SEQ ID NO.35所示。稳定preG蛋白qC区的螺旋区域,防止其形成多余的螺旋结构而导致其的发生折叠,防止其打开折叠形成postG的结构,从而稳定了其preG的构象,保证了其结构的稳定性,提高了其蛋白结构表达量同时,也提高了其免疫原性,形成表达量大、并且可溶表达的疫苗。
本发明属于蛋白重组的技术领域,具体涉及一种用于重组蛋白的高糖基化修饰序列及其重组猪促卵泡激素和应用。所述高糖基化修饰序列的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示,经毕赤酵母密码子优化后的核酸序列如序列表SEQ ID NO.2所示。所述重组猪促卵泡激素为猪促卵泡激素的重组蛋白,其为猪促卵泡激素基因与高糖基化修饰序列进行重组融合得到;将本发明经优化的高糖基化修饰序列与猪FSH融合得到重组蛋白,对该蛋白进行毕赤酵母密码子优化修饰后进行高效表达,适度的糖基化修饰以及二硫键的形成提高了重组FSH蛋白的生物学活性和蛋白稳定性,能够高效刺激动物卵巢的增重,具有优异的生物学活性。