本发明涉及突变的蛋白A结构域C及其应用。具体而言，本发明提供一种分离的多肽，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：9所示或如SEQ ID NO：11所示。本发明还提供含有所述多肽的融合蛋白、重组蛋白A，相应的编码序列、核酸构建物、表达系统、分离基质、方法及用途。本发明的分离多肽相对于天然C结构域，在碱清洗过程中具有明显提升的碱性稳定性。
本发明涉及生物技术领域，尤其是一种具有双高特性的链球菌溶血素O蛋白的制备方法，包括以下步骤：1)基因合成；2)载体构建；利用串联重复的SLO蛋白78AA‑571AA进行载体构建；SLO蛋白78AA‑571AA表示SLO蛋白全长序列第78位氨基酸到571位氨基酸，序列如SEQ ID NO:1所示；3)菌种转化；4)链球菌溶血素O蛋白的纯化。本发明方法获得的链球菌溶血素O蛋白SLO简单易纯化、产量高、批间差异小，蛋白稳定性好，反应度高；而且，采用本发明方法分离纯化得到的双高特性的串联的链球菌溶血素O蛋白SLO可用于质控品和校准品的制备，有利于各厂家和实验室的结果比较及质量控制。
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种重组蛋白A及其应用。本发明提供的重组蛋白A的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，可以与F(ab’)2和VHH结合，以本发明所述重组蛋白A为配体的亲和层析介质可以实现对IgG抗体、F（ab’）2片段以及VHH的纯化。将编码本发明所述重组蛋白A的核苷酸序列插入表达载体构建重组质粒，然后将重组质粒导入原核宿主细胞中进行表达，经Ni亲和层析纯化、透析可获得纯度大于95％的目的蛋白。本发明制得的重组蛋白A增强了与Fab片段特异性结合的作用，有效扩大了蛋白A的应用范围。
本发明公开了一种基于特征算法控制合成的重组蛋白及其应用，属于蛋白质技术领域。所述的重组蛋白的编码基因的序列如SEQ ID NO：1所示；所述的重组蛋白是将金黄色葡萄球菌蛋白A一个或多个结构域中的一个或多个氨基酸替换成为耐碱性氨基酸的突变体。所述重组蛋白应用于亲和层析介质的制备，其方法如下：以含琼脂糖凝胶4B单体的微球为基质，经亲水性树枝状大分子修饰、活化、偶联重组蛋白配基并封尾后得到。基于本发明提供的重组金黄色葡萄球菌蛋白A，具有较好的化学稳定性、耐碱性以及更为优异的IgG结合能力，因此本发明提供的重组金黄色葡萄球菌蛋白A作为亲和配基制备亲和层析填料，应用于抗体的分离纯化。
