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[发明专利]一种噬菌蛭弧菌粉有效活菌含量的计数方法-CN201110347334.2有效
发明人：曹海鹏;何珊;卫若鹏 -专利权人：山西卫氏鱼康实业有限公司;山西省生物兽药饲料工程技术研究中心(有限公司)
申请日： 2011-11-07 - 公布日： 2012-02-15 - 主分类号： C12Q1/08 文献下载
摘要：本发明提供了一种噬菌蛭弧菌粉有效活菌含量的计数方法，是将待测样品经过适当稀释之后，其中的噬菌蛭弧菌充分分散成单个细胞，然后在10倍稀释的无菌营养肉汤中通过孵育培养而生长繁殖，从而形成肉眼可见的浑浊液，再进一步通过噬菌斑检测确定最大稀释度浑浊液中含有大量的噬菌蛭弧菌本发明的方法与显微镜直接观察法、稀释倒自来水双层琼脂平板法相比更准确，克服了稀释倒自来水双层琼脂平板法因稀释造成检测不准确、以及显微镜直接观察法无法区分死菌体、活菌体的弊端。
一种噬菌蛭弧菌有效含量计数方法

[发明专利]一种菌群双层平板计数法-CN202010718342.2在审
发明人：张祁;黄小平;裴晓燕;韩晓旭;齐炳理 -专利权人：内蒙古伊利实业集团股份有限公司;内蒙古乳业技术研究院有限责任公司
申请日： 2020-07-23 - 公布日： 2022-01-25 - 主分类号： C12Q1/10 文献下载
摘要：本发明提供一种菌群双层平板计数法，其特征在于：依次包含如下步骤，步骤1：制备样品匀液和样品稀释液；步骤2：取1mL样品稀释液加入无菌培养皿中；步骤3：将灭菌后的非选择性培养基倒入培养皿中，铺成平板，放置，使样品中的菌群得到修复；步骤4：在修复后的平板上倒入选择性培养基，平铺，培养；步骤5：计数菌群。本发明中通过增加修复步骤，使得灵敏度显著高于国标法，大大提高检出率，且具备成本低、操作简便的优势，具有实用性。
一种双层平板计数

[发明专利]浸矿细菌－嗜铁钩端螺旋菌的选择性分离方法-CN200610032338.0无效
发明人：邱冠周;高健;康健;吴学玲;丁建南;夏乐先 -专利权人：中南大学
申请日： 2006-09-28 - 公布日： 2007-08-15 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：浸矿细菌－嗜铁钩端螺旋菌的选择性分离方法，将样品采用9K液体培养基培养，经过四代富集培养后，采用稀释分离法或平板纯化分离法对菌株进行纯化培养，最后获得目标菌株即纯培养物。与双层平板技术相比，上述稀释分离法和平板分离法均不涉及嗜酸异养细菌－Acidiphilium SJH的加入，使得分离过程相对简单得多；本发明培养介质中较高的Fe³⁺/Fe
细菌铁钩螺旋菌选择性分离方法

[发明专利]一种利用改进的叠皿平板法筛选分离硫酸盐还原菌的方法-CN201710452128.5有效
发明人：王继勇;陈加立;江英杰;肖挺 -专利权人：武汉理工大学
申请日： 2017-06-15 - 公布日： 2020-06-19 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用改进的叠皿平板法筛选分离硫酸盐还原菌的方法，该方法首先通过硫酸盐还原菌液体富集培养基对土壤中的微生物进行转接筛选，接着采用改进后的稀释涂布‑叠皿夹层法以及筛选培养基培养菌株，第三步利用普通叠皿双层平板法分离纯化上一步所得菌株该方法克服了现有技术存在的菌液不能均匀地涂布渗透在第一层平板上、菌液稀释后不利于其生长、菌落容易上下重叠甚至出现杂菌生长等不足，具有用材简便、筛选效率高、筛选周期短、所得菌种转化率高等优点。
一种利用改进平板筛选分离硫酸盐还原方法

[发明专利]一种梯度稀释液及其在双歧杆菌计数中的应用-CN202010553265.X有效
发明人：崔树茂;谭莎莎;毛丙永;唐鑫;陆文伟;翟齐啸;赵建新;张灏;陈卫 -专利权人：江南大学
申请日： 2020-06-17 - 公布日： 2022-02-15 - 主分类号： C12Q1/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种梯度稀释液及其在双歧杆菌计数中的应用，属于微生物技术领域。本发明提供了一种可显著提高双歧杆菌在被梯度稀释时的存活率的梯度稀释液，此梯度稀释液的成分包含L‑半胱氨酸盐酸盐、吐温80、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾和氯化钠；使用此梯度稀释液配合平板活菌计数法检测双歧杆菌菌粉中的双歧杆菌活菌数时，测得的活菌数高达2.0×1010CFU/g以上，而使用常规梯度稀释液(例如，生理盐水、缓冲液、无菌水和蛋白胨水等)配合平板活菌计数法检测双歧杆菌菌粉中的双歧杆菌活菌数时
一种梯度稀释液及其杆菌计数中的应用

[发明专利]一种快速定量ssDNA丝状噬菌体的方法及其应用-CN202210137549.X有效
发明人：王晓雪;郭云学;林兼仲;汤开浩;高欣宇;古嘉瑜 -专利权人：中国科学院南海海洋研究所
申请日： 2022-02-15 - 公布日： 2022-10-04 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明通过采用双层琼脂平板法和qPCR的方法结合，建立以Pf4和Pf6单链丝状噬菌体每个稀释梯度下的qPCR测定得到的Ct值(Y轴)与每个稀释梯度下Pf4和Pf6单链丝状噬菌体的数量(X轴)的标准曲线。通过双层琼脂平板法和qPCR测定的方法结合可以快速高效地对丝状噬菌体ssDNA的基因组进行定量，还可以对两个同时释放的ssDNA丝状噬菌体进行分别定量和比较。
一种快速定量 ssdna 丝状噬菌体方法及其应用

[发明专利]平板筛查肠道定植耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的评价方法-CN202211118780.0在审
发明人：康佳;贾伟;赵志军;康宇婷;杨宁爱 -专利权人：宁夏医科大学总医院
申请日： 2022-09-13 - 公布日： 2022-12-13 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明涉及细菌评价技术领域，具体的说是平板筛查肠道定植耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的评价方法，包括原材料准备，包括菌株、试剂以及仪器的准备，PCR法检测耐药基因，通过煮沸法提取DNA，采用PCR法检测CRE相关耐药基因，改良麦康凯平板、CHROMagarKPC显色培养平板的制备及结果判读，肉汤增菌法，微量肉汤稀释法，敏感性与特异性检测，菌株经血平板复苏后，分别接种于3种不同抗菌药物的改良麦康凯平板，置于35
平板肠道定植青霉烯类肠杆菌细菌评价方法

[发明专利]一种土壤拮抗菌的分离方法-CN201811114201.9在审
发明人：陈美霞;叶祖云;阮文元;吴成加;王泽榕 -专利权人：宁德师范学院
申请日： 2018-09-25 - 公布日： 2018-12-28 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种土壤拮抗菌的分离方法，涉及微生物技术领域，包括以下步骤：A：准备原料、B：制备土壤悬液、C：稀释、D：制备分离培养基、E：培养、F：挑选分离、G：制备指示菌平板以及H：筛选。本发明通过稀释分离法将拮抗菌从土壤中分离出来，通过向培养基中加入酚液来筛选出其中的放线菌，通过指示菌平板对峙法来筛选出其中抑菌效果最强的拮抗菌，在被开发为生防菌制剂用于对植物病害的生物防治上，具有良好的市场应用前景
拮抗菌制备土壤指示菌筛选微生物技术领域分离培养基稀释分离法生物防治分离效率市场应用土壤悬液植物病害培养基对峙法放线菌稀释防菌酚液抑菌成功率开发

[发明专利]一种蝗虫消化道菌群鉴定方法-CN202111459522.4在审
发明人：张大鹏;张天雨;肖凌云;张小茹;朱丹阳;高鸿鑫;孙倩;李艳;刘锦;张凯;迟宝杰;印展;刘玉升 -专利权人：山东农业工程学院;聊城三鼎蝗链生态农业发展有限公司
申请日： 2021-12-02 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种蝗虫消化道菌群鉴定方法，（1）、选取死亡的东亚飞蝗成虫放入酒精中浸泡；（2）、取出虫体并置于0.1%升汞液中消毒；（3）、移入灭菌水中清洗，进行无菌解剖；（4）、取出虫体消化道研磨；（5）、将研磨液用灭菌水稀释；（6）、用平板稀释法或涂抹法进行分离；（7）、分别置于智能光照培养箱和厌氧培养箱中培养；（8）、挑取表征各异的菌落在NA平板上划线、纯化、培养；（9）、将纯化后菌落再分别移植斜面培养，并依次编号；（10
一种蝗虫消化道鉴定方法

[发明专利]一种平板菌落计数方法-CN202210717342.X在审
发明人：靳婷;邵琦;胡欣;陈跃珍;张泽怡 -专利权人：厦门昶科生物工程有限公司
申请日： 2022-06-23 - 公布日： 2022-08-02 - 主分类号： C12Q1/06 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种平板菌落计数方法。本申请的平板菌落计数方法，将目标菌通过梯度稀释，然后从高到低选取适宜的目标菌稀释度在超净工作台内进行培养基平板上的无菌水推动平铺，即，采用移液器分别吸取一定量的无菌水和目标菌悬浮液依次滴入培养基平板中心处，然后利用重力及水的推动力使目标菌平铺，再将培养基平板放入恒温厌氧环境下进行培养，最终对目标菌进行计数。本发明可应用于多种需要平板菌落计数法进行计数的目标菌的检测，无需借助于涂布棒进行涂布，可以节约时间，减少因借助外物带来的污染，并且检测数据很稳定且与用涂布棒平铺目标菌的结果一致。
一种平板菌落计数方法

[发明专利]一种防治草坪草根腐病的菌种及发酵方法-CN201810882687.4在审
发明人：段碧华;韩宝平;赵耀荣;段立歆;郝祥祥;霍珊珊 -专利权人：北京农学院
申请日： 2018-08-06 - 公布日： 2018-12-07 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明属于细菌鉴定分析技术领域，公开了一种防治草坪草根腐病的菌种及发酵方法，采用稀释平板法对细菌进行分离纯化，并在NA试管斜面上培养18～24h后于4℃冰箱保存；采用菌饼法平板对峙法计算抑菌率，初步筛选对两种及两种以上根腐病菌抑制率在50％以上的拮抗菌株；采用液培法于NB培养基中接种菌株HCST9，同时将等量的NB培养基加入PS培养基的对照培养瓶中，烘干后称重计算菌株的抑菌率；采用液培法和平板对峙法分别计算和测量抑菌率。
草坪草根抑菌对峙法液培菌种发酵工业化发酵生产计算和测量稀释平板法生物防治冰箱保存草坪土壤初步筛选分离纯化根腐病菌接种菌株细菌鉴定细菌菌株摇瓶发酵拮抗菌株拮抗细菌拮抗作用培养基培养瓶抑制率试管防治烘干称重等量菌饼菌株细菌优化分析

[实用新型]一种用于琼脂稀释法药物敏感性实验的菌液加样装置-CN201620051056.4有效
发明人：马立才;房文红;王元;赵姝 -专利权人：中国水产科学研究院东海水产研究所
申请日： 2016-01-19 - 公布日： 2016-08-17 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种用于琼脂稀释法药物敏感性实验的菌液加样装置，其特征在于，包括加样器和细胞培养板，细胞培养板上设置若干培养孔；所述的加样器包括固定板和与固定板连接的若干螺钉；所述螺钉的位置与培养孔的位置一一对应本实用新型的有益效果是：设计合理、制造方便且成本低，易于在琼脂稀释法细菌药物敏感性实验中推广应用；可在琼脂稀释法细菌药敏实验中便捷地添加菌液样品，并能有效地避免细菌之间的污染；可根据受试菌株的数目选择适宜规格的本装置，能灵活地一次性添加数十个细菌样品到药物平板上，减少了工作量从而能更好地节省劳力和时间；可通过高压蒸汽灭菌或用乙醇等灼烧的方式进行灭菌，便于反复使用。
一种用于琼脂稀释药物敏感性实验菌液加样装置

[发明专利]一种肠道细菌培养方法及其培养基-CN200810163053.X无效
发明人：李兰娟;吴仲文;陈云波;陈春雷;左健;肖党生;王建国;陈瑜;徐凯进 -专利权人：浙江大学
申请日： 2008-12-15 - 公布日： 2009-05-27 - 主分类号： C12Q1/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种肠道细菌培养方法，取新鲜粪便放入加有玻璃珠的稀释液A的试管中，在混匀器上混匀3分钟以上，按连续稀释法，释成10^-1～10^-8个稀释度，将培养基平皿根据不同的涂布浓度分区，取各相同量的以上稀释后的混合液分别加到分区中，涂布均匀，平板于恒温箱37℃孵育培养。
一种肠道细菌培养方法及其培养基

[发明专利]一种秀珍菇同核体菌丝鉴定的InDel标记方法-CN202011620317.7在审
发明人：王伟科;沈颖越;闫静;陆娜;宋吉玲;袁卫东;周祖法 -专利权人：杭州市农业科学研究院
申请日： 2020-12-31 - 公布日： 2021-04-13 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：包括以下步骤：(1)对秀珍菇进行栽培出菇，待秀珍菇L、T和N菌株的子实体进入成熟期后，将子实体置于包含灭菌滤纸条的孢子收集器中；(2)将收集的孢子置于无菌水中，使用血球计数板对孢子悬浮液进行孢子计数，通过梯度稀释法对孢子悬浮液进行稀释，而后涂布9cm薄PDA平板，置于25℃培养箱中培养；(3)孢子刚萌发时，通过20倍显微镜挑取单个菌落于新的PDA平板上培养，获得秀珍菇单孢分离菌株；(4)对单孢分离菌株培养，采用CTAB法提取单孢分离株的基因组
一种秀珍菇菌丝鉴定 indel 标记方法

[发明专利]一种从土壤中特异性分离酸杆菌的方法-CN201710362569.6在审
发明人：李慧;姚飞;杨山;王志瑞;姜勇 -专利权人：中国科学院沈阳应用生态研究所
申请日： 2017-05-22 - 公布日： 2017-08-18 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明将现代分子生物学技术与传统的微生物学培养技术相结合，基于门水平上的特异性引物‑PCR结合改良后的基本培养基平板特异性分离得到传统意义上难培养的酸杆菌的方法。方法为，将样品悬浊液稀释涂布到改良后的基本培养基平板，选择白色单菌落继续采用连续划线平板法纯化，将纯化后的单菌落经液体培养基扩大培养，提取基因组DNA，应用酸杆菌门特异性引物PCR扩增16S rDNA片段采用本发明中的门特异性引物扩增结合酸性筛选平板法可以有效地从样品中分离得到可培养地酸杆菌。
一种土壤特异性分离杆菌方法

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