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[发明专利]一种缩短DNA模板的DNA测序方法及其应用-CN201110341269.2有效
发明人：肖鹏峰;浦丹;谢宏梅;王文捷;陆祖宏 -专利权人：东南大学
申请日： 2011-11-02 - 公布日： 2012-02-08 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：一种缩短DNA模板的DNA测序方法及其应用，（1）采用合成或者连接测序方法将固定DNA模板中的一小段序列测定；（2）停止该测序引物的测序，并加入四种dNTPs单体延伸测序引物链，使DNA模板成为双链；（3）缩短DNA模板：用限制性内切酶处理预先设定包含酶识别序列的连接子，将已经测定的DNA模板中的一小段序列断裂；（4）将测序引物、且包含酶识别序列的双链寡核苷酸片段，连接到上述切割后的缩短DNA模板上；（5）变性，除去未固定的DNA链，重新获得DNA模板；（6）杂交测序引物，继续对固定DNA模板中的一小段序列进行测定；（7）重复步骤（2）到（6），直到未测定DNA模板序列测定完成。
一种缩短 dna 模板方法及其应用

[发明专利]高通量测序模板的原位复制及其增加阅读长度的测序方法-CN201110030788.7无效
发明人：肖鹏峰;陈婧;葛芹玉;陆祖宏 -专利权人：东南大学
申请日： 2011-01-28 - 公布日： 2011-08-03 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：高通量测序模板的原位复制及其增加阅读长度的测序方法，已经制备好的DNA测序模板，在测序得到一段序列片段后，将其变性为DNA单链－旧模板，再通过活化先前引入的延伸引物将其复制，并将旧模板全部切除后，得到与原来DNA测序模板完全互补的DNA单链－新模板，将这些DNA单链作为DNA测序模板进行序列测定，便得到与旧模板另一端、且互补的新测定序列，将新、旧模板测定的序列片段拼接，增加了测序模板的阅读长度，降低了短片段序列拼接的困难，提高序列的准确性。
通量模板原位复制及其增加阅读长度方法

[发明专利]一种DNA和RNA杂化纳米花的制备方法及其应用-CN202211583653.8在审
发明人：刘军杰;于文艳;刘兵兵;周蕾;巩恩鹏;车成圆;杨轶;吴鑫赟 -专利权人：郑州大学
申请日： 2022-12-10 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： A61K31/7105 文献下载
摘要：本发明涉及DNA和RNA杂化纳米花的制备方法及其应用，有效解决粒径合适，生物安全性高，载药量高，且能够靶向脑出血部位，捕获血红蛋白，调控脑部炎性微环境的纳米药物的问题，将包含有血红蛋白适配体序列的磷酸化DNA模板、引物和含有DNA连接酶的缓冲液混合环化反应，得含有血红蛋白适配体序列的环状DNA模板；将包含有miR‑124序列的磷酸化DNA模板、引物混合于含有DNA连接酶的缓冲液中环化反应，得含miR‑124序列的环状DNA模板；将含有血红蛋白适配体序列的环状DNA模板与dNTP、DNA聚合酶在RNA聚合酶缓冲液中进行滚环复制，加入含miR‑124序列的环状DNA模板，使滚环复制和滚环转录同时进行，终止反应后
一种 dna rna 纳米制备方法及其应用

[发明专利]一种酪氨酸磷酸酶生物传感器及其检测方法与应用-CN202010812925.1有效
发明人：张春阳;李玥颖;孙淑丽;王黎娟;田小锐 -专利权人：山东师范大学
申请日： 2020-08-13 - 公布日： 2023-05-09 - 主分类号： C12Q1/42 文献下载
摘要：本发明公开了一种酪氨酸磷酸酶生物传感器及其检测方法与应用，包括磁珠、肽‑DNA偶联物、DNA模板、信号探针；肽‑DNA偶联物中，肽链一端连接第一DNA序列的5'端，肽链含有磷酸化的酪氨酸；肽链另一端用于连接磁珠；所述DNA模板从5'端至3'端由两个第二DNA序列和一个第三DNA序列组成，第三DNA序列与第一DNA序列能够互补，DNA模板与第一DNA序列杂交再聚合后能够形成具有两个切口酶识别位点的双链DNA，第二DNA序列的互补链为脱氧核酶；信号探针为核苷酸序列，核苷酸序列的两端分别连接荧光团和猝灭剂，核苷酸序列能够与脱氧核酶互补；脱氧核酶为在二价阳离子依赖性反应中裂解互补的RNA序列。
一种酪氨酸磷酸酶生物传感器及其检测方法应用

[发明专利]一种基于双链DNA包被的Ag纳米簇及其制备方法与应用-CN201910337318.1在审
发明人：凌剑;文秋林;刘安勇;彭君;胡怡琳 -专利权人：云南大学
申请日： 2019-04-25 - 公布日： 2019-09-24 - 主分类号： C09K11/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于双链DNA包被的Ag纳米簇及其制备方法与应用，属于Ag纳米簇技术领域。本发明基于双链DNA包被的Ag纳米簇，其DNA为双链结构，一条链为模板链DNA，另一条链为富含G碱基DNA；其中模板链DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，富含G碱基DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；或者模板链DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，富含G碱基DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明模板链DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，富含G碱基DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的双链DNA/Ag纳米簇证实待检测体系中不存在半胱氨酸和多巴胺的情况下，可使用模板链DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，富含G碱基DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的双链DNA/Ag纳米簇来检测体系中是否含有抗坏血酸，并进行定量分析。
核苷酸序列纳米簇模板链富含碱基双链DNA 包被双链条链制备半胱氨酸定量分析抗坏血酸双链结构多巴胺检测应用

[发明专利]促翻译反应DNA片断和使用该片断的无细胞系蛋白质合成法-CN200510131047.2无效
发明人：铃木崇;伊东昌章;江连彻;四方正光;小林慎一郎 -专利权人：株式会社岛津制作所
申请日： 2005-12-07 - 公布日： 2006-07-05 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明提供能够简单地克隆需要的基因并可以进一步提高翻译效率的DNA片断、具有该DNA片断的蛋白质表达载体以及模板DNA、从该模板DNA得到的mRNA、含有该模板DNA或mRNA的无细胞系蛋白质合成反应液、使用该模板DNA的无细胞系蛋白质合成方法以及含有该表达载体的无细胞系蛋白质合成试剂盒。是用于促进翻译反应的具有序列表序列号1～11中任意所示的碱基序列的DNA片断、具有该DNA片断的蛋白质表达载体以及模板DNA、从该模板DNA得到的mRNA、含有该模板DNA或mRNA的无细胞系蛋白质合成反应液、使用该模板DNA的无细胞系蛋白质合成方法以及含有该表达载体的无细胞系蛋白质合成试剂盒。
翻译反应 dna 片断使用细胞系蛋白质成法

[发明专利]用于信使RNA体外转录的改进方法-CN202180027901.8在审
发明人： K·A·特兰;D·库珀;顾晓波;J·S·杜宾斯;A·迪亚斯;F·德罗莎 -专利权人：翻译生物公司
申请日： 2021-02-18 - 公布日： 2022-11-25 - 主分类号： G16B20/30 文献下载
摘要：本发明提供了用于制备优化的DNA序列作为模板用于mRNA体外转录的方法。优化这些DNA序列以避免RNA聚合酶过早终止转录。本发明还提供了制备优化的DNA序列的方法，所述优化的DNA序列在其3’末端包含一个或多个终止信号，以减少或防止非模板化的失控转录。
用于信使 rna 体外转录改进方法

[发明专利]DYS389基因座的等位基因分型标准物的模板-CN201610752720.2有效
发明人：王乐;赵兴春;季安全;叶健;武波 -专利权人：公安部物证鉴定中心
申请日： 2016-08-29 - 公布日： 2019-06-11 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明公开了一种DYS389基因座的等位基因分型标准物的模板。本发明所提供的DYS389基因座的等位基因分型标准物的模板为一种DNA组合物，该DNA组合物含有DNA片段1－DNA片段17，核苷酸序列依次如序列表中的序列1、序列2、序列3、序列4、序列5、序列6、序列7、序列8、序列9、序列10、序列11、序列12、序列13、序列14、序列15、序列16和序列17所示。实验证明，本发明提供的模板可扩增获得DYS389基因座的等位基因分型标准物，并可在多种商业试剂盒中使用，具有重要的应用价值。
dys389 基因等位基因标准模板

[发明专利]非同步链延伸聚合酶链反应-CN99114949.1无效
发明人：夏庆杰 -专利权人：夏庆杰
申请日： 1999-06-22 - 公布日： 2001-01-03 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明是一种两条链非同步延伸的DNA体外扩增技术。首先根据待扩增的靶DNA序列合成一对特异性引物,再合成一条3’－末端经过修饰的失去延伸能力的一条靶DNA链的重复序列互补的寡重复序列。将该寡重复序列、链引物、耐热DNA聚合酶、dNTP底物、模板DNA、镁离子、PCR缓冲液、超纯水等混匀成反应体系,在热循环仪上进行高温、低温、中低温、中温和反复热循环,从而获得上百万拷贝的特异的靶DNA本发明中的寡重复序列在热循环过程中的低温和中低温阶段时,与相应的互补模板链的重复序列退火,从而抑制模板之间的重复序列相互退火,使另一条模板链首先指导合成完整的互补新链;在热循环过程中的中温阶段时,则从模板链上脱离下来经过多次的热循环,产生大量的靶DNA片段。
同步延伸聚合反应

[发明专利]一种幽门螺旋杆菌核酸传感器与检测方法及应用-CN202010597081.3有效
发明人：胡善文;张晓荣;郭睿;吴衍;王文祥 -专利权人：福建医科大学
申请日： 2020-06-28 - 公布日： 2022-05-17 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明公开了一种幽门螺旋杆菌核酸传感器与检测方法及应用，传感器包括玻碳电极、引物序列、模板序列、DNA连接酶、DNA聚合酶、水溶性银盐、还原剂；玻碳电极表面连接引物序列和CdS量子点；所述模板序列能够形成哑铃状结构，哑铃状结构能够被DNA连接酶连接闭合；模板序列、引物序列和幽门螺旋杆菌核酸序列能够形成三聚体结构，三聚体结构在DNA聚合酶作用下能够使引物序列进行滚环扩增，扩增后的DNA长链具有富含胞嘧啶碱基的重复序列
一种幽门螺旋杆菌核酸传感器检测方法应用

[发明专利]基于常规引物的针对串联重复序列的恒温扩增体系、扩增方法及常规引物对-CN202010152624.0有效
发明人：范小勇;吴康;罗道良 -专利权人：上海市公共卫生临床中心
申请日： 2020-03-06 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于常规引物的针对串联重复序列的恒温扩增体系，所述恒温扩增体系包括具有串联重复序列的DNA模板、DNA聚合酶和常规引物对，所述DNA聚合酶为具有链置换活性的DNA聚合酶，所述常规引物对是指在恒温扩增时，常规引物对结合到模板DNA后无需折叠成特定的二级结构。该恒温扩增方法，结合具有链置换活性的DNA聚合酶和常规引物(即引物结合到模板DNA后无需折叠成特定的二级结构)即可实现指数级恒温扩增重复DNA序列。
基于常规引物针对串联重复序列恒温扩增体系方法

[发明专利]DNA-RNA杂合双链特异性缀合物在促进核酸复制及在新型冠状病毒检测中应用-CN202110500362.7有效
发明人：陈华;谭淼 -专利权人：苏州海苗生物科技有限公司
申请日： 2021-05-08 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明公开了DNA‑RNA杂合双链特异性缀合物在促进核酸复制中的应用，所述DNA‑RNA杂合双链特异性缀合物为特异识别DNA‑RNA杂合双链的抗体或结合因子。本发明使用DNA引物，以RNA为模板，或者使用RNA引物，以DNA为模板，利用DNA‑RNA杂合双链特异性缀合物提高不依赖于核酸序列的DNA引物与RNA模板或者RNA引物与DNA模板的亲和性，从而使引物设计不受序列限制，同时促进引物‑模板结构稳定性，提高转录复制效率，并提高复制后下游核酸扩增效率。
dna rna 杂合双链特异性缀合物促进核酸复制新型冠状病毒检测应用

[发明专利]以多重DNA片段为模板制备RNA或DNA探针的方法-CN201610083212.X在审
发明人：徐学明;鲁隼;冯俊清 -专利权人：广州复能基因有限公司
申请日： 2016-02-05 - 公布日： 2016-04-20 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明涉及一种以多重DNA片段为模板制备RNA或DNA探针的方法。该方法包括以下步骤：从体外转录的基因特异性cDNA或是基因组中特定基因DNA序列中筛选出多个靶序列，对于每个靶序列设计至少一对引物，所述引物的PCR扩增产物为多重DNA片段，所述多重DNA片段能包括所有靶序列；以所述多重DNA片段为模板，进行以下反应：加入RNA聚合酶和带有生物素标记的UTP进行反应，将UTP掺入产物，纯化后得到RNA探针；或者加入DNA聚合酶和带有生物素或萤光标记的dUTP进行反应，将dUTP掺入产物，纯化后得到DNA探针。本发明首次用多重DNA片段作为模板，针对待检测目标序列设计多对引物，并在反向引物5’端加上启动子或RNA聚合酶结合序列，以使最终得到的RNA探针能够全部覆盖靶序列。
多重 dna 片段模板制备 rna 探针方法

[发明专利]mRNA及其制备方法和应用-CN201910014953.6有效
发明人：王刚;杨雨亭 -专利权人：深圳市臻质医疗科技有限公司
申请日： 2019-01-08 - 公布日： 2021-09-28 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：该mRNA的制备方法包括以下步骤：提供DNA转录模板；所述DNA转录模板由正义链和反义链组成，其中，正义链包含启动子以及连接在所述启动子序列上的目标DNA序列，启动子序列不含有终止密码子，目标DNA序列与目标mRNA序列相同，所述目标DNA序列末端连接有聚多腺苷酸序列；在RNA聚合酶的作用下，对所述DNA转录模板进行体外转录，在所述启动子序列的引导下，转录出mRNA。本发明的制备方法解决了现有mRNA合成进行Poly A加尾反应时副产物序列增多而导致分子均一性差的问题，且该制备方法还具有制备效率高、产物便于纯化等优势。
mrna 及其制备方法应用

[发明专利]一种分子标签的制备方法-CN201610496676.3有效
发明人：王海龙;胡妮;徐健;唐元华 -专利权人：首度生物科技（苏州）有限公司;苏州首度基因科技有限责任公司;合肥首度基因科技有限公司
申请日： 2016-06-30 - 公布日： 2019-09-24 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明涉及一种分子标签的制备方法，包括以下步骤：在DNA分子模板的5′接头端引入barcode序列；用DNA聚合酶延伸3′接头端，与barcode序列互补，得到补齐序列；向补齐序列中加入DNA聚合酶，在补齐序列的3′接头端引入胸腺嘧啶，得到改造的接头；将待测DNA破碎成DNA短片段，用DNA连接酶连接DNA短片段与改造的接头，得到DNA连接产物；聚合酶链式反应扩增DNA连接产物，得到扩增产物；对扩增产物进行测序，然后比对到人类参考基因组，在多个DNA模板副本中选取碱基错误率最低的DNA序列，即为分子标签。该分子标签技术通过改变barcode长度，去除固定序列，减少测序中数据的浪费，提高了反应速率，能有效区分DNA扩增过程中的错误和真实的DNA变异。
一种分子标签制备方法

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