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[发明专利]一种表达木糖还原酶基因的质粒的构建方法-CN200810064829.2有效
发明人：平文祥;葛菁萍;凌宏志;杜春梅;宋刚;赵丹;高冬妮;于新 -专利权人：黑龙江大学
申请日： 2008-06-30 - 公布日： 2008-11-12 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：一种表达木糖还原酶基因的质粒的构建方法，它涉及一种质粒载体的构建方法。它解决了酿酒酵母中缺少木糖还原酶，不具备木糖代谢能力，不能有效发酵植物纤维水解液的问题。构建方法：先克隆XYL1基因、ADHt基因序列和KanR基因；再回收、纯化步骤一至三制备的基因片段，分别与载体连接；然后构建质粒pADH、质粒pAK；再将XYL1基因引入质粒pAK，即得到表达木糖还原酶基因的质粒本发明方法将木糖还原酶基因XYL1和乙醇脱氢酶的强启动子的终止子序列构建于同一个质粒载体上，在增添了木糖代谢为乙醇的途径外，还抑制了木糖代谢为木糖醇，能够介导酿酒酵母高效代谢木糖生产乙醇。
一种表达还原酶基因质粒构建方法

[发明专利]一种木糖还原酶基因及其编码的氨基酸序列-CN200710144440.4无效
发明人：冯玉杰;曲有鹏;李冬梅 -专利权人：哈尔滨工业大学
申请日： 2007-10-15 - 公布日： 2008-05-07 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：一种木糖还原酶基因及其编码的氨基酸序列，它涉及一种还原酶基因及其编码的氨基酸序列。本发明木糖还原酶基因序全长1061bp，其中A、G、C、T分别为335bp、219bp、180bp、327bp，有954bp完整的开放阅读框。本发明木糖还原酶基因编码的氨基酸序列有317个氨基酸，氨基酸序列的分子量为35.95KD，等电点PI为5.93。本发明木糖还原酶基所产生的木糖还原酶可同时利用NADPH和NADH，具有双辅酶依赖性。
一种还原酶基因及其编码氨基酸序列

[发明专利]一种木糖醇的制备方法-CN201810250920.7在审
发明人：应汉杰;常子月;柳东;李楠;王振宇;杨正娇;吴昕洋 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2018-03-26 - 公布日： 2018-06-22 - 主分类号： C12P7/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种木糖醇的制备方法，木糖、葡萄糖、木糖还原酶、葡萄糖脱氢酶、辅酶、CaCO3和水形成生物催化体系，催化木糖发生还原反应生成木糖醇，催化木糖发生还原反应生成木糖醇。具体地，以木糖还原酶和NADPH作为催化体系催化木糖发生还原反应生成木糖醇；以葡萄糖脱氢酶作为NADPH的再生催化剂，催化葡萄糖发生氧化反应生成葡萄糖酸，并催化NADP+发生还原反应生成NADPH。采用双酶催化生产木糖醇，反应24h后木糖和葡萄糖完全消耗，产物中木糖醇的转化率为98％，浓度可达146.23g/L；葡萄糖酸的转化率为95％，浓度可达185.05g/L。
木糖醇木糖还原反应催化葡萄糖脱氢酶葡萄糖木糖还原酶葡萄糖酸制备催化葡萄糖生产木糖醇再生催化剂催化体系生物催化氧化反应酶催化辅酶消耗

[发明专利]一种木糖还原酶突变体、基因工程菌及在生产木糖醇中的应用-CN201610091739.7有效
发明人：吴绵斌;苏卜利;张哲;林建平;杨立荣 -专利权人：浙江大学
申请日： 2016-02-18 - 公布日： 2019-04-09 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种木糖还原酶突变体、基因工程菌及在生产木糖醇中的应用。所述木糖还原酶突变体，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明对木糖还原酶进行了8个氨基酸位点的突变，降低了其催化阿拉伯糖为阿拉伯糖醇的活性，提高了其转化木糖醇的选择性，生物转化产物中副产物阿拉伯糖醇已经检测不到，本发明可使生物转化生产木糖醇下游的分离步骤简化，降低生产成本，提高木糖醇产品的纯度。
一种还原酶突变体基因工程生产木糖醇中的应用

[发明专利]高效利用木糖和葡萄糖的酿酒酵母重组菌的构建及应用-CN201910530202.X在审
发明人：施欣驰;王兆慧;金大勇;段旭初;路志群;冯怡;江钰娜 -专利权人：南通大学
申请日： 2019-06-19 - 公布日： 2019-09-13 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了高效利用木糖和葡萄糖的酿酒酵母重组菌的构建及应用，在酿酒酵母木糖代谢菌株中分别过表达内源噻唑合酶THI4或木酮糖还原酶XYL2。该高效利用木糖和葡萄糖的酿酒酵母重组菌的构建及应用，在过表达来源于热带假丝酵母的木糖还原酶XR(由XYL1编码)和木糖醇脱氢酶XDH(由XYL2编码)的过表达质粒pYX212‑XR‑XDH的基础上，进一步过表达酿酒酵母BY4741内源噻唑合酶THI4或木酮糖还原酶XYL2，转化单倍体酿酒酵母BY4741及二倍体酿酒酵母Kyokai No.6。该方法应用常用组成型高拷贝质粒pYX212，能够实现在混糖发酵过程中提高木糖、葡萄糖共利用过程中碳源的消耗速率和乙醇产量。
酿酒酵母葡萄糖木糖高效利用重组菌构建还原酶木酮糖合酶内源木糖醇脱氢酶热带假丝酵母应用高拷贝质粒木糖还原酶表达质粒发酵过程木糖代谢单倍体二倍体速率和组成型乙醇菌株消耗转化

[发明专利]使得工程化的发酵单胞菌在木糖培养基上立即生长的基因失活-CN201280063242.4在审
发明人： W.D.希茨;M.祁;L.陶;P.V.维坦恩;J.杨 -专利权人：纳幕尔杜邦公司
申请日： 2012-12-19 - 公布日： 2014-12-17 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：经过基因工程改造以具有破坏的醛糖还原酶基因，使在NADPH存在下将木糖转化为木糖醇的醛糖还原酶活性降低了超过90％的、以及经过工程化改造以表达木糖利用代谢途径的发酵单胞菌(Zymomonas)细胞，被发现具有在包含作为唯一糖类的木糖的培养基上生长而不需在包含木糖的培养基上适应的能力
使得工程发酵单胞菌培养基立即生长基因

[发明专利]微生物制备木糖醇的方法-CN200810132155.5无效
发明人：郑春辉 -专利权人：郑春辉
申请日： 2008-07-21 - 公布日： 2010-05-12 - 主分类号： C12P19/02 文献下载
摘要：微生物制备木糖醇的方法属于生物技术领域，涉及一种微生物制备木糖醇(xylite)的方法。本发明提供一种生产率较高的微生物制备木糖醇的方法。本发明包括如下工序：1)修饰微生物从而减少或消除除木糖还原酶以外的酶对NADH的氧化；2)在含有木糖和5～50g/L亚硫酸盐(例如亚硫酸氢钙，亚硫酸钠，亚硫酸钾)的底物中培养微生物；3)在需氧生长期和限氧木糖醇生成期培养微生物；4)自底物中富集和提取木糖醇。本发明与其他生物技术相比，关键在于还原酶可以循环使用，而不用加过量还原酶，因而木糖醇的转化率更高。
微生物制备木糖醇方法

[发明专利]一种重组酿酒酵母工程菌株及其应用-CN201010148471.9有效
发明人：叶凯;刘敏;涂振东 -专利权人：新疆农业科学院生物质能源研究所
申请日： 2010-04-14 - 公布日： 2011-10-19 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组酿酒酵母工程菌株，从毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中克隆GAP基因片段，更换PYES2载体的诱导性启动子为组成型GAP启动子，然后将木糖还原酶基因xyl1片段和木糖醇脱氢酶基因本发明的工程菌能共表达木糖还原酶和木糖醇脱氢酶，活性高，木糖还原酶和木糖醇脱氢酶的表达量高。能高效利用秸秆中纤维素和半纤维素降解的五碳糖和六碳糖，从而提高燃料乙醇的产量，降低生产成本，减少环境污染。
一种重组酿酒酵母工程菌株及其应用

[发明专利]一种木糖醇基因工程生产菌及其构建方法和应用-CN201810594607.5有效
发明人：吴绵斌;王吉平;袁新松;林建平;杨立荣 -专利权人：浙江大学
申请日： 2018-06-11 - 公布日： 2020-09-18 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种木糖醇基因工程生产菌及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。所述的木糖醇基因工程生产菌，由大肠杆菌W3110经基因组改造得到，原始大肠杆菌W3110基因组中的ptsG、xylAB和ptsF均替换成木糖还原酶基因XR；还包括基因组中pfkA、pfkB、pgi、sthA本发明以大肠杆菌W3110为出发菌株，将基因组中的相应基因均替换成XR，木糖还原酶得以高效表达，同时通过阻断木糖的代谢和木糖醇的磷酸化，提高对木糖的利用，并且通过阻断或减少EMP途径葡萄糖代谢通量强化NADPH再生，为木糖还原酶还原木糖生成木糖醇提供必需的辅酶NADPH，极大提高基因工程菌转化木糖生产木糖醇的效率。
一种木糖醇基因工程生产及其构建方法应用

[发明专利]利用木糖生产原人参二醇的重组解脂耶氏酵母菌株及构建方法和应用-CN202010422065.0在审
发明人：卢文玉;张传波;武玉芬;鞠海燕 -专利权人：天津大学
申请日： 2020-05-18 - 公布日： 2020-09-22 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明利用木糖生产原人参二醇的重组解脂耶氏酵母菌株及构建方法和应用；以解脂耶氏酵母ATCC 201249为出发菌株，导入了优化的木糖还原酶XYL1、木糖醇脱氢酶XYL2以及过表达的内源的木酮糖激酶XKS表达盒，得重组菌株1；向重组菌1导入达玛烯二醇合酶基因DS，原人参二醇合酶基因PPDS及细胞色素P450还原酶基因ATR1，得重组菌株2；向重组菌株2导入截断的甲羟戊酸途径中编码烟酰胺腺嘌呤二核苷酸‑羟甲基戊二酰辅酶A还原酶的基因tHMG1、鲨烯合酶的基因erg9和编码法尼烯焦磷酸合酶的erg20，得到重组菌株3。利用重组解脂耶氏酵母菌用木糖生产原人参二醇，摇瓶产量达到80.88mg/L。
利用生产人参重组解脂耶氏酵母菌株构建方法应用

[发明专利]木糖异构酶和木糖醇脱氢酶组合用于木糖发酵为乙醇，以及脆弱拟杆菌木糖脱氢酶-CN201180059296.9有效
发明人：肖恩·乔丹;贝丝·范特兰德-布鲁姆;李灵耀 -专利权人：阿彻丹尼尔斯米德兰德公司
申请日： 2011-12-09 - 公布日： 2017-11-24 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：在此披露的是一种对于以下而言的新发现的问题和解决方案，利用木糖异构酶转化木糖为木酮糖用于经由木酮糖激酶进入戊糖磷酸途径，来将酿酒酵母进行工程化来发酵木糖制造乙醇。当生长在包含有木糖的一种培养基上时，木糖醇趋向于在细胞中积累，尽管在酿酒酵母中缺失木糖还原酶活性。木糖醇抑制木糖异构酶活性。一种描述的解决方案是同时表达一种外源木糖醇脱氢酶连同该外源木糖异构酶同时还任选地在缺失一种木糖还原酶表达情况下过表达木糖激酶。另一种解决方案是来自脆弱拟杆菌的一种木糖异构酶，与其他木糖异构酶（例如大肠杆菌木糖异构酶）相比更不受木糖醇抑制。该脆弱拟杆菌木糖异构酶的表达可以单独使用，或与木糖醇脱氢酶的表达以及任选地与木酮糖激酶的过表达组合使用以改进来自木糖的乙醇生产。
木糖异构酶木糖醇脱氢酶组合用于发酵乙醇以及脆弱杆菌

[发明专利]一种利用pH自平衡催化体系制备木糖醇的方法-CN201911071026.4有效
发明人：应汉杰;柳东;张迪;王振宇;雷鸣;陈勇;牛欢青 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2019-11-05 - 公布日： 2021-08-06 - 主分类号： C12P7/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用pH自平衡催化体系制备木糖醇的方法，其特征在于，木糖、葡萄糖、甲酸类化合物、木糖还原酶、葡萄糖脱氢酶、甲酸脱氢酶、电子载体和水形成生物催化体系，催化木糖反应生成木糖醇。实现反应体系中酸性和碱性产物的相互中和，能够稳定反应过程的pH中和，省去了生产过程pH的调控，因此反应过程更简单、稳定、高效，可以在纯水中进行，从而提高了生产效率、降低了生产成本和操作难度；同时，采用由甲酸脱氢酶、葡萄糖脱氢酶和木糖还原酶构成的酶偶合反应系统催化生产木糖醇，24小时内从2M木糖中获得了278.4g/L的木糖醇产量，产率高达11.6g/L/h。
一种利用 ph 平衡催化体系制备木糖醇方法

[发明专利]一种利用全细胞催化制备木糖醇的方法-CN201810972257.1有效
发明人：应汉杰;柳东;常子月 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2018-08-24 - 公布日： 2021-08-03 - 主分类号： C12P19/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用全细胞催化制备木糖醇的方法，包括以下步骤：(1)含木糖还原酶基因XR和葡萄糖脱氢酶基因GDH的重组大肠杆菌在LB培养基中培养至OD为0.6‑0.8时，添加IPTG诱导木糖还原酶和葡萄糖脱氢酶的表达，离心得到全细胞；(2)含木糖和葡萄糖的水溶液、步骤(1)得到的全细胞和CaCO3形成生物催化体系，催化木糖发生还原反应生成木糖醇。本方法省去了细胞中酶的提取和外源辅因子的添加，能够大大简化生物催化法生产木糖醇的工艺和成本。
一种利用细胞催化制备木糖醇方法

[发明专利]一种可代谢木糖的酿酒酵母工程菌-CN201010596022.0无效
发明人：高岚;张晓阳;夏黎明;杜风光 -专利权人：浙江大学;上海天之冠可再生能源有限公司
申请日： 2010-12-20 - 公布日： 2011-07-20 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种可代谢木糖的酿酒酵母工程菌，包括宿主细胞和重组载体，其特征在于：所述重组载体中包含由第一启动子、木糖还原酶基因、第二启动子、木糖醇脱氢酶基因以及抗性标记基因依次连接组成的基因表达盒。本发明酿酒酵母工程菌可以同时表达木糖还原酶和木糖醇脱氢酶，能够以木糖为唯一碳源生长，为后续构建木糖和葡萄糖共发酵产乙醇的工程菌株奠定了基础，并可以该工程菌株为基础进一步筛选和改造，使其以木质纤维素为原料生产乙醇
一种代谢酿酒酵母工程

[发明专利]一种生产木糖醇的方法及其专用菌株-CN200510008756.1无效
发明人：江宁;贺鹏;卢大军;沈安;王淑豪 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2005-02-25 - 公布日： 2006-08-30 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产木糖醇的方法及其专用菌株。本发明所提供的用于生产木糖醇的菌株是含有木糖还原酶基因的酿酒酵母，特别是酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)XG521 CGMCC No.1307。本发明所提供的生产木糖醇的方法，是发酵含有木糖还原酶基因的酿酒酵母，特别是酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)XG521 CGMCC No.1307得到木糖醇。本发明的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)XG521CGMCC No.1307不仅能用木糖为原料生产木糖醇，还能利用木糖生产过程中的木糖母液作为主要原料发酵生产木糖醇。转化率可达0.9克(木糖醇)/克(木糖)，产率可达1克(木糖醇)/升·小时。
一种生产木糖醇方法及其专用菌株

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