本发明涉及编码人胆色素原脱氨酶的核苷酸序列,所述序列经优化用于在哺乳动物细胞中更高地表达。本发明还涉及包含此类优化的合成编码序列的DNA构建体,其用于胆色素原脱氨酶缺乏所引起的诸如急性间歇性卟啉病的疾病状况的基因治疗。因此,本发明涉及包含编码人胆色素原脱氨酶的核苷酸序列的核酸或核酸构建体,其中至少320个编码人胆色素原脱氨酶的密码子与SEQ ID NO:1中的密码子相同,或其中至少305个编码人胆色素原脱氨酶的密码子与SEQ ID NO:3中的密码子相同。
本发明涉及基因工程技术领域,特别是涉及一种密码子优化的基因、重组表达载体、重组蛋白及多克隆抗体的制备方法和应用。本发明提供了一种密码子优化的PE_PGRS45基因,所述PE_PGRS45基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。利用本发明所述PE_PGRS45基因能够用于制备效价高的多克隆抗体。本发明具体实施例中试验结果表明,该基因的密码子适应指数(CAI)从0.73增加到0.90。
本发明公开了一种密码子优化后的磷脂酶A2及其重组细胞、重组细胞的构建与应用。一种密码子优化后的磷脂酶A2其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述核苷酸序列SEQ ID NO.2通过对磷脂酶A2的原始基因序列如SEQ ID NO.1进行密码子优化而得到的。将SEQ ID NO.2所示的密码子优化后的基因序列在大肠杆菌中表达时会形成大量包涵体,无法得到可溶性蛋白,不能用于进一步的催化制备甘油磷脂酰胆碱。
本发明公开了密码子优化的Cas12i3蛋白编码基因及其应用。具体地公开了DNA分子,所述DNA分子的核苷酸序列为SEQ ID No.3。本发明为了更好的将Cas12i3蛋白应用于哺乳动物基因编辑,设计了不同密码子优化方案,通过软件评估和实验验证,比较筛选出Cas12i3表达量和编辑效果好的密码子优化方案。本发明筛选到在哺乳动物中高效表达Cas12i3蛋白的密码子优化方案,可以极大地提高Cas12i3蛋白的编辑效率,为Cas12i3蛋白在哺乳动物中的广泛应用奠定了基础,有较大的实际应用价值。
本发明公开了属于生物化学与分子生物学技术领域的一种密码子优化的β‑半乳糖苷酶基因及其应用。该β‑半乳糖苷酶的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。本发明根据牛乳汁中相关高表达蛋白密码子的偏爱性,对细菌来源的β‑半乳糖苷酶基因的密码子进行优化。优化后的OLacZ基因在小鼠乳腺上皮细胞中进行验证,证明其相对于野生型的LacZ基因表达量有着显著提高,约3.7倍。经密码子优化的OLacZ基因在泌乳期母鼠的乳腺组织中,更能有效表达。