本发明公开了一种可溶性表达EG95蛋白及其制备方法和应用,该蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,是在羊棘球蚴EG95基因后通过柔性连接子连接一个促溶标签而得到,其保留了完整的EG95蛋白序列,所使用的促溶标签对原蛋白影响小,不但能有效促溶,还不会对镍柱纯化或免疫等造成影响;相对于包涵体表达生产工艺的复杂性,可溶性表达简化了蛋白生产工艺,提高了生产效率,减少了多个纯化步骤带来的蛋白损失,还减少了氨氮废水的排放量;该蛋白可作为抗原用于制备羊棘球蚴病基因工程亚单位疫苗,动物试验结果证实,由其制得的疫苗具有良好的免疫效力和安全性。
本发明公开了一种细粒棘球蚴及加拿大棘球蚴EG95/EC95蛋白组合的制备及应用;所述重组蛋白组合包括dEG95和dEC95氨基酸序列;dEG95氨基酸序列为狭义细粒棘球绦虫的EG95删去N端的信号肽区域及C端的跨膜区,得到的修饰后的氨基酸序列;EG95基因序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;dEC95氨基酸序列为加拿大棘球绦虫的EC95删去N端的信号肽区域及C端的跨膜区