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[发明专利]一种辅助完成球虫子孢子发育循环的方法-CN202310649380.0在审
发明人：曲自刚;付宝权 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2023-06-02 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种辅助完成球虫子孢子发育循环的方法,属于生物技术领域。本发明将子孢子通过胶囊的方式进入动物体内，避免机械破坏和胃液消化，通过采用肠溶壳空囊将子孢子纳于其中，到达肠道后再肠道消化酶的作用下将肠溶壳溶解，使子孢子释放出来从而达到感染肠道的目的。本发明为球虫材料的获得提供了一种快速简便的制备方法，具有广泛适用性。
一种辅助完成虫子孢子发育循环方法

[发明专利]一种单个球虫的分离方法-CN202310652682.3在审
发明人：曲自刚;付宝权 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2023-06-02 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种单个球虫的分离方法，属于生物技术领域。一种单个球虫的分离方法将荧光蛋白基因和靶标基因形成的融合基因整合至球虫子孢子基因组中，将整合的子孢子进行药物筛选；采用CellCut激光显微切割操作系统对筛选后的卵囊进行单卵囊分选，培养，得到单个球虫。本发明提供的方法具有单卵囊分离效率及准确率高的优点，同时由于本发明基于荧光标记使靶标蛋白可视化的原理，使制备的单球虫符合高内涵筛选平台的基本要求，为筛选靶定基因的抑制剂或者激动剂的高通量筛选奠定了坚实的基础。本模型可应用于球虫药物的筛选，具有的假阳性低、筛选所需样本少、筛选样本量大、易于标准化、筛选速度快、特异性强等优势。
一种单个分离方法

[发明专利]一种基于流式细胞技术分离单个球虫卵囊的方法-CN202310651884.6在审
发明人：曲自刚;付宝权;黎玉琼;李文卉;张念章;杨峰 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2023-06-02 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于流式细胞技术分离单个球虫卵囊的方法,属于生物技术领域。本发明确定了针对球虫卵囊单个分离的参数，在流式细胞仪从细胞群中高速分选出被指定的细胞，具有分选准确度高、分选速度快等优点。其分选时间较短，且分选得到的细胞活性良好，它可以精准的将细胞分选至培养皿、细胞培养板及细胞管中。尤其是利用流式细胞仪分选单个细胞至96孔板中，很好地简化了分选单个细胞过程。从样品制备到仪器操作分选入96孔板，全程仅需要1h，操作简便。
一种基于细胞技术分离单个虫卵方法

[发明专利]弓形虫弱毒株PruΔpp2a-c的构建方法和应用-CN202211569357.2在审
发明人：王金磊;王萌;李婷婷;张念章;李月梅;付宝权;朱兴全 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2022-12-07 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C12N1/11 文献下载
摘要：本发明提供了弓形虫弱毒株PruΔpp2a‑c的构建方法和应用，属于生物医药技术领域。本发明通过敲除TgPP2A‑C基因，获得了TgPP2A‑C基因缺失的弓形虫弱毒株，缺失该基因后大量淀粉颗粒在虫体间聚集，且弓形虫丧失形成包囊的能力；TgPP2A‑C基因缺失的弓形虫弱毒株体外增殖速度和致病性较野生株均显著降低；感染TgPP2A‑C基因缺失株后小鼠既不发病也不死亡，在小鼠脑组织中检测不到包囊，对宿主具有较高的安全性；TgPP2A‑C基因缺失的弓形虫弱毒株免疫小鼠后，小鼠的抗体水平显著提高，对高剂量的弓形虫RH速殖子和Pru包囊再次感染均能够提供显著免疫保护效力，可预防弓形虫的再次感染。
弓形虫弱毒株 pru pp2a 构建方法应用

[发明专利]一种弓形虫弱毒株及其构建方法和应用-CN202211210011.3在审
发明人：王金磊;梁勤立;王萌;李婷婷;聂兰碧;李雪梅;付宝权;朱兴全 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2022-09-30 - 公布日： 2023-04-21 - 主分类号： C12N15/79 文献下载
摘要：本发明提供了一种弓形虫弱毒株及其构建方法和应用，属于生物医药技术领域。本发明通过敲除弓形虫中的TgPP6C基因，最终获得TgPP6C基因缺失的弓形虫弱毒株，与野生株相比，TgPP6C基因缺失的弓形虫弱毒株的体外增殖速度显著下降，致病性显著降低，感染小鼠表现出不发病且不死亡现象，对宿主具有较高的安全性。同时，TgPP6C基因缺失的弓形虫弱毒株免疫小鼠后，产生高IgG抗体水平，对高剂量的弓形虫RH、PYS速殖子和Pru包囊再次感染均能够提供显著免疫保护效力，可用于预防弓形虫的再次感染，是具有巨大应用价值的弱毒活疫苗。
一种弓形虫弱毒株及其构建方法应用

[发明专利]三氯生在制备杀灭寄生线虫药物中的应用-CN202210284583.X有效
发明人：张念章;徐媛滨;付宝权;李文卉;王萌;李婷婷;曲自刚;王金磊 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2022-03-22 - 公布日： 2023-04-21 - 主分类号： A61K31/085 文献下载
摘要：本发明提供了一种三氯生在制备杀灭寄生线虫药物中的应用，属于药物化学技术领域，在本发明中，三氯生对旋毛虫各时期均具有明显的致死作用，且用量低，安全性高，三氯生可作为治疗线虫病的候选分子之一，对开发新杀灭线虫药物有重要的参考价值。
三氯生制备杀灭寄生线虫药物中的应用

[发明专利]用于鉴定多房棘球绦虫引物对、引物探针组以及他们的应用-CN201810947518.4有效
发明人：贾万忠;吴燕涛;闫鸿斌;李立;朱国强;李秀荣;李双男;姚刚;付宝权 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2018-08-20 - 公布日： 2023-03-24 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于鉴定多房棘球绦虫引物对、引物探针组以及他们的应用。本发明提供了特异引物对，由序列2所示单链DNA分子和序列3所示单链DNA分子组成。本发明还保护引物探针组，由特异引物对和特异探针组成；特异探针自上游至下游依次由如下元件组成：区段甲、四氢呋喃和区段乙；区段甲如序列4所示，且3’末端第2位核苷酸被荧光基团修饰；区段乙如序列5所示，且5’末端第2位核苷酸被淬灭基团修饰，且3’末端进行C3 Spacer修饰。特异引物对或引物探针组可用于：鉴定多房棘球绦虫；鉴定待测样本中是否含有多房棘球绦虫。本发明提供特异引物对或引物探针组用于鉴定多房棘球绦虫，操作简便、快速、特异性强、灵敏度高。
用于鉴定多房棘球绦虫引物探针以及他们应用

[发明专利]没食子酸辛酯在制备预防和/或治疗弓形虫病的药物中的应用-CN202111414195.0在审
发明人：张念章;付宝权;丛伟;王萌;张晓轩;李文卉;徐媛滨;陈卫刚 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2021-11-25 - 公布日： 2022-02-15 - 主分类号： A61K31/235 文献下载
摘要：本发明涉及没食子酸辛酯在制备预防和/或治疗弓形虫病的药物中的应用，属于药物制备技术领域。本发明提供了没食子酸辛酯在制备预防和/或治疗弓形虫病的药物中的应用。本发明为弓形虫病的治疗提供了一种有效、低毒的新药物。
没食子酸辛制备预防治疗弓形虫药物中的应用

[发明专利]重组旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶2在制备抗旋毛虫感染疫苗中的应用-CN201911412380.9有效
发明人：张念章;李文卉;金启旺;秦洪涛;付宝权 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2019-12-31 - 公布日： 2021-12-03 - 主分类号： A61K39/00 文献下载
摘要：本发明提供了重组旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶2在制备抗旋毛虫感染疫苗中的应用，属于免疫调节技术领域，所述重组旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶2能够诱导小鼠机体产生Th2型免疫应答，诱导小鼠的CD4+T细胞的增殖以及巨噬细胞转化成M2型；而上述这些免疫应答反应在抗旋毛虫感染过程中发挥主要作用；因此，重组旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶2作为抗原分子，能够用于制备抗旋毛虫感染疫苗。
重组旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物制备感染疫苗中的应用

[发明专利]细粒棘球蚴免疫原性蛋白EG95组成型表达载体的构建方法-CN202011050126.1在审
发明人：贾万忠;闫鸿斌;李立;郭爱民;李建秋;李文静;李文卉;李乐;张林生;张念章;付宝权 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2020-09-29 - 公布日： 2021-01-22 - 主分类号： C07K14/435 文献下载
摘要：本发明提供一种细粒棘球蚴免疫原性蛋白EG95基因组成型表达载体，且提供含有该表达载体的毕赤酵母基因工程菌。申请人成功在毕赤酵母组成型表达系统中实现了EG95蛋白的分泌性表达，经三角瓶摇床表达的蛋白浓度达到0.5g/L，目的蛋白纯度达到90％以上。经Westernblotting试验证实，表达的重组蛋白与现有羊棘球蚴病EG95亚单位疫苗免疫阳性血清具有良好的反应原性和特异性(与其他重组蛋白抗体无反应)。本发明从构建的p‑GAPZαA‑Eg95重组质粒转化毕赤酵母SMD1168中筛选出可以高效稳定地分泌表达EG95重组蛋白的工程菌，且不需使用诱导剂，显著降低了生产周期、生产成本和生产的复杂性。
细粒棘球蚴免疫原性蛋白 eg95 组成表达载体构建方法

[发明专利]一种牛棘球蚴EG95蛋白抗体间接ELISA检测试剂盒-CN202010771238.X在审
发明人：闫鸿斌;贾万忠;李立;李文卉;张念章;付宝权;李建秋;刘百林;李乐;李文静;何智宇;郭爱民 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2020-08-04 - 公布日： 2020-12-01 - 主分类号： G01N33/543 文献下载
摘要：本发明公开了一种牛棘球蚴EG95蛋白抗体间接ELISA检测试剂盒，包括细粒棘球绦虫重组抗原EG95蛋白预包被酶标板、血清稀释液、酶标记结合物稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶标记结合物、洗涤液、底物显色液和终止液；细粒棘球绦虫重组抗原制备过程中在EG95基因采用Xho I和EcoRⅠ同时酶切PCR产物和真核表达载体pGAPZαA，胶回收目的片段和载体后进行连接，构建重组质粒pGAPZαA‑Eg95，再将重组质粒转化到毕赤酵母SMD1168菌，连续经含100μg/mL和200μg/mL Zeocin的YPD培养基筛选，然后经甘油诱导表达。本发明采用真核表达系统获得的重组蛋白EG95用于创制牛棘球蚴病抗体检测试剂盒，具有特异性强、敏感性高、重复性好、易于操作优点。
种牛棘球蚴 eg95 蛋白抗体间接 elisa 检测试剂盒

[发明专利]一种布鲁氏菌Omp16蛋白抗原表位多肽及其应用-CN201610233885.9有效
发明人：曹小安;周继章;李兆才;娄忠子;景志忠;付宝权;尚佑军 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2016-04-16 - 公布日： 2020-05-08 - 主分类号： C07K14/23 文献下载
摘要：本发明公开一种布鲁氏菌Omp16蛋白抗原表位多肽及其用途。本发明的多肽是：其氨基酸序列中含有SEQ ID N0.1或/和SEQ ID N0.4或/和SEQ ID N0.3或/和SEQ ID N0.2或/和SEQ ID N0.5所示的序列，或者经过前述序列一个或/和几个氨基酸残基的取代和/或缺失形成的序列形成的多肽，也可以是前述序列所示的序列和添加有具有布鲁氏菌免疫源性功能的衍生的多肽。本发明的多肽可以构成的重组载体或表达盒或转基因细胞或重组菌。而本发明所涉及的各多肽可在制备诊断或预防或治疗布鲁氏菌引起的疾病的试剂或药物中的应用。本发明筛选多肽为化学合成，经刺激DC后可释放出高浓度的IL‑4，可作为目的抗原检测检测布鲁氏菌病感染的血清，或制备Omp16蛋白单克隆抗体的抗原。
一种布鲁氏菌 omp16 蛋白抗原多肽及其应用

[发明专利]一种布鲁氏菌Omp10蛋白抗原表位多肽及其应用-CN201610226026.7有效
发明人：曹小安;周继章;李兆才;娄忠子;景志忠;付宝权;尚佑军 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2016-04-13 - 公布日： 2020-05-08 - 主分类号： C07K14/23 文献下载
摘要：本发明公开一种布鲁氏菌Omp10蛋白抗原表位多肽及其应用。本发明的多肽是：其氨基酸序列中含有SEQ ID N0.1或/和SEQ ID N0.2或/和SEQ ID N0.3或/和SEQ ID N0.4或/和SEQ ID N0.5，或者由前述序列经过一个或/和几个氨基酸残基的取代和/或缺失形成的序列形成的多肽，也可以是前述序列和添加有具有布鲁氏菌免疫源性功能的衍生的多肽。本发明的多肽可以构成的重组载体或表达盒或转基因细胞或重组菌。而本发明所涉及的各多肽可在制备诊断或预防或治疗布鲁氏菌引起的疾病的试剂或药物中的应用。本发明筛选多肽为化学合成，经刺激DC后可释放出高浓度的IL‑4，可作为目的抗原检测检测布鲁氏菌病感染的血清，或制备Omp10蛋白单克隆抗体的抗原。
一种布鲁氏菌 omp10 蛋白抗原多肽及其应用

[发明专利]用于检测和区分多种以犬为终末宿主的常见大中型绦虫的检测试剂盒-CN201710013354.3有效
发明人：闫鸿斌;李立;朱国强;娄忠子;李双男;李文卉;张念章;贾万忠;付宝权 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2017-01-09 - 公布日： 2020-04-03 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了用于检测和区分多种以犬为终末宿主的常见大中型绦虫的检测试剂盒，包括有四对特异引物，分别为泡状带绦虫特异性引物对，多头带绦虫特异性引物对，豆状带绦虫特异性引物对，犬复孔绦虫特异性引物对。本发明的有益效果为：本发明提供的检测试剂盒，不仅能够确定被检样品是否被感染，而且能够确定感染了四种寄生虫中的具体虫种种类，其既可以用于中间宿主感染病料的检测，也可以用于终末宿主的感染检测，而且能对终末宿主可能的混合感染进行检测。经过对比验证，本发明的四对引物同时在一个PCR反应体系内使用而互不干扰，表明其具有高效性、系统性和经济简便性，适用于临床和实验室进行快速准确的病原学鉴定。
用于检测区分多种宿主常见大中型绦虫试剂盒

[发明专利]一种布鲁氏菌Yajc蛋白抗原表位多肽及其应用-CN201610233920.7有效
发明人：曹小安;周继章;李兆才;娄忠子;景志忠;付宝权;尚佑军 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2016-04-16 - 公布日： 2019-11-05 - 主分类号： C07K14/23 文献下载
摘要：本发明公开一种布鲁氏菌Yajc蛋白抗原表位多肽及其应用。本发明的多肽是：其氨基酸序列中含有SEQ ID N0.1或/和SEQ ID N0.2或/和SEQ ID N0.4或/和SEQ ID N0.5，或者由前述序列经过一个或/和几个氨基酸残基的取代和/或缺失形成的序列形成的多肽，也可以是前述序列和添加有具有布鲁氏菌免疫源性功能的衍生的多肽。本发明所涉及的各多肽可在制备诊断或预防或治疗布鲁氏菌引起的疾病的试剂或药物中的应用。本发明筛选多肽为化学合成，经刺激DC后可释放出高浓度的IL‑4，可作为目的抗原检测检测布鲁氏菌病感染的血清，或制备Yajc蛋白单克隆抗体的抗原。
一种布鲁氏菌 yajc 蛋白抗原多肽及其应用

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