本发明涉及灰飞虱抗药性基因CYP6AY3v2、降低灰飞虱抗药性的基因片段及其应用。该灰飞虱抗药性基因CYP6AY3v2的序列如SEQ ID NO.1所示。该降低灰飞虱抗药性的基因片段序列如SEQ ID NO.3所示。该基因片段用于降低灰飞虱抗药性。本发明可用于检测灰飞虱的抗药性，并实现对灰飞虱的抗药性治理。
本发明公开一种香菇C91‑3菌株的Latcripin‑11基因片段、编码蛋白、制备方法及用途，Latcripin‑11基因片段核苷酸序列如SEQ ID NO1 所示；编码蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO2Latcripin‑11基因片段的制备方法按如下步骤进行提取香菇C91‑3菌株的菌丝体总RNA；将菌丝体总RNA反转录合成cDNA；PCR扩增目标基因以所得到的cDNA为模板、以具有BamHⅠ 和 XhoⅠ两个酶切位点的PCR反应引物进行PCR反应；回收纯化DNA片段。
本发明公开一种香菇C91‑3菌株的Latcripin‑9基因片段、编码蛋白、制备方法及用途，Latcripin‑9基因片段核苷酸序列如SEQ ID NO：1 所示；编码蛋白氨基酸序列如SEQ ID NOLatcripin‑9基因片段的制备方法按如下步骤进行：提取香菇C91‑3菌株的菌丝体总RNA；将菌丝体总RNA反转录合成cDNA；PCR扩增目标基因：以所得到的cDNA为模板、以具有EcoRⅠ/XhoⅠ两个酶切位点的PCR反应引物进行PCR反应；回收纯化DNA片段。
本发明公开一种香菇C91‑3菌株的Latcripin‑8基因片段、编码蛋白、制备方法及用途，Latcripin‑8基因片段核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；编码蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO：Latcripin‑8基因片段的制备方法按如下步骤进行：提取香菇C91‑3菌株的菌丝体总RNA；将菌丝体总RNA反转录合成cDNA；PCR扩增目标基因：以所得到的cDNA为模板、以具有BamHⅠ/NotⅠ两个酶切位点的PCR反应引物进行PCR反应；回收纯化DNA片段。
本发明提供一种昆虫细胞色素P450基因及其应用，包括昆虫细胞色素P450基因、基因片段及其dsRNA和dsRNA在致死害虫中的应用。首先对飞蝗的细胞色素P450基因进行克隆、测序后，获得CYP4G102基因，其核苷酸全长序列为SEQ ID NO：1，氨基酸序列为SEQ ID NO：2。而后获得序列为SEQ ID NO：3的该基因片段，由该片段合成dsRNA。将上述合成的dsRNA注入飞蝗体腔后，此种昆虫因蜕皮后体壁保水性能减弱，导致体内水分过度散失而死亡，死亡率达到100％。
本发明属于动物基因工程应用领域。从大白猪中克隆了MSTN基因上游6个不同启动子缺失片段，它们分别为MSTN-P1、MSTN-P2、MSTN-P3、MSTN-P4、MSTN-P5、MSTN-P6。将这些片段构建至pGL3-Basic载体中后确定它们的活性，MSTN-P2活性相对较强，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：2所示。通过在该片段中加入SV40增强子片段，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：3所示，构建融合启动子载体pGL3-MSTNp2-EnhancerNX，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示。通过转染肌源性细胞及非肌源性细胞发现该启动子片段的活性大大增强。本发明公开了该融合启动子的构建过程，从而为构建肌肉特异的转基因动物或诱导外源基因在肌肉组织中高效表达提供了新的遗传资源。
本发明公开了与黄瓜抗、感黑斑病基因紧密连锁的基因片段及抗性鉴定方法，用于鉴定黄瓜黑斑病抗性的引物序列，由上游引物和下游引物组成，上游引物是SEQ ID No1所述序列，下游引物是SEQ ID No2所述序列利用本发明的引物序列及其扩增出的黄瓜抗黑斑病基因片段和黄瓜感黑斑病基因片段对构建的F2代分离群体和黄瓜种质资源进行黑斑病抗性评价，其结果与人工接种鉴定符合率分别达95.60%、93.42%，在黄瓜育种中进行资源抗性筛选具有很大的应用价值以这些序列为依据，可以进行抗黑斑病标记辅助选择、育种，用作黄瓜育种中检测黄瓜抗黑斑病基因的探针；可以为进行抗黑斑病基因定位、作图与克隆。
