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[发明专利]一种检测牛痘病毒加帽酶活性的方法-CN202210298041.8有效
发明人：郑紫君;李亚丽;汤玉洁;周玥;赵曼曼;张清仪;王明明;朱化星 -专利权人：苏州近岸蛋白质科技股份有限公司
申请日： 2022-03-25 - 公布日： 2022-06-28 - 主分类号： C12Q1/48 文献下载
摘要：本发明提供了一种体外检测牛痘病毒加帽酶活性的方法。具体地，所述方法包括：A.利用T7 RNA聚合酶转录出目的基因RNA；B.利用3'biotin‑GTP和牛痘病毒加帽酶对步骤A中RNA进行加帽反应；C.利用链霉亲和素磁珠对步骤B中的RNA进行加帽RNA吸附反应；D.利用RT‑qPCR方法检测步骤B、C中CT值差异，从而判定步骤B中牛痘病毒加帽酶的活性。本发明的方法重复性很好，测定的加帽与不加帽mRNA产量差异显著，可成功地定量检测牛痘病毒加帽酶活性。
一种检测牛痘病毒加帽酶活性方法

[发明专利]一种检测RNA加帽效率的方法-CN202210351807.4在审
发明人：滕以刚;袁灿灿;王小敏;郭帅;王雪琪 -专利权人：翌圣生物科技（上海）股份有限公司
申请日： 2022-04-02 - 公布日： 2022-08-12 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测RNA加帽效率的方法，所述方法包括：根据待检测RNA序列设计脱氧核酶，利用所述脱氧核酶切割待检测RNA分子，检测切割后的待检测RNA的分子量以及相对比例，测定加帽效率。本发明创造性地利用脱氧核酶切割待测RNA，并测定加帽效率，实现了定量检测RNA加帽效率，能够避免放射性污染，且操作简单、成本低。
一种检测 rna 效率方法

[发明专利]一种RNA加帽效率的定量方法、试剂盒及其应用-CN202310309002.8在审
发明人：丁平;雷霆钧;刘显霞 -专利权人：四川康德赛医疗科技有限公司
申请日： 2023-03-28 - 公布日： 2023-06-30 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明提供了一种RNA加帽效率的定量方法、试剂盒及其应用。其中，该方法主要包括：对RNA样品进行逆转录，得到所述RNA样品的逆转录产物；对所述逆转录产物进行至少一轮PCR，并对PCR产物进行纯化、测序；基于所述测序结果计算所述RNA样品中的RNA加帽效率。本发明基于高通量结果可以直接分析出已加帽的RNA序列量的特点，采用高通量测序这一技术手段对RNA加帽效率进行确定，可实现对RNA加帽效率的精准定量。
一种 rna 效率定量方法试剂盒及其应用

[发明专利]一种快速定量检测RNA加帽效率的方法-CN201910951836.2在审
发明人：朱斌;成锐;夏恒;黄锋涛;吴慧;陆雪玲;闫艳;余兵兵;王雄略;蒋怡心 -专利权人：华中科技大学;深圳华中科技大学研究院
申请日： 2019-10-09 - 公布日： 2021-04-09 - 主分类号： C12Q1/6809 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速定量检测RNA加帽效率的方法，由以下步骤组成：S1.体外转录合成未加帽的RNA并除去模板DNA；S2.对RNA进行加帽处理；S3.对经S1、S2步骤得到的RNA进行单磷酸化处理：先利用碱性磷酸酶去磷酸化，RNA纯化后再利用多聚核苷酸激酶在RNA的5’端加上单磷酸；S4.用单磷酸酶除去进行单磷酸化处理后的RNA，并设置不用单磷酸酶处理的对照组；S5.跑胶检测，定量测定用单磷酸酶处理的RNA的条带亮度(记为n)以及对照组的RNA的条带亮度(记为N)，计算RNA的加帽效率为：(n/N)×100％。本发明的有益效果是：(1)可快速定量地检测出RNA的加帽效率，操作简单快速，结果有效准确；(2)该方法对样品需求量少，对RNA类型、长度等无特殊要求，适用范围广。
一种快速定量检测 rna 效率方法

[发明专利]一种脱氧核酶及检测mRNA加帽率的方法-CN202311159046.3在审
发明人：孙秀莲;赵晟;孙叶 -专利权人：南京鸿明生物科技有限公司;宜明（苏州）细胞生物科技有限公司
申请日： 2023-09-09 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12Q1/44 文献下载
摘要：本文提供了一种检测RNA加帽效率的方法，包括如下步骤：1)采用脱氧核酶DNAzyme(10‑23)处理所述RNA，生成带有帽结构的RNA片段以及不带有所述帽结构的对应RNA片段；以及2)检测所述带有帽结构的RNA片段和所述对应RNA片段之间的比例关系，以确定所述加帽效率，其中所述脱氧核酶DNAzyme(10‑23)的两结合臂长度独立地选自11、12、13、14和15 nt。本文还提供了上述脱氧核酶DNAzyme(10‑23)以及包括上述脱氧核酶DNAzyme(10‑23)的RNA加帽效率检测试剂盒。
一种脱氧检测 mrna 加帽率方法

[发明专利]加帽RNA的制造方法-CN202180017057.0在审
发明人：阿部洋;木村康明;阿部奈保子 -专利权人：国立研究开发法人科学技术振兴机构
申请日： 2021-02-19 - 公布日： 2022-10-11 - 主分类号： C07H21/02 文献下载
摘要：本发明提供一种加帽RNA的制造方法，该加帽RNA是5’端被加帽修饰的RNA，其特征在于，使下述式(1)所示的活化帽化合物与5’端被单磷酸化的单磷酸RNA进行反应，
rna 制造方法

[发明专利]一种非加帽线性RNA重组核酸分子及其应用-CN202211248922.5在审
发明人：韩悌云;徐实 -专利权人：南京澄实生物科技有限公司
申请日： 2022-10-12 - 公布日： 2023-06-16 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明提供一种非加帽线性RNA（NCT RNA）重组核酸分子及其应用。所述非加帽线性RNA重组核酸分子包含黄病毒属登革热病毒基因组sfRNA元件，间隔序列，翻译起始元件IRES，编码至少一个目标多肽的编码元件，3’‑UTR元件，polyA序列。本发明利用黄病毒科基因组sfRNA序列，保护RNA 5`端不被降解，提高了非加帽线性mRNA在细胞内的稳定性。同时，结合IRES或其衍生体对mRNA的调控，促使非加帽线性mRNA可持续、稳定的表达目的蛋白。
一种非加帽线性 rna 重组核酸分子及其应用

[发明专利]用于5-加帽的RNA合成的寡核苷酸-CN202180071587.3在审
发明人：金庆镇;崔康铉;金旭镒;方荧泰;李璱气;韩始延 -专利权人： ST制药株式会社
申请日： 2021-10-19 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于合成5'‑加帽的RNA的新型寡核苷酸引物。本发明中作为化学式1提供的用于RNA加帽的新型寡核苷酸引物可以在核酸治疗剂或疫苗领域中有效利用。
用于 rna 合成寡核苷酸

[发明专利]提高转录的RNA的加帽效率的方法和组合物-CN201980076560.6在审
发明人： B·罗伊;J·翁 -专利权人：新英格兰生物实验室公司
申请日： 2019-10-04 - 公布日： 2021-07-23 - 主分类号： C12N9/12 文献下载
摘要：提供了用于将体外转录(IVT)混合物中的RNA加帽的方法和组合物，所述混合物包括热稳定的RNA聚合酶变体和帽类似物，使得当将DNA模板添加到混合物中，然后将混合物在用于体外转录的条件下温育时，产生了加帽的RNA。方法描述了在升高的温度下以及在用于IVT的标准温度下的高加帽效率。所使用的RNA聚合酶是T7RNA聚合酶的热稳定变体，称为聚合酶M20，其包括在388和567位处的取代，特别是D388E和V567P。
提高转录 rna 效率方法组合

[发明专利]RNA多磷酸酶组合物、试剂盒及其应用-CN200980125297.1无效
发明人： J·J·詹德里萨克;R·维迪亚纳桑;R·梅斯 -专利权人： EPI中心科技公司
申请日： 2009-05-04 - 公布日： 2011-05-25 - 主分类号： C12N9/14 文献下载
摘要：本发明涉及本领域以前没有描述的RNA 5′多磷酸酶的发现、发现所述酶的方法、所述酶的组合物、制备所述酶的方法，和将所述酶用于生物医学研究、用于人和非人诊断学、用于治疗产品的生产和用于其它用途的各种方法和试剂盒具体地，一些实施方案提供了使用RNA多磷酸酶分离、纯化、生产和测定加帽的RNA的组合物、试剂盒和方法，其中使用生物学样品或来自体外加帽反应的样品，其中所述样品也含有未加帽的RNA。其它实施方案提供了组合物、试剂盒和方法，其中RNA多磷酸酶包括用于分析物特异性测定的信号放大酶。
rna 磷酸酶组合试剂盒及其应用

[发明专利]RNA沉淀液在检测mRNA加帽效率中的用途-CN202311212061.X在审
发明人：王子洋;李亚丽;周玲云;李永娟 -专利权人：苏州近岸蛋白质科技股份有限公司
申请日： 2023-09-20 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12Q1/6816 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，特别是涉及RNA沉淀液在检测mRNA加帽效率中的用途。本发明的RNA沉淀液包含LiCl和乙醇。本发明的RNA沉淀液用于检测mRNA加帽效率。本发明检测mRNA加帽效率时，不需要将酶切产物单独纯化出来；并且相较于常规检测方法，更快捷方便，可同时进行批量样品的处理，并且对于酶切探针要求低，不需要进行生物素修饰，不仅降低了合成成本，合成周期也显著缩短
rna 沉淀检测 mrna 效率中的用途

[发明专利]RNA修饰嵌合蛋白及其应用-CN202110379093.3在审
发明人：张平静;董颖颖;蒋婷;邵梅琪;孙娟娟;仇凯军;刘韬;高海霞;钱其军 -专利权人：上海细胞治疗集团有限公司
申请日： 2021-04-08 - 公布日： 2022-10-18 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明提供一种嵌合蛋白亚基，包含相互连接的(a)RNA加帽酶的D12亚基或其功能片段，或与之具有至少90％序列相同性并具有D12亚基活性的变体，和(b)RNA帽结构2′‑O‑甲基转移酶或其功能片段，或与之具有至少90％序列相同性并具有RNA帽结构2′‑O‑甲基转移活性的变体。本发明还提供包含所述嵌合蛋白亚基和RNA加帽酶D1亚基或其功能片段的嵌合蛋白。
rna 修饰嵌合蛋白及其应用

[发明专利]一种测定牛痘病毒加帽酶活性的方法-CN202010841184.X在审
发明人：袁灿灿;滕以刚 -专利权人：翌圣生物科技（上海）有限公司
申请日： 2020-08-19 - 公布日： 2020-12-22 - 主分类号： C12Q1/48 文献下载
摘要：本发明公开了一种测定牛痘病毒加帽酶活性的方法，包括如下步骤：步骤A、利用HPLC‑MS的方法检测转录产物RNA的分子量大小；步骤B、利用HPLC‑MS的方法检测采用牛痘病毒加帽酶进行RNA加帽反应后的产物的分子量大小；步骤C、比较步骤A和步骤B的产物的分子量大小，观察步骤B的产物是否增加一个甲基化鸟苷的分子量，从而判定步骤B的产物是否具有牛痘病毒加帽酶活性。本发明与传统的牛痘病毒加帽酶活性检测方法相比，无放射性污染，灵敏度高，可重复性好，结果易于分析判断，具有较好的工业应用价值。
一种测定牛痘病毒加帽酶活性方法

[发明专利]用于RNA加帽的化合物及其应用-CN202210973168.5有效
发明人：张健存;张礼军;周溢谦;陈家锋;张菊福;李苏泳;刘艳卉;郭琛;唐万军;吴烽;何小溪;郭旗;陈晖旋;王坤;李德耀 -专利权人：广州市恒诺康医药科技有限公司
申请日： 2022-08-15 - 公布日： 2023-06-09 - 主分类号： C07H19/20 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于RNA加帽的化合物及其应用，属于基因工程技术领域。该化合物具有式I所示结构，采用该化合物进行mRNA5’端加帽，具有较好的加帽效率，且获得的加帽后mRNA表达量也具有提升。
用于 rna 化合物及其应用

[发明专利]一种基于病毒加帽酶的稳定T7表达系统及其在真核生物中表达蛋白质的方法-CN202111465745.1在审
发明人：王文雅;唐宏宇;李强 -专利权人：北京化工大学
申请日： 2021-12-03 - 公布日： 2022-03-15 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于病毒加帽酶的稳定T7表达系统及其在真核生物中表达蛋白质的方法。所述稳定T7表达系统包含T7 RNA聚合酶、T7转录单元和病毒加帽酶，所述T7转录单元由T7启动子、T7终止子和目标基因构成。所述方法包括将T7 RNA聚合酶整合到宿主基因组，将T7启动子启动的转录单元构建到载体或基因组，利用病毒加帽酶为T7 RNA聚合酶合成的mRNA加5′Cap结构，帮助T7 RNA聚合酶转录的mRNA运输到细胞质本发明的基于病毒加帽酶的T7表达系统不随宿主细胞的分裂而丢失，在真核生物中高效稳定地表达外源蛋白。
一种基于病毒加帽酶稳定 t7 表达系统及其生物蛋白质方法

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