本发明公开了一种酶催化制备聚酯的方法。该方法将β-羟基羧酸酯作为反应物,以生物酶Novozyme435、Lipase from thermomyces lanuginosus、PPL或者Lipase PS作为催化剂,在非常温和的条件下反应制备聚酯本发明为无溶剂反应体系,生物酶稳定性高,可进行多批次连续催化反应,聚合采用可规模化化学单体以及工程化生物酶为催化剂可大大降低产品成本。
一种重组酵母胱硫醚bata合酶催化中心的表达及生产放大,该编码基因的核苷酸序列SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2,重组酵母胱硫醚beta合酶催化中心353个AA催化中心,将重组催化中心插入到原核表达载体的多克隆位点,构建重组表达质粒,转化到表达宿主大肠杆菌,筛选阳性克隆,获得工程菌,工程菌经发酵、诱导、分离、纯化,得重组胱硫醚beta合酶。通过优化发酵罐的溶氧、PH、搅拌速率以及补料条件,使酶的产量可以达到5g/L且酶活可以达到600-700U/mg。本发明提供的重组胱硫醚beta合酶催化中心的表达方法以及放大生产策略,其操作简单,而且表达的胱硫醚beta合酶产量高达5g/L,纯度达到95%以上,目前未见表达效率更好的报道。
本发明涉及生物工程技术领域,特别涉及一种罗布麻单宁酶全细胞催化剂工程菌株及其制备方法和应用。罗布麻单宁酶全细胞催化剂工程菌株包含SEQ ID NO:1所示的罗布麻单宁酶基因,可表达SEQ ID NO:2所示的罗布麻单宁酶。本发明从草本植物罗布麻体内克隆获得新的单宁酶基因,构建穿梭表达载体,并经诱导获得细胞壁表面锚定罗布麻单宁酶的全细胞催化剂工程菌株。该全细胞催化剂工程菌株具较高的耐热性,能催化表儿茶素没食子酸酯等单宁底物,并去除罗布麻茶苦涩味,明显改进罗布麻茶风味,具有广阔的应用前景。