本发明涉及生物技术领域,具体涉及基于RPA‑LFD法检测乙肝病毒的RPA引物、胶体金侧流层析试纸条及其应用。所述基于RPA‑LFD法检测乙肝病毒的RPA引物由SEQ ID NO.1所示的单链DNA分子和SEQ ID NO.2所示的单链DNA分子组成,RPA试剂包括上述RPA引物;试纸条包括上述RPA引物或RPA试剂;应用于检测乙肝病毒的方法为先用上述RPA引物对待测病毒进行RPA扩增,得到RPA扩增产物,然后将该产物滴加在试纸条加样区,根据试纸条上产生的条带情况分析是否为乙肝病毒。本发明针对乙肝病毒的DNA序列,设计特异性扩增引物,并基于该引物建立了乙肝病毒的RPA检测方法,可对乙肝病毒进行定性检测。基于该引物建立的乙肝病毒的RPA检测方法灵敏、准确、简便和快速,对临床相关疾病检验具有指导意义。
本发明公开了乙肝病毒表面抗原重组嵌合蛋白及其制备方法和应用。所述的乙肝病毒表面抗原重组嵌合蛋白的氨基酸组成如SEQ ID NO.9所示或与SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列具有90%同源性。其制备方法包括:重组质粒pET-28a-S的构建;重组质粒pET-28a-S-S1的构建;乙肝病毒表面抗原重组嵌合蛋白的表达和纯化。所述的乙肝病毒表面抗原重组嵌合蛋白具有较高的灵敏度和特异性,可应用于生物医药领域,特别是应用在乙肝病毒表面抗体胶体金检测试纸条中。