[发明专利]一种双酶偶联产N-乙酰神经氨酸的高通量筛选方法在审
| 申请号： | 202310073280.8 | 申请日： | 2023-02-07 |
| 公开（公告）号： | CN115960985A | 公开（公告）日： | 2023-04-14 |
| 发明（设计）人： | 柳东;张杰;应汉杰;郑诚;张斌赟;陈勇;牛欢青 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/533 | 分类号： | C12Q1/533;C12Q1/527;C12N15/70;C12N15/60;C12N15/61;C12N1/21;G01N21/31;C12R1/19 |
| 代理公司： | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 210009 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种双酶偶联产N‑乙酰神经氨酸的高通量筛选方法。利用显色液可将酶催化反应生成的N‑乙酰神经氨酸，由无色快速转变为紫色，且于580nm处产生吸光值的变化这一特点。对以N‑乙酰葡萄糖胺、丙酮酸钠、N‑乙酰神经氨酸裂合酶、tritonx‑100为底物，再加入N‑乙酰葡萄糖胺异构酶反应生成的含有N‑乙酰神经氨酸的反应液进行高通量筛选，发现只需将反应液稀释至0.355mM左右就可对突变菌高通量快速进行筛选。本发明具有操作简单、成本低廉、检测准确等特点，对N‑乙酰葡萄糖胺异构酶的定向进化具有指导意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 双酶偶 联产 乙酰 神经 氨酸 通量 筛选 方法 | ||
【主权项】：
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