[发明专利]一种高效加尾快速扩增植物dsRNA病毒基因组末端序列的方法及其应用在审

专利信息
申请号: 202210176147.0 申请日: 2022-02-25
公开(公告)号: CN114457142A 公开(公告)日: 2022-05-10
发明(设计)人: 林文忠;许瑜婷;黄婉婷;杜振国;高芳銮;吴祖建 申请(专利权)人: 福建农林大学
主分类号: C12Q1/6806 分类号: C12Q1/6806;C12Q1/6869;C12Q1/70;C12R1/94
代理公司: 福州元创专利商标代理有限公司 35100 代理人: 彭琴;蔡学俊
地址: 350002 福*** 国省代码: 福建;35
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摘要: 发明提供一种高效加尾快速扩增植物dsRNA病毒基因组末端序列的方法及其应用。该方法通过加热总RNA变性成单链RNA;对单链RNA的3'端加A尾;使用oligo(dT)10‑RT将RNA逆转录成cDNA;以cDNA为模板将病毒基因组各分段的两端划分为5'端区域和3'端区域进行Multiplex PCR;跑胶回收目的条带并将其连接至克隆载体后进行测序,获得基因组的全部末端序列。该方法对样品的RNA质量要求低,oligo(dT)10‑RT与Anchor24‑F引物在dsRNA病毒基因组末端序列鉴定上可通同,适用于批量获得dsRNA病毒基因组末端序列,将有助于未知的dsRNA基因组全长序列的获得。
搜索关键词: 一种 高效 快速 扩增 植物 dsrna 病毒 基因组 末端 序列 方法 及其 应用
【主权项】:
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