[发明专利]一种柴胡原生质体的制备及瞬时转化方法在审

专利信息
申请号: 202111486799.6 申请日: 2021-12-07
公开(公告)号: CN113980885A 公开(公告)日: 2022-01-28
发明(设计)人: 余马;冯亮;陈华;赵军;罗勇;李玉婵;莫传鑫;董凯密;刘晓艳;谢文霖 申请(专利权)人: 西南科技大学
主分类号: C12N5/04 分类号: C12N5/04;C12N15/82;C12N15/55;A01H4/00
代理公司: 成都知棋知识产权代理事务所(普通合伙) 51325 代理人: 马超前
地址: 621010 四川*** 国省代码: 四川;51
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摘要: 发明公开了一种柴胡原生质体的制备及瞬时转化方法,该方法包含:原生质体制备和原生质体瞬时转化;所述原生质体制备,包含:将柴胡下胚轴愈伤组织经酶解液在避光条件下酶解处理,并进行纯化,得到柴胡原生质体;所述原生质体瞬时转化,包含:将所述柴胡原生质体和Crispr/Cas9‑T3T4质粒混合,加入聚乙二醇转化液,室温孵育,待孵育结束后加入W5溶液终止反应,离心收集经过瞬时转化的柴胡原生质体,并重悬于MMG溶液中,室温避光孵育。本发明的方法能够实现柴胡下胚轴愈伤原生质体的制备,采用本发明的方法制备的原生质体完整好,浓度可达106个/mL,可有效保证瞬时转化及原生质培养的浓度要求。
搜索关键词: 一种 柴胡 原生 质体 制备 瞬时 转化 方法
【主权项】:
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