[发明专利]一种检测百合中车前草花叶病毒的实时荧光定量PCR方法在审
申请号: | 202111085250.6 | 申请日: | 2021-09-16 |
公开(公告)号: | CN113667776A | 公开(公告)日: | 2021-11-19 |
发明(设计)人: | 徐雷锋;明军;杨盼盼;宋蒙 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12R1/94 |
代理公司: | 成都宏田知识产权代理事务所(普通合伙) 51337 | 代理人: | 杨伟 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供一种检测百合中车前草花叶病毒的实时荧光定量PCR方法。包括取待测百合植株的叶片,提取总RNA;以提取的百合叶片总RNA为模板,进行逆转录反应获得cDNA;以获得的cDNA为模板,利用特异性引物对CP‑2F/R进行基于荧光染料SYBRGreenI的实时荧光定量PCR检测;以不同浓度的含检测基因片段的质粒PlAMV‑CP2标准品为模板制作标准曲线;根据检测结果Cq值判断植株的带病情况,根据标准曲线对带病植株的病毒进行定量计算。本发明对侵染车前草花叶病毒的百合植株的鉴定具有快速简便、灵敏度高及可重复性强的优点,其检测灵敏度是常规RT‑PCR的100倍,可用于进出境口岸和百合生产中车前草花叶病毒的快速诊断、定量检测及监测防控。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 百合 车前草 花叶 病毒 实时 荧光 定量 pcr 方法 | ||
【主权项】:
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