本发明公开了一种卷丹LlAS1基因的克隆及其应用。卷丹LlAS1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。LlAS1的开放阅读框包含1035bp，编码344个氨基酸。LlAS1蛋白在N端含有两个串联的保守SANT结构域。LlAS1基因的表达表明，LlAS1在珠芽中表达强烈，尤其是在初生珠芽中，即珠芽原基建立和珠芽形成过程中高表达。LlAS1在叶腋中的瞬时过表达和病毒诱导的基因沉默(VIGS)分别显著促进和抑制了卷丹珠芽形成。结果表明，LlAS1与卷丹的珠芽形成呈正相关，为进一步了解LlAS1基因对珠芽形成的调控及其在百合分子遗传改良中的应用奠定了基础。
本发明公开了一种百合珠芽形成调控基因LlWOX11的克隆方法及其应用，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。WOX11基因在模式植物拟南芥和水稻中的主要功能为参与侧根或不定根的发育。在百合中，通过VIGS技术诱导LlWOX11基因沉默可显著降低珠芽诱导率；过表达LlWOX11后，珠芽诱导率升高，表明LlWOX11在百合珠芽形成中发挥重要的调控功能，所述的LlWOX11基因可对百合珠芽形成进行有效的人工干预，在提高百合繁殖效率方面将有广阔的应用前景。
本发明公开了一种百合LlKnat13基因克隆及其在控制百合珠芽形成中的应用方法，根据转录组数据设计引物，以cDNA为模板，经PCR扩增，获得其CDS区，扩增CDS序列引物如下，上游Llknat13‑F：5′‑ATGAGAGAGTCATACCACCCC‑3′，下游Llknat13‑R：5′‑CTATGTGTAGCGTTCGGAGT‑3′，扩增出的CDS序列进行测序，并与转录组序列比对，获得LlKnat13基因含完整ORF的cDNA序列，碱基序列具体如SEQ ID NO.1所示。本发明提供了一种百合LlKnat13基因克隆及其在控制百合珠芽形成中的应用方法，本发明首次克隆的百合LlKnat13基因属于Class II KNOX，通过VIGS技术诱导百合LlKnat13基因沉默，显著降低了珠芽诱导率。因此，本发明不仅丰富了ClassII KNOX基因研究的信息，且利用本发明所述的LlKnat13基因可对百合珠芽形成进行有效的人工干预，在提高百合繁殖效率方面将有广阔的应用前景。
