[发明专利]一种新型cDNA文库的制备在审
申请号: | 202110797723.9 | 申请日: | 2021-07-14 |
公开(公告)号: | CN113604538A | 公开(公告)日: | 2021-11-05 |
发明(设计)人: | 朱也;曾繁丽;柳曹枝 | 申请(专利权)人: | 南京瑞源生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12Q1/686;C40B50/06 |
代理公司: | 北京化育知识产权代理有限公司 11833 | 代理人: | 闫露露 |
地址: | 210000 江苏省南京市栖霞*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及cDNA文库技术领域,且公开了一种新型cDNA文库的制备,将组织碎片和变性裂解液装入容量瓶中密封,再将其放入冰水中浸泡8min后取出,之后将容量瓶放入离心机中高速匀浆,离心速率为20‑40秒/次,之后取出容量管,加入乙酸钠和氯仿混合后密封,再将其放入冰水中浸泡8min后取出,之后再放入离心机中离心20‑40min,之后静置沉淀通过移液管转移容量管上层液体,在容量瓶中加入核酸酶抑制剂充分溶解RNA沉淀;添加两轮消减杂交及两步PCR,使Tester中代表差异表达基因的cDNA片段得到大量扩增,同时抑制了非特异性cDNA片段的扩增,使各种消减文库的特异性得到极大地提高单链Tester cDNA的均等化过程,使高、低丰度的差异表达基因都能有效分离。 | ||
搜索关键词: | 一种 新型 cdna 文库 制备 | ||
【主权项】:
暂无信息
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