[发明专利]一种基于滚环扩增与分子信标的tsRNA检测方法在审

专利信息
申请号: 202110771643.6 申请日: 2021-07-08
公开(公告)号: CN113981044A 公开(公告)日: 2022-01-28
发明(设计)人: 李智洋;黄蓉蓉;范柏月 申请(专利权)人: 南京鼓楼医院
主分类号: C12Q1/6844 分类号: C12Q1/6844
代理公司: 南京禾祁专利代理事务所(普通合伙) 32462 代理人: 黄天天
地址: 210008 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种基于滚环扩增与分子信标的tsRNA检测方法,包括如下步骤:1)针对目标tsRNA设计哑铃状DNA模板,使用T4连接酶将哑铃状模板缺口连接;2)目标tsRNA竞争结合DNA模板互补区,破坏DNA模板哑铃状结构,使其呈环状;DNA模板成环后作为模板,目标tsRNA作为引物,在phi29 DNA聚合酶的作用下,发生滚环扩增;3)在扩增产物中加入分子信标并进行信号检测。本发明无需对目标tsRNA进行预处理、逆转录等步骤,大大节约了时间;恒温即可扩增,对精密仪器的依赖性降低;序列相近的干扰RNA序列不完全互补,无法破坏哑铃结构,就无法开启扩增,特异性强。
搜索关键词: 一种 基于 扩增 分子 标的 tsrna 检测 方法
【主权项】:
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