[发明专利]一种多器官细胞基因突变检测基因编辑小鼠模型的构建及应用在审
申请号: | 202110690906.0 | 申请日: | 2021-06-22 |
公开(公告)号: | CN113412820A | 公开(公告)日: | 2021-09-21 |
发明(设计)人: | 李海山;谢文平;沈国林;宋乃宁;赵潺 | 申请(专利权)人: | 中国检验检疫科学研究院 |
主分类号: | A01K67/027 | 分类号: | A01K67/027;C12N15/85;C12N15/90;C12N15/62;C12N15/55;G01N33/50 |
代理公司: | 北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙) 11333 | 代理人: | 刘俊玲 |
地址: | 100123 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供一种CD59基因编辑小鼠模型,它是定点敲入CD59‑增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达序列片段的小鼠。本发明还提供构建CD59‑EGFP基因编辑小鼠模型的方法,是利用CRISPR‑Cas9基因编辑技术在小鼠基因ROSA26位点定点敲入CD59‑EGFP基因序列的方法,包括:设计并获得向导RNA,制备向导RNA与Cas9蛋白混合物;构建CD59‑EGFP打靶载体;显微共注射与F0代小鼠获得,F1代小鼠获得;CD59‑EGFP打靶载体中,CD59的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,EGFP的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的基因编辑小鼠模型对致突变化学物有应答,分离其肝细胞、生殖细胞,在荧光显微镜下通过绿色荧光可以显示CD59胞膜定位,可用于化学物的多器官细胞致突变性检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 器官 细胞 基因突变 检测 基因 编辑 小鼠 模型 构建 应用 | ||
【主权项】:
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