[发明专利]一种人多能干细胞制备靶向CD19的嵌合抗原受体NK细胞的方法与应用

摘要

本发明公开了一种人多能干细胞制备靶向CD19的嵌合抗原受体NK细胞的方法与应用。具体地公开了制备CD19‑CAR‑NK细胞的方法，利用靶向AAVS1位点的CRISPR/CAS9系统，将CD19‑CAR基因和EF1α启动子定向敲入人多能干细胞基因组AAVS1区，得到重组人多能干细胞(CD19‑CAR‑hPSC)，再诱导培养CD19‑CAR‑hPSC分化成拟胚体，从拟胚体分化的造血前体细胞中分选CD34+造血前体细胞，再向NK细胞定向分化，最终分化成CD19‑CAR‑NK细胞。本发明的CD19‑CAR‑NK细胞具有更高的增殖能力，纯度更高、具有更强的抗肿瘤能力，可以安全、有效的用于肿瘤免疫治疗。