[发明专利]一种用于检测基因CREB1单核苷酸多态性的PCR-RFLP方法在审
申请号: | 201911002140.1 | 申请日: | 2017-04-21 |
公开(公告)号: | CN110734969A | 公开(公告)日: | 2020-01-31 |
发明(设计)人: | 徐瑶;宋如晦;石伟林;代洋;许娜;廖兴华;张同存 | 申请(专利权)人: | 武汉科技大学 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/683 |
代理公司: | 42242 武汉蓝宝石专利代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人: | 王振宇 |
地址: | 430000 *** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于检测基因CREB1单核苷酸多态性的PCR‑RFLP方法,首先,根据DNA池测序结果,检测到的基因多态性包括:CREB1基因启动子区距转录起始点‑1354位T或G的单核苷酸多态性和‑1343位T或A的单核苷酸多态性。以待测样本基因组DNA为模板,以引物对P为引物,在Taq DNA聚合酶、Buffer(缓冲环境)、Mg++、dNTPs存在的情况下,PCR扩增包含多态位点的CREB1基因序列,然后将PCR产物一分为二,分别用Hha I和Xsp I限制性内切酶进行消化,酶切产物通过琼脂糖凝胶电泳分型。 | ||
搜索关键词: | 单核苷酸多态性 琼脂糖凝胶电泳 基因启动子区 限制性内切酶 基因多态性 转录起始点 基因组DNA 待测样本 多态位点 基因序列 酶切产物 引物对P 一分为二 检测 缓冲 测序 分型 引物 消化 基因 | ||
【主权项】:
1.一种用于检测基因CREB1单核苷酸多态性的PCR-RFLP方法,其特征在于:以糖尿病患者和正常人的血液基因组DNA为模板,在TaqDNA聚合酶、缓冲环境、Mg++、dNTPs存在的情况下,利用聚合酶链式反应引物对P进行PCR扩增,然后利用限制性内切酶对其进行酶切,再通过电泳检测即可准确鉴定待测样本的单核苷酸多态性。/n
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