[发明专利]一种从临床血液中检测金黄色葡萄球菌病原菌的方法在审
| 申请号: | 201910861067.7 | 申请日: | 2019-09-12 |
| 公开(公告)号: | CN110512016A | 公开(公告)日: | 2019-11-29 |
| 发明(设计)人: | 李敬;王旭;孙宝林;郭建;吴谨 | 申请(专利权)人: | 卓源健康科技有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/14;C12R1/445 |
| 代理公司: | 34120 合肥顺超知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人: | 张芳<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
| 地址: | 230088 安徽省合肥市高新区望*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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| 摘要: | 本发明提供了一种临床血液中检测金黄色葡萄球菌病原菌的方法,包括以下步骤:S1、血液中金黄色葡萄球菌基因组DNA的提取;S2、PCR检测:S2.1、利用金黄色葡萄球菌基因组DNA序列设计特异性的PCR引物,正向引物:5’‑ATCGCACGCTTCGCCTAT‑3’;反向引物:5’‑CGTCCGCTCTGGGTTAGT‑3’;引物的扩增片段长度为135bp;S2.2、以从血液中提取的金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,采用PCR引物进行PCR扩增;S2.3、对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳及检测,扩增出长度为135bp的片段判定为检测出金黄色葡萄球菌。本发明通过PCR技术快速高效地检测出临床血液中金黄色葡萄球菌的感染,对血液中金黄色葡萄球菌的检测下限达到10CFU/mL。 | ||
| 搜索关键词: | 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌基因组DNA 检测 临床血液 血液 病原菌 琼脂糖凝胶电泳 反向引物 扩增片段 序列设计 正向引物 扩增 引物 判定 感染 | ||
【主权项】:
1.一种从临床血液中检测金黄色葡萄球菌病原菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:/nS1、血液中金黄色葡萄球菌基因组DNA的提取;/nS2、血液中金黄色葡萄球菌PCR检测:/nS2.1、利用金黄色葡萄球菌基因组DNA序列设计一段特异性的PCR引物,所述PCR引物包括正向引物和反向引物;/n所述正向引物如SEQ ID NO.1所示:5’-ATCGCACGCTTCGCCTAT-3’;/n所述反向引物如SEQ ID NO.2所示:5’-CGTCCGCTCTGGGTTAGT-3’;/n引物的扩增片段长度为135bp;/nS2.2、以步骤S1中从血液中提取的金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,采用步骤S2.1中的特异性的PCR引物进行PCR扩增;/nS2.3、对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳及检测,扩增出长度为135bp的片段则判定为检测出金黄色葡萄球菌。/n
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