[发明专利]EGFR基因19号外显子缺失突变的快速荧光检测方法及应用有效

专利信息
申请号: 201910851694.2 申请日: 2019-09-10
公开(公告)号: CN110511984B 公开(公告)日: 2021-08-24
发明(设计)人: 赵美萍;杨子煜;陈维;吴曈勃 申请(专利权)人: 北京大学
主分类号: C12Q1/6858 分类号: C12Q1/6858;C12N15/11
代理公司: 北京万象新悦知识产权代理有限公司 11360 代理人: 李稚婷
地址: 100871*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种EGFR基因19号外显子缺失突变的快速荧光检测方法及应用。本发明方法利用Lambda核酸外切酶既可以快速水解DNA双链中5’末端为两个碱基的突出结构且标记有荧光基团的单链,又可以连续水解双链DNA中具有5’磷酸化末端DNA单链的性质,将突变碱基识别、PCR产物单链化和荧光信号放大过程合并完成,极大地简化了整个检测流程,减少了检测时间,相对检出限低至0.01%,灵敏度高,在临床诊断、靶向用药指导和术后伴随检测等方面具有很好的应用前景。
搜索关键词: egfr 基因 19 号外 缺失 突变 快速 荧光 检测 方法 应用
【主权项】:
1.一种用于检测EGFR基因19号外显子缺失突变的探针,该探针为DNA单链,长度为12~15nt;EGFR基因19号外显子的缺失区域对应于该探针距5’末端的第5位和第6位碱基之间,或者第4位和第5位之间;且该探针5’末端的第1位和第2位碱基是错配的,使得探针与待检测的突变链形成5’末端两个碱基突出、其它碱基完全匹配的双链DNA;在探针的两端分别标记有荧光基团和猝灭基团。/n
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