[发明专利]一种牙髓干细胞制备方法有效
| 申请号： | 201910606448.0 | 申请日： | 2019-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN110468098A | 公开（公告）日： | 2019-11-19 |
| 发明（设计）人： | 张彦茹;黄宇;唐雯 | 申请（专利权）人： | 北京中瑞联合生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 11210 北京纽乐康知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 刘艳艳<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 100096 北京市昌平区回*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种牙髓干细胞制备方法,包括如下步骤：牙髓的运输，取乳牙放入取样瓶中，把取样瓶及医用冰袋放回运输箱中运回实验室；牙髓干细胞的分离，用镊子夹住牙齿冠部，再用注射器吸取生理盐水从牙根断面向里吹打牙髓腔，冲洗松动牙髓；使用拔髓针取出牙髓；牙髓干细胞的扩增培养，取完全培养基，重悬牙髓沉淀，并转移到12孔板中；用一个拔髓针固定牙髓，用另一个拔髓针上的倒钩剥离牙髓，使牙髓形成细小碎片，释放其中的细胞，然后培养。该制备方法使用拔髓针对凝聚的牙髓进行剥离,释放其中的干细胞，避免使用胶原酶酶等对牙髓干细胞的损伤，可以排除消化过程对牙髓干细胞的损伤，使牙髓干细胞提取成功率达到100%，应用简单方便。 | ||
| 搜索关键词： | 牙髓 牙髓干细胞 拔髓针 取样瓶 制备 损伤 剥离 牙根 完全培养基 方法使用 扩增培养 生理盐水 细小碎片 医用冰袋 释放 干细胞 胶原酶 镊子夹 牙髓腔 运输箱 吹打 注射器 倒钩 放入 冠部 孔板 重悬 成功率 冲洗 松动 沉淀 牙齿 取出 细胞 消化 凝聚 应用 运输 | ||
【主权项】：
1.一种牙髓干细胞制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/n（1）牙髓的运输，把牙髓干细胞的运输箱交于供者，供者接收到运输箱后，把运输箱中的取样瓶放至冷藏冰箱，医用冰袋放至冷冻冰箱，供者乳牙自行脱落后，采取乳牙放入取样瓶中，把取样瓶及医用冰袋放回运输箱中，24小时内运回实验室；/n（2）牙髓干细胞的分离，把乳牙从取样瓶取出，用生理盐水清洗乳牙后，用镊子夹住牙齿冠部，再用注射器吸取生理盐水从牙根断面向里吹打牙髓腔，冲洗松动牙髓；使用拔髓针从牙根断处插入牙髓腔中，慢慢拧动，向外轻拉，取出牙髓，放至离心管中，用注射器重新吸取生理盐水，冲洗牙髓腔一次，收集两次冲洗牙髓腔的生理盐水加入放置牙髓的离心管中，离心去除生理盐水，收集牙髓；/n（3）牙髓干细胞的扩增培养，取完全培养基，重悬牙髓沉淀，并转移到12孔板中；用一个拔髓针固定牙髓，用另一个拔髓针上的倒钩剥离牙髓，使牙髓形成细小碎片，释放其中的细胞，然后放在37℃、5％ CO2、饱和湿度条件下培养。/n
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- 本申请提供了一种人源间充质干细胞库的构建方法，包括以下步骤：对脐带组织进行分离纯化，得到脐带间充质干细胞；对胎盘组织进行分离纯化，得到胎盘间充质干细胞；将所述脐带间充质干细胞和胎盘间充质干细胞进行扩增、冻存和/或鉴定。本申请人源间充质干细胞库的构建方法能够建立起具有丰富间充质干细胞来源的人源间充质干细胞库，并且能够实现间充质干细胞大规模培养，为间充质干细胞的临床应用提供充足保障。
- 犬科动物骨髓间充质干细胞的培养方法-201910919472.X
- 曹力;马海蓉;沙力塔娜提·乌尔曼别克;穆文博;李亦丞;谢祯子 - 新疆医科大学第一附属医院
- 2019-09-26 - 2019-12-20 - C12N5/0775
- 本发明涉及骨髓间充质干细胞培养技术领域，是一种犬科动物骨髓间充质干细胞的培养方法，其通过将采集到的犬骨髓血直接培养等过程获得骨髓充质干细胞。本发明对培养骨髓充质干细胞的步骤进行了简化，一方面，骨髓血细胞不需经过前处理包括过滤、离心及去除脂肪细胞，其优势在于更好地保持犬骨髓原有的微环境，免受外界干扰，使所包含的基质细胞、细胞外基质成分及所分泌的分泌因子为间充质干细胞生长提供全面的营养环境；另一方面，该方法仅需要简单的培养基选择贴壁BMSCs，不需要用流式细胞或免疫分选技术分离造血干细胞；同时采用本方法的培养的骨髓间充质干细胞传代周期短，产率高。
- 培养基及其用途与诱导多能干细胞向间充质干细胞转化的方法-201710533055.2
- 黄燕飞;车七石;赵澎;刘少辉 - 广州润虹医药科技股份有限公司
- 2017-07-03 - 2019-12-20 - C12N5/0775
- 本发明涉及干细胞及基因工程技术领域，尤其涉及培养基及其用途与间充质干细胞的制备方法。本发明提供了培养基以及使用该培养基诱导尿液细胞成为间充质干细胞的方法，尿液细胞来源广泛，不受伦理限制，采用本发明提供的方法，尿液细胞形成IPS细胞后经诱导形成间充质干细胞。全部诱导能够在12～15天内完成，所获得的细胞经检测符合间充质干细胞的特性，数量较大，活率较高。
- 一种脐带间充质干细胞的分离培养方法-201910881502.2
- 张鹏成 - 安徽科门生物科技有限公司
- 2019-09-18 - 2019-12-17 - C12N5/0775
- 本发明公开了一种脐带间充质干细胞的分离培养方法，包括以下步骤:S1、采集脐带，剔除血管后清洗干净，获得脐带基质；S2、将脐带基质剪成小块，加入胶原蛋白酶液消化15‑20min，然后终止消化；S3、离心，弃去上清液，向残留的组织块中加入组织块处理液，处理3‑5min后再次离心，弃去上清液，获得待培养组织块；S4、将待培养组织块进行接种培养，待细胞达到80‑90％融合度时去除组织块，消化、传代，得到脐带间充质干细胞。本发明既能缩短脐带间充质干细胞的提取时间，又能减少细胞的老化、损伤，使获得的细胞具有较高的增殖活性，有利于脐带间充质干细胞在体外的快速扩增。
- 专利分类
