[发明专利]抗广谱HPV-L1、E6/E7-IgY及其小分子抗体以及应用

摘要

本发明公开一种抗广谱或多价HPV‑L1、E6/E7‑IgY及其小分子抗体和制备方法、组合物及应用。本发明采用基因重组技术制备预防性抗广谱HPV‑L1‑IgY和治疗性抗广谱或多价HPV‑E6/E7‑IgY及其小分子抗体，并将这种抗广谱或多价HPV小分子抗体长效化修饰以及偶联脂质体和细胞穿膜肽。本发明还提供一种抗广谱或多价HPV‑IgY及其小分子抗体和组合物制成的液晶微囊、凝胶、栓剂、乳膏剂、洗液、片剂、泡腾片、胶囊剂、软胶囊及注射剂，在防治人乳头瘤病毒(HPV)感染的药物、消毒产品、保健品和医疗器械中的应用，可解决预防绝大多数型号HPV感染和治疗受HPV感染之阳性患者使其“阳转阴”的难题。

主权项

1.一种抗广谱或多价HPV‑L1、E6/E7‑IgY及其小分子抗体，其特征在于，所述抗广谱或多价HPV‑L1、E6/E7‑IgY及其小分子抗体由如下方法制备得到：A、制备广谱或多价抗原，所述广谱抗原包括预防性广谱HPV‑L1/L2抗原和治疗性广谱或多价HPV‑E6/E7抗原，所述预防性广谱HPV‑L1/L2抗原包括融合蛋白病毒样颗粒抗原、HPV31‑L2偶联KLH多肽抗原、HPV16‑L2或HPV18‑L2偶联KLH多肽抗原、L1/L2嵌合体假病毒VLP抗原、高危型HPVL1蛋白共同抗原合成表位多肽抗原；所述治疗性广谱或多价HPV‑E6/E7抗原包括E6/E7融合基因真核表达蛋白抗原、E6/E7融合基因重组病毒抗原、E6/E7蛋白共同抗原合成表位多肽抗原；所述预防性广谱HPV‑L1/L2抗原和治疗性广谱或多价HPV‑E6/E7抗原还包括优选组合方式制作涵盖15种高危型HPV病毒的多价抗原；B、制备免疫蛋：每隔两周对产蛋鸡注射一次上述步骤制得的广谱抗原，注射3次，第一次免疫20天后，分别检取产蛋鸡所产免疫蛋，并进行编码标记，得到抗广谱HPV‑L1、E6/E7‑IgY免疫蛋；C、制备抗广谱或多价HPV‑L1、E6/E7‑IgY粗提物；D、制备抗广谱或多价HPV‑L1、E6/E7‑IgY纯品溶液或干粉；E、制备抗广谱或多价HPV‑L1、E6/E7小分子抗体Fab：将抗广谱或多价HPV‑L1、E6/E7‑IgY纯品溶液调节pH至3.0‑5.0，加入催化蛋白质酶；充分搅拌溶解，产生酶促反应，然后低温高速旋转离心，弃去沉淀得上清液，对上清液进行超滤，得到浓缩液；再将超滤后所获浓缩液进行凝胶层析，将层析收集物透析浓缩，得到抗广谱或多价HPV‑L1、E6/E7小分子抗体Fab。