[发明专利]木聚糖酶基因、重组质粒、重组菌株、木聚糖酶及其应用在审
| 申请号： | 201910307665.X | 申请日： | 2019-04-17 |
| 公开（公告）号： | CN110004127A | 公开（公告）日： | 2019-07-12 |
| 发明（设计）人： | 韩正刚;杨江科;上官芳 | 申请（专利权）人： | 武汉轻工大学;中国大洋矿产资源研究开发协会（中国大洋事务管理局） |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/70;C12P19/14;C12P19/04;C12P19/00;C12P19/12 |
| 代理公司： | 深圳市世纪恒程知识产权代理事务所 44287 | 代理人： | 胡海国 |
| 地址： | 430023 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开一种木聚糖酶基因、重组质粒、重组菌株、木聚糖酶及其应用，涉及基因工程技术领域。所述木聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；所述木聚糖酶基因mbXynSPP2的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述重组质粒携带所述木聚糖酶基因mbXynSPP2；所述重组菌株包含所述木聚糖酶基因mbXynSPP2。本发明提供的木聚糖酶水解木聚糖的产物几乎不含有木糖单糖(水解产物为3～4个残基的木聚寡糖)，缩短了木聚寡糖制备中的纯化分离步骤，极大地提高了木聚寡糖的产率和制备效率，因此，可以将该木聚糖酶应用到益生素木聚寡糖的制备，同时本发明提供的木聚糖酶在低温下具有高活性，且耐盐性良好，可适用于高盐环境，拓展了其应用范围。 | ||
| 搜索关键词： | 木聚糖酶 木聚糖酶基因 木聚寡糖 重组菌株 重组质粒 制备 应用 基因工程技术 木聚糖酶水解 氨基酸序列 核苷酸序列 聚糖酶基因 纯化分离 高盐环境 水解产物 高活性 木聚糖 耐盐性 益生素 残基 产率 单糖 木糖 种木 携带 拓展 | ||
【主权项】：
1.一种木聚糖酶，其特征在于，所述木聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
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- 易犁;张发英;何华华;喻婵 - 湖北大学
- 2019-04-01 - 2019-05-31 - C12N9/24
- 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种在大肠杆菌中进行木聚糖酶分泌表达的新方法，将信号肽融合于木聚糖酶基因的N末端，同时木聚糖酶基因序列的C端添加编码组氨酸标签的密码子，PCR产物回收得到目的基因核苷酸序列Signal peptide‑Xylnase‑6×His，将目的基因克隆表达载体pET28a中，测序确认得到正确的重组表达载体；将重组表达载体转化至大肠杆菌菌株；向样品中添加IPTG，样品诱导培养；实现木聚糖酶的高效分泌表达。本发明能够将木聚糖酶直接分泌到培养基中；相比于原来的大肠杆菌胞内和或者酵母分泌表达，既能保证高的木聚糖酶活性，同时更容易操作，更省时，且成本更低。
- 一种喷雾干燥法制备碱性木聚糖酶制剂的方法-201711152090.6
- 问清江;慕娟;孙晓宇 - 问清江
- 2017-11-19 - 2019-05-28 - C12N9/24
- 本发明涉及微生物发酵及酶制剂技术领域，具体涉及一种麸皮发酵结合喷雾干燥制备碱性木聚糖酶制剂的方法。其使用麸皮发酵，麸皮经短小芽孢杆菌发酵产碱性木聚糖酶，发酵液的产酶活力2700IU/ml，在产酶活力方面得到很大改善；发酵液经喷雾干燥制备碱性木糖酶制剂，省去了硫酸铵盐析，大大降低了废液排放。使碱性木聚糖酶制备过程中的产酶活力提高四倍以上，大大提高生产效率，有利于技术的产业化。本发明采用的工艺步骤为1）发酵；2）酶制剂制备。
- 一种酸性外切多聚半乳糖醛酸酶及其基因和应用-201610405968.1
- 李学军;乔伟;张金伟;陈胜;夏平宇;赵邦红 - 北京盛拓达生物技术有限公司
- 2016-06-10 - 2019-05-28 - C12N9/24
- 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种酸性外切多聚半乳糖醛酸酶及其制备方法和应用。所述酸性外切多聚半乳糖醛酸酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。该酶最适pH为3.5、热稳定性好(最适温度70℃，在60、70℃中处理1h都能保持80％以上的酶活)，容易发酵生产。所有这些优点都意味着新发明的外切多聚半乳糖醛酸酶在饲料、食品行业中，将会比以前报道的外切多聚半乳糖醛酸酶更有应用价值。
- 木糖苷酶及其基因、重组载体、基因工程菌、制备方法和用途-201811602414.6
- 辛凤姣;孙丽超;王凤忠;黄颖;温博婷;姚雪妍 - 中国农业科学院农产品加工研究所
- 2018-12-26 - 2019-05-17 - C12N9/24
- 本发明公开了一种木糖苷酶，包括：木糖苷酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了木糖苷酶基因、木糖苷酶基因重组载体、木糖苷酶基因工程菌、木糖苷酶的制备方法和木糖苷酶的用途。本发明的木糖苷酶具有优良的耐高温性能，在70～90℃，pH为5.0～8.0之间均保持良好的活性，并能降解低聚木糖。
- 一种巴伦葛兹类芽孢杆菌壳聚糖酶的制备方法与应用-201910146270.6
- 杨绍青;江正强;马帅;闫巧娟;刘翊昊 - 中国农业大学
- 2019-02-27 - 2019-05-17 - C12N9/24
- 本发明公开了一种巴伦葛兹类芽孢杆菌壳聚糖酶的制备方法与应用。本发明提供了蛋白质，为以下1)、2)或3)所述的蛋白质：1)氨基酸序列是序列表中序列1所示的蛋白质；2)在序列表中序列1所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；3)将1)或2)所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的蛋白质。本发明的壳聚糖酶在枯草芽孢杆菌中成功表达，重组菌经高密度发酵胞外酶活力为1103.4U/mL，蛋白含量为4.7mg/mL。本发明所述壳聚糖酶产酶水平高，安全性好，且制备的壳聚糖酶酶学性质优良、水解效率高，因而在食品、医药、饲料等行业具有重要的应用价值。
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