[发明专利]定量检测核酸的方法及表面等离子共振生物传感器

摘要

本公开涉及一种定量检测核酸的方法及表面等离子共振生物传感器。本公开的无标样定量检测核酸的方法基于表面等离子共振原理和分析物的扩散性与分析物绝对浓度之间的关系，实现了特异性定量检测核酸，克服了传统实时荧光定量PCR方法的耗时长、费用高、不能绝对定量且不可再生、不能实时监控的缺点，具有灵敏度高、特异性强、无需标记及可绝对定量等优点。整个样品分析过程包括结合、平衡/解离、再生三个过程，其中芯片的再生即分析物离开芯片表面探针的过程，该过程中芯片表面探针活性和结构不受影响，因此可实现传感器的重复利用。

主权项

1.一种定量检测核酸的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：S1，根据目标核酸的基因序列选取与所述目标核酸互补的单链DNA备选探针；S2，将所述备选探针以第一偶联量偶联于表面等离子共振生物传感器的传感芯片表面；S3，将含有已知浓度的所述目标核酸的溶液流经所述传感芯片并检测RU值响应信号，根据所述RU值响应信号计算得到质量控制参数QC_ratio；S4，当QC_ratio不满足可靠性条件时，改变所述备选探针的第一偶联量后再次进行步骤S3，并再次验证得到的QC_ratio是否满足所述可靠性条件；和/或重新选取与所述目标核酸互补的单链DNA备选探针后再次进行步骤S2和S3，并再次验证得到的QC_ratio是否满足所述可靠性条件；其中，所述第一偶联量为800～1200RU；所述可靠性条件包括：QC_ratio≥0.2；S5，重复步骤S4直至QC_ratio满足所述可靠性条件；S6，当QC_ratio满足所述可靠性条件时，所述备选探针作为检测探针以第二偶联量偶联于所述传感芯片表面；将含有待测物的待测液流经所述传感芯片并检测待测液的RU值响应信号；若未产生RU值响应信号，则所述待测物中不含有所述目标核酸；若产生RU值响应信号，则所述待测物中含有所述目标核酸，根据所述待测液的RU值响应信号计算得到所述待测液中的所述目标核酸的浓度，其中，所述第二偶联量为1400～2000RU。