[发明专利]一种促进拟茎点霉产生大量分生孢子的方法在审
| 申请号： | 201910207024.7 | 申请日： | 2019-03-18 |
| 公开（公告）号： | CN109868255A | 公开（公告）日： | 2019-06-11 |
| 发明（设计）人： | 叶建仁;陈飞飞;付欢欢;吴学连;朱明龙;方雪琦;薛飞扬 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学 |
| 主分类号： | C12N3/00 | 分类号： | C12N3/00;C12R1/645 |
| 代理公司： | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人： | 邱兴天 |
| 地址： | 210037 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种促进拟茎点霉产生大量分生孢子的方法，包括：1)采用PDA培养基在固体平板上活化拟茎点霉菌种，获得到菌丝体；2)采用打孔法取步骤1)的菌丝体接种于装有PDA培养基的培养皿中，置于黑暗培养箱培养；3)待拟茎点霉菌丝长满整个培养基，成白色，絮状后，转移至黑光灯下或黑暗培养条件下，继续培养，产生大量分生孢子，总分生孢子产量不小于1.0×1011个/皿。本发明的促进拟茎点霉产生大量分生孢子的方法，以塑料培养皿结合黑光处理条件，使得培养皿可见明显的孢子堆，平均孢子堆数量达到109个/皿，每个孢子堆所含孢子数平均达到5.613×109个，且产生了大量乙型孢子，可生长速率远远大于以往拟茎点霉的产孢子方法，具有很好的实用性。 | ||
| 搜索关键词： | 分生孢子 孢子 孢子堆 培养皿 黑暗培养 霉菌 絮状 菌丝体接种 塑料培养皿 固体平板 培养基 打孔法 黑光灯 菌丝体 活化 乙型 生长 | ||
【主权项】：
1.一种促进拟茎点霉产生大量分生孢子的方法，其特征在于，步骤如下：1)采用PDA培养基在固体平板上活化拟茎点霉菌种，获得到菌丝体；2)采用打孔法取步骤1)的菌丝体接种于装有PDA培养基的培养皿中，置于黑暗培养箱培养；3)待拟茎点霉菌丝长满整个培养基，成白色，絮状后，转移至黑光灯下或黑暗培养条件下，继续培养，产生大量分生孢子，总分生孢子产量不小于1.0×1011个/皿。
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- 2018-12-24 - 2019-02-19 - C12N3/00
- 本发明公开了一种基于流式细胞术超高通量分离酿酒酵母单倍体的方法，属于高通量筛选技术领域。本发明通过优化子囊孢子处理条件，得到了酿酒酵母孢子悬液的最佳制备条件。利用PI和FDA染料分别对孢子悬液中活性孢子和失活细胞进行染色，通过基于流式细胞仪分析染色样品，实现了对酿酒酵母孢子的活性区分及孢子的绝对计数。本发明确立了最优的孢子悬液制备条件，建立了基于流式细胞仪的超高通量酿酒酵母单倍体分离技术。
- 一种诱导三孢布拉氏霉老化菌株快速大量产孢的方法-201510323248.6
- 陈贵才;侯保兵;聂月美;王丽 - 甘肃汇能生物工程有限公司
- 2015-06-15 - 2019-02-19 - C12N3/00
- 本发明涉及一种诱导三孢布拉氏霉老化菌株快速大量产孢的方法，包括如下步骤：(1)在培养皿中装入半固体培养基，将三孢布拉霉菌老化菌株的菌丝接种于半固体培养基中，在相对湿度为80‑95%、空气流量为0.5 L/min的黑暗环境中，先于25‑30℃下培养24‑48h，再于10‑20℃下培养12‑24 h，培养基平板上长出孢子或菌丝；(2)将所得孢子或菌丝收集划线于另一新半固体培养基平板上，在步骤(1)所述环境参数和时间下培养；(3)重复步骤(2)所述操作，培养1‑5代菌丝，挑取或收集孢子，即可得到大量孢子。本发明所述的方法产孢量多、产孢速度快，有效解决了三孢布拉霉菌（尤其是负菌）培养过程中不产或少产孢子的问题。
- 一种新型隐球菌体外培养荚膜的方法的制作工艺-201811080621.X
- 李京培;李群;李恺悦;许方玮;牛瑞琪;桂思语;陈一铭;尤宇星 - 安徽医科大学
- 2018-09-17 - 2018-12-28 - C12N3/00
- 本发明公开了一种新型隐球菌体外培养荚膜的方法的制作工艺，属于医学实验教学示教用品的制作工艺领域，利用体外培养结合促生长液的方式将新型隐球菌体外培养并形成厚壁荚膜，破了传统新型隐球菌要在小鼠或人体机体体内培养形成厚壁荚膜和不易保藏的特点。
- 一种异宗结合蕈菌多孢子分离方法-201810934247.9
- 肖文智 - 西安圣鑫生物科技有限公司
- 2018-08-16 - 2018-12-11 - C12N3/00
- 本发明涉及食药用真菌的菌种分离、选育方法，具体为一种异宗结合蕈菌多孢子分离方法，主要以复等位基因理论为基础，通过从多丛菇丛选择的多只菇体获得多块种菇块，通过培养获得多个孢子印，再通过孢子液移接培养形成菌落，经过两次纯化后获得纯培养物，本发明的整个分离操作周期短，获得的单核菌丝的交配亲和率高，大量的节约了培养基材料、试管及制作成本和时间，极大的提高了效率。
- 一种分离马铃薯晚疫病菌单个卵孢子的方法-201810763102.7
- 沈林林;詹家绥;祝雯;周世豪;蔡铭铭 - 福建农林大学
- 2018-07-12 - 2018-11-23 - C12N3/00
- 本发明提供一种分离马铃薯晚疫病菌单个卵孢子的方法，利用一定浓度的崩溃酶在适宜的温度下使菌丝与卵孢子分离，再通过多次低速离心的方法去除多余菌丝和孢囊孢子等，最后再将卵孢子悬浮液涂板于水琼脂上，在光学显微镜下观察并利用刀片进行分离单个卵孢子。该方法也适用于卵孢子产生较少的菌株，而且成功率较高，大大节省了操作时间，同时操作难度也大大降低，是病原群体研究试验中快速、大批量分离单个卵孢子的一种行之有效的方法。该方法成功地用于马铃薯晚疫病菌群体遗传试验研究。
- 一种林木病害病原菌物孢子接收装置-201810558556.0
- 杨春琳;许秀兰;刘应高 - 四川农业大学
- 2018-06-01 - 2018-11-02 - C12N3/00
- 本发明属于生物样本采集技术领域，公开了一种林木病害病原菌物孢子接收装置，设置有把手、顶部塑料板、粘性薄板结构、进口、出口、隔板、底部封口板、底部收集腔、握把、吸风机；把手位于顶部塑料板左侧，顶部塑料板将接收装置封顶；粘性薄板结构固定于顶部塑料板；隔板位于接收器腔体，挡住进口的气体；进口位于接收器右侧中下端，出口位于接收器右侧上端；底部收集腔呈倒置梯形，底部封口板安装在底部收集腔底部；握把位于接收器左侧。本发明旨在气体经隔板减速，减速进入上部，部分孢子由重力作用沉入底部收集腔，上部气体经粘性薄板结构接收孢子，经过多层薄板拦截，大部分孢子被过滤出来，滞留在粘性薄板结构中或沉降下来。
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