[发明专利]一种血浆cfDNA全局性甲基化检测方法及应用在审
| 申请号： | 201910180935.5 | 申请日： | 2019-03-11 |
| 公开（公告）号： | CN109825559A | 公开（公告）日： | 2019-05-31 |
| 发明（设计）人： | 康亚妮;赵小东;徐伟;毛湛睿;秦玉兰 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人： | 郑立 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种血浆cfDNA全局性甲基化检测方法及应用，涉及生物检测技术领域，其中，所述血浆cfDNA全局性甲基化检测方法为在从血浆中提取出的少量cfDNA中补加甲基化且含有生物素标记的外源DNA(λDNA)，然后进行富集甲基化实验，将收集的产物通过PCR扩增后，再基于生物素‑链霉亲和素反应、采用链霉亲和素磁珠去除带有生物素标记的λDNA，得到cfDNA扩增文库，并进行高通量测序。本发明适用于少量的血浆cfDNA甲基化分析，无需特定地商品化试剂盒，操作简便高效，减少了样品的损失、提高了建库效率、且极大地提高了MeDIP等富集甲基化实验方法地检测灵敏性，具有较广泛的适用性。 | ||
| 搜索关键词： | 血浆 甲基化检测 甲基化 生物素标记 富集 链霉亲和素磁珠 商品化试剂盒 生物检测技术 高通量测序 甲基化分析 链霉亲和素 检测灵敏 外源DNA 生物素 补加 建库 扩增 去除 文库 应用 | ||
【主权项】：
1.一种血浆cfDNA全局性甲基化检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1、从血浆中提取出cfDNA；步骤2、在所述步骤1中得到的所述cfDNA中补加甲基化且含有生物素标记的λDNA；步骤3、进行富集甲基化实验，并将收集的产物通过PCR扩增后，基于生物素‑链霉亲和素反应、采用链霉亲和素磁珠去除所述产物中带有生物素标记的λDNA，得到cfDNA扩增文库；步骤4、将所述步骤3得到的所述cfDNA扩增文库进行高通量测序。
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