[发明专利]用于鉴别变异型PEDV和TGEV的检测引物和探针在审
申请号: | 201910097009.1 | 申请日: | 2019-01-31 |
公开(公告)号: | CN109554508A | 公开(公告)日: | 2019-04-02 |
发明(设计)人: | 陈秋勇;周伦江;王隆柏;陈如敬;吴学敏;车勇良;侯博;王晨燕 | 申请(专利权)人: | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350013 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明属于动物传染病学检测领域,本发明提供一组用于鉴别变异型PEDV和TGEV的实时荧光定量PCR检测引物和探针。根据变异型猪流行性腹泻病毒N基因,设计一对检测引物和探针,所述引物序列如SEQ ID NO.1‑3所示;根据猪传染性胃肠炎病毒S基因,设计一对检测引物和探针,所述引物序列如SEQ ID NO.4‑6所示。根据所述引物和探针建立一种可以快速鉴别变异型PEDV和TGEV的实时荧光定量PCR方法。该方法与其他常见猪源病原体不发生非特异性的反应。本发明的方法可在短时间内快速鉴别诊断,省时省力省成本,同时具有特异性强,稳定性好,灵敏度高的特点,特别适合于临床上混合感染样品中的鉴别诊断。 | ||
搜索关键词: | 探针 检测引物 变异型 实时荧光定量PCR 快速鉴别 引物序列 鉴别 猪传染性胃肠炎病毒 猪流行性腹泻病毒 动物传染病 非特异性 混合感染 检测领域 鉴别诊断 特异性强 病原体 灵敏度 省成本 省力 省时 引物 猪源 诊断 | ||
【主权项】:
1.一组用于鉴别变异型PEDV和TGEV的实时荧光定量PCR检测引物和探针,其特征在于:所述引物和探针序列如下:用于检测变异型PEDV的N基因:上游引物PEDV‑F(5'‑ 3'):CTCCCGAGTGTAGTTGAGATTG,下游引物PEDV‑R(5'‑ 3'):CTCCACGACCCTGGTTATTT,荧光探针PEDV‑P(5'‑ 3'):FAM–CAACCCAACACACCTCCTACTTCACG‑BHQ1;用于检测TGEV的S基因:上游引物TGEV‑F(5'‑ 3'):TGAGGGTGCTGGCTTTGAT,下游引物TGEV‑R(5'‑ 3'):CAAGAGTGACACCACCCGTT,荧光探针TGEV‑P(5'‑ 3'):VIC‑CACTGTGGCACCCTTACCTGATTGT‑BHQ1;其中,变异型PEDV的荧光探针PEDV‑P的5’端标记有荧光报告基团FAM,TGEV的荧光探针TGEV‑P的5’端标记有荧光报告基团VIC;变异型PEDV的荧光探针PEDV‑P的3’端和TGEV的荧光探针TGEV‑P的3’端均标记淬灭基团BHQ1。
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