[发明专利]一种人胎盘组织源造血干细胞的快速分离、制备方法在审
申请号: | 201910019507.4 | 申请日: | 2019-01-09 |
公开(公告)号: | CN109652372A | 公开(公告)日: | 2019-04-19 |
发明(设计)人: | 伊永利;聂苏秦;朱艳丽;袁欣;张博 | 申请(专利权)人: | 陕西九州细胞基因工程有限公司 |
主分类号: | C12N5/0789 | 分类号: | C12N5/0789;A01N1/02 |
代理公司: | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人: | 吴甘棠 |
地址: | 710000 陕西省西安*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种人胎盘组织源造血干细胞的快速分离、制备方法,所述方法是将孕妇分娩后的胎盘经过预处理,然后去除多余组织,再经多种消化酶联合消化、细胞过滤和分离富集得到人胎盘组织源造血干细胞。与现有技术相比,本发明的有益效果是,一方面通过采用多种消化酶联合消化,使得本发明方法得到的细胞数较多,所得细胞中造血干细胞(CD34+细胞)含量较脐血高3‑5倍,对细胞活性损伤较小,而且能够快速的得到造血干细胞;另一方面本发明组织处理过程简单方便,污染率低。 | ||
搜索关键词: | 造血干细胞 人胎盘组织 快速分离 消化酶 制备 预处理 生物技术领域 组织处理过程 消化 细胞 分离富集 细胞过滤 细胞活性 污染率 细胞数 脐血 胎盘 去除 分娩 孕妇 损伤 联合 | ||
【主权项】:
1.一种人胎盘组织源造血干细胞的快速分离、制备方法,其特征在于,所述方法是一种将孕妇分娩后的胎盘经过预处理,然后去除多余组织,再经多种消化酶联合消化、细胞过滤和分离富集得到人胎盘组织源造血干细胞的方法。
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- 本发明提供一种自体脂肪干细胞共培养促进外周血造血干细胞增殖方法,包括:取人脂肪间充质干细胞经过原代分离培养和传代培养后,进行无血清化,获得多代培养的无血清培养液和多代培养的传代干细胞;合并多代培养的传代干细胞,离心收集得到干细胞上清液;并且,合并所述多代培养的无血清培养液,得到合并培养液;将所述合并培养液和所述细胞上清液混合,再与无血清培养液混合,作为外周血干细胞培养基进行培养,以进行自体脂肪干细胞共培养促进外周血造血干细胞增殖。本发明通过自身的脂肪干细胞代替异基因外周血造血干细胞,作为自身造血干细胞的稳定的来源,方法简单,费用低,大大提高了造血干细胞总数,从而满足了临床的需求。
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- 安徽 - 安徽
- 2018-06-22 - 2018-11-30 - C12N5/0789
- 本发明公开了一种人体研究用造血干细胞的制备和提取方法,其特征在于,包括以下步骤:干细胞分离器将其中的造血干细胞分离出来,其余的血液又从另一根静脉留置针流回到人体的体内,在无菌室中,将干细胞分离器中的干细胞取出,使用浓度为0.1%的胶原酶Ⅱ处理,控制胶原酶Ⅱ的温度在人体生存的最适温度36℃‑37℃,胶原酶Ⅱ酶解造血干细胞之外的其他组织,本发明涉及造血干细胞技术领域。该人体研究用造血干细胞的制备和提取方法,达到了减少研究操作步骤,从而减小干细胞在以往繁杂的操作总失活的现象,便于研究干细胞分化方向,观察干细胞时可实现万向调节视野,并且便于干细胞导入放射性同位素的目的。
- 细胞培养基及其制备方法和应用-201510309105.X
- 张竞方;秦小平 - 张竞方
- 2015-06-05 - 2018-11-16 - C12N5/0789
- 本发明公开了一种细胞培养基及其制备方法和应用,所述细胞培养基含有DMEM培养基、F12培养基、硒酸钠、碳酸氢钠、维生素C、胰岛素、血管内皮生长因子、表皮生长因子和成纤维细胞生长因子。该细胞培养基未含有动物源成分,并且该培养基能够为培养细胞提供足够的营养物质和稳定的生存环境,同时该细胞培养基的制备方法步骤简单、原料易得;另外,该细胞培养基能够有效地将血管内皮细胞祖细胞诱导分化为血管内皮细胞。
- 胎肝窦内皮细胞株在造血干细胞扩增和分化中的应用-201810288645.8
- 裴雪涛;裴海云;岳文;李慧琳;王思涵;谢小燕;韩毅;白云;范增;张博文;南雪;何丽娟 - 华南生物医药研究院
- 2018-04-03 - 2018-10-19 - C12N5/0789
- 本发明提出了胎肝窦内皮细胞在构建造血干细胞微环境中的用途。胎肝窦内皮细胞能够为造血干细胞构建微环境,支持造血干细胞的体外扩增,以及促进多潜能干细胞向HSCs分化或直接重编程体细胞获得HSCs。
- 一种胎盘造血干细胞的制备方法-201510167320.0
- 葛啸虎;陈海佳;王一飞;卢瑞珊;戴国胜;马岩岩 - 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
- 2015-04-09 - 2018-09-21 - C12N5/0789
- 本发明涉及生物技术领域,公开了一种胎盘造血干细胞的制备方法。该方法用灌洗液灌注清洗预处理后的胎盘;将酶解液从胎盘动脉灌注至胎盘静脉流出酶解液停止并结扎胎盘动静脉静置;松开胎盘动静脉并从动脉灌注灌洗液,从静脉处收集全部液体,离心取细胞沉淀,然后依次经羟乙基淀粉法和红细胞裂解法回收纯化包含造血干细胞的单个核细胞,重悬后获得所述胎盘造血干细胞。本发明改善酶解灌注法工艺,选择多种相互适宜的组分组成新型酶解液应用于胎盘造血干细胞制备过程中,不仅能够动员胎盘内部的造血干细胞并在短时间内迅速进入血液循环系统,而且同时提高了包含造血干细胞的单个核细胞数量及其活细胞数量以及CD34阳性细胞数量。
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