[发明专利]一种pH稳定性提高的转氨酶突变体在审
申请号: | 201811576746.1 | 申请日: | 2018-12-23 |
公开(公告)号: | CN109486787A | 公开(公告)日: | 2019-03-19 |
发明(设计)人: | 张小飞;竺伟 | 申请(专利权)人: | 尚科生物医药(上海)有限公司 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 201318 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种pH稳定性提高的转氨酶突变体,属于蛋白质工程技术领域。通过对转氨酶晶体结构的分析,对活性口袋上方loop区域的高柔性残基(R131,P132,E133)进行饱和突变进化,在高通量的筛选下,获得三个突变体(R131A,R131C和R131D),所对应的突变体氨基酸序列依次为SEQ NO.2,SEQ NO.3和SEQ NO.4。本发明所述的pH稳定性提高的转氨酶突变体能够在pH 9.5的条件下,保持高催化活性,进一步提高转氨酶在手性胺类医药中间体的工业化应用潜力。 | ||
搜索关键词: | 转氨酶 突变体 蛋白质工程技术 氨基酸序列 高催化活性 工业化应用 医药中间体 活性口袋 晶体结构 手性胺类 高柔性 高通量 残基 突变 饱和 进化 筛选 分析 | ||
【主权项】:
1.一种pH稳定性提高的转氨酶突变体,其特征在于,所述转氨酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO.1所编码的氨基酸序列发生突变的氨基酸序列,所述发生突变的氨基酸序列的突变位点为第131位的精氨酸突变为丙氨酸、蛋氨酸、天冬氨酸。
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