[发明专利]一种产β-羟基-β-甲基丁酸工程菌的构建方法有效

专利信息
申请号: 201811273509.8 申请日: 2018-10-30
公开(公告)号: CN109251940B 公开(公告)日: 2020-10-16
发明(设计)人: 范文超;高书良;王金刚;梁岩;袁圣伦;任亮 申请(专利权)人: 浙江华睿生物技术有限公司
主分类号: C12N15/90 分类号: C12N15/90;C12N9/22;C12N1/19;C12P7/42;C12R1/645
代理公司: 上海申浩律师事务所 31280 代理人: 贾师英
地址: 313000 浙江省湖州*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了一种产β‑羟基‑β‑甲基丁酸工程菌的构建方法,包括下述步骤:以解脂耶氏酵母为底盘细胞,对其基因组中参与脂肪酸降解代谢的pox2、pox3、hbd、hcd和faa1共5个基因进行中断失活处理,得到基因剪切菌株;将黏细菌来源的LiuC、AibA和AibB基因、以及大肠杆菌来源的TesB基因整合入所述基因剪切菌株的基因组,得到产β‑羟基‑β‑甲基丁酸的工程菌。本发明构建的工程菌能够以葡萄糖为碳源发酵合成目标产物HMB,产量最高可达10g/L。
搜索关键词: 一种 羟基 甲基 丁酸 工程 构建 方法
【主权项】:
1.一种产β‑羟基‑β‑甲基丁酸工程菌的构建方法,包括下述步骤:1)以解脂耶氏酵母为底盘细胞,对其基因组中参与脂肪酸降解代谢的pox2、pox3、hbd、hcd和faa1共5个基因进行中断失活处理,得到基因剪切菌株;2)将黏细菌来源的LiuC、AibA和AibB基因、以及大肠杆菌来源的TesB基因整合入步骤1)中得到的基因剪切菌株基因组;3)挑取阳性转化子,对基因组进行PCR验证,得到产β‑羟基‑β‑甲基丁酸的工程菌。
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