[发明专利]一种高虾青素产量的菌株及其应用在审
| 申请号： | 201811203892.X | 申请日： | 2018-10-16 |
| 公开（公告）号： | CN109207546A | 公开（公告）日： | 2019-01-15 |
| 发明（设计）人： | 陶正国;崔海滨;钱雨;陈小兵;周应芳;张东娟 | 申请（专利权）人： | 广州立达尔生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12P23/00 | 分类号： | C12P23/00;C12R1/645 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 谭英强 |
| 地址： | 510000 广东省广州市高新技术产业*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高虾青素产量的菌株，通过转基因技术将Adketo1(SEQ ID No.1)和Adketo2(SEQ ID No.2)连接到克隆载体上，得到表达载体；然后将表达载体通过电击转化转入目的菌株中；并通过使用复合酶抑制剂，采用多轮递推法对转化子进行筛选，得到目标菌株，并对发酵条件进行优化。发酵生产得到的虾青素为自由态，98％为右旋光结构，并以反式结构为主，动物吸收率可达98％，沉积效果好。本发明的方法能够提高微生物源天然虾青素的生产效率，优化生产工艺，降低生产成本，可用于实现微生物源天然虾青素的较大规模生产。 | ||
| 搜索关键词： | 虾青素 菌株 天然虾青素 表达载体 微生物源 吸收率 优化生产工艺 转基因技术 电击转化 发酵条件 反式结构 克隆载体 目标菌株 生产效率 复合酶 光结构 抑制剂 转化子 自由态 递推 多轮 可用 右旋 沉积 发酵 转入 筛选 应用 优化 生产 | ||
【主权项】：
1.一种高虾青素产量的菌株，其特征在于：构建方法包括以下步骤：1)通过转基因技术将Adketo1(SEQ ID No.1)和Adketo2(SEQ ID No.2)连接到克隆载体上，得到表达载体；2)将表达载体通过电击转化转入目的菌株中；3)使用复合酶抑制剂，采用多轮递推法对转化子进行筛选，得到目标菌株。
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- 本发明公开了一种通过提高红法夫酵母生物量合成虾青素及测定的方法，合成方法的具体步骤如下：步骤一、摇瓶种子培养：取一环斜面保存的红法夫酵母菌苔培养，得到一代摇瓶种子培养液，再将其扩大培养3～4代，获得摇瓶种子培养液；步骤二、车间种子培养：将摇瓶种子培养液接继续接种、培养，得到车间种子培养液；步骤三、发酵生产：将车间种子培养液继续接种、发酵且发酵培养基添加有番茄粉，得到发酵液。测定方法的具体过程如下：红法夫酵母生物量测定；虾青素含量测定；虾青素产量测定。本发明所提供的方法既提高了虾青素的产量，又节约了生产成本，非常适合工业化发酵生产天然虾青素。
- 一种红法夫酵母发酵生产虾青素的发酵培养基及方法-201810796004.3
- 李纪丰;石英杰;孙常明;陈今朝;赵佳;蒋海燕;足立胜 - 威海利达生物科技有限公司
- 2018-07-19 - 2018-11-27 - C12P23/00
- 本发明公开了一种红法夫酵母发酵生产虾青素的发酵培养基及方法，红法夫酵母发酵生产虾青素的发酵培养基，所述发酵培养基每1L水中，包括以下组分：葡萄糖80～140g、酵母浸粉5～8g、麦芽浸粉5～8g、蛋白胨6～10g、硫酸铵5～9g、硫酸镁0.5～2.5g、番茄粉10～30g和体积分数为0.2～0.5％的无水乙醇。本发明公开了一种利用红法夫酵母高产天然虾青素的培养基和方法，利用本法发酵所得的菌体生物量及虾青素含量高，虾青素的抗氧化能力强，为维E的550倍、β‑胡萝卜素的10倍。虾青素有增强免疫力、抑制肿瘤发生、清除体内自由基等多方面的生理作用，在保健品、医药、化妆品等方面具有广阔的应用前景。
- 一种可提高虾青素产量的红法夫酵母培养方法-201810795724.8
- 李纪丰;石英杰;孙常明;华晓曼;蒋海燕;足立胜 - 威海利达生物科技有限公司
- 2018-07-19 - 2018-11-23 - C12P23/00
- 本发明公开了一种可提高虾青素产量的红法夫酵母培养方法，其整体步骤为：步骤一、摇瓶种子培养；步骤二、摇瓶发酵培养，发酵培养过程置于全程有光或部分有光的光照条件下进行；步骤三、发酵罐培养，发酵罐培养的光照条件与步骤二相同或不同。本发明通过光照条件可显著提高红法夫酵母生产虾青素的产量，对于在工业上采用红法夫酵母高效生产天然虾青素具有重要的研究价值及良好的应用前景。
- 一种利用海洋红酵母高产类胡萝卜素和铜发酵培养方法-201510512641.X
- 王亚楠;程殿林;丛培江;孙梦洁;涂开;杨婷婷;刘敏 - 青岛大学
- 2015-08-17 - 2018-11-09 - C12P23/00
- 本发明提供一种利用海洋红酵母高产类胡萝卜素和铜发酵培养方法，包括如下：所述海洋红酵母WYN1在含铜培养基中发酵培养高效生产类胡萝卜素，发酵培养基组成为葡萄糖1％，酶解玉米粉1‑3％，蛋白胨2.5％，硫酸镁0.02％，磷酸二氢钾0.15％，铜含量150‑200mg/L，氯化钠20％，其余为水；初始pH为8，接种量3‑8％，摇床转速为50‑80r/min，24‑28℃培养10‑15小时后调整温度为16‑20℃进行低温静止培养，停止搅拌，pH调整为3‑5，保持2‑4小时；之后阶梯形升温到24‑30℃，pH调整为4.6‑5.5，按照2.5％的添加量添加蛋白胨，按照2％的量添加酵母粉；摇床转速为50‑100r/min，继续发酵10‑15h。
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