[发明专利]一种鉴别棕鳟和亚东鲑的分子生物学方法在审
| 申请号： | 201810990358.1 | 申请日： | 2018-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN109055516A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 杨天燕;孟玮;高天翔 | 申请（专利权）人： | 浙江海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12N15/70;C12Q1/6888 |
| 代理公司： | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人： | 吴秉中 |
| 地址： | 316000 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种鉴别棕鳟和亚东鲑的分子生物学方法，包括如下步骤：1)采用改良酚‑氯仿法分别提取棕鳟和亚东鲑组织的基因组DNA；2)设计ITS1序列的引物；3)以两种鱼的DNA为模板，进行PCR扩增；4)PCR产物用1％琼脂糖凝胶电泳检测，纯化回收后与pMD18‑T载体连接，转化至大肠杆菌DH5α，对每个个体挑取单克隆进行菌液测序；5)序列比对。有益效果为：本发明分子生物学方法科学有效、简单快捷、准确可行，特异性强、可信度高，不用处死棕鳟和亚东鲑，能够一次性对两种物种同时进行扩增，具有高效快速和便捷的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 大肠杆菌DH5 α 分子生物学 鉴别 琼脂糖凝胶电泳检测 基因组DNA 高效快速 特异性强 序列比对 可信度 氯仿法 一次性 测序 菌液 扩增 引物 改良 物种 回收 转化 | ||
【主权项】：
1.一种鉴别棕鳟和亚东鲑的分子生物学方法，其特征在于：包括如下步骤：1)采用改良酚‑氯仿法分别提取棕鳟和亚东鲑组织的基因组DNA；2)设计ITS1序列的引物；3)以两种鱼的DNA为模板，进行PCR扩增；4)PCR产物用1％琼脂糖凝胶电泳检测，纯化回收后与pMD18‑T载体连接，转化至大肠杆菌DH5α，对每个个体挑取单克隆进行菌液测序；5)序列比对。
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