[发明专利]一种稻瘟病抗性设施鉴定方法及其应用在审
| 申请号： | 201810960965.3 | 申请日： | 2018-08-22 |
| 公开（公告）号： | CN108977496A | 公开（公告）日： | 2018-12-11 |
| 发明（设计）人： | 田大刚;陈松彪;王宗华;王锋;陈在杰;陈子强;林艳 | 申请（专利权）人： | 福建省农业科学院生物技术研究所;福建农林大学 |
| 主分类号： | C12Q1/18 | 分类号： | C12Q1/18 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350001 福建省福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种水稻稻瘟病抗性设施鉴定方法，首先进行室外育苗，待苗长至3‑4叶期时，放入室内接种桶内，室内安装有加湿器、空调和光照系统，可对温度、湿度和光照进行严格控制。接种后严格遮光，于26℃~28℃保湿（RH=95%）培养24 h后；将密封薄膜和雨布去除，保存在室温25℃~30℃、RH>95%的高湿环境下培育，5‑7天后观察症状。这种室内抗性鉴定方法，既避免了鉴定季节的影响，又节约了人为和物力，并能真实的反应水稻品种的抗感性，试验结果可以为水稻品种抗性鉴定、抗性遗传分离等研究提供稳定可靠的实验保障。 | ||
| 搜索关键词： | 抗性鉴定 水稻品种 水稻稻瘟病抗性 雨布 稻瘟病抗性 高湿环境 光照系统 抗性遗传 密封薄膜 室内安装 加湿器 接种桶 保湿 叶期 遮光 去除 接种 光照 感性 室外 育苗 空调 室内 保存 节约 观察 培育 应用 研究 | ||
【主权项】：
1.一种稻瘟病抗性设施鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：1）接种室装备：人工气候室，满足稻瘟病发病和水稻生长的温度、湿度和光照的要求；2）接种菌的准备：根据试验要求选用所需生理小种的稻瘟病菌株，将带有纸片的稻瘟病菌株用燕麦培养基28℃暗培养活化3‑5天，切取1~3mm×1‑3mm的菌丝块，移至燕麦培养基上28℃暗培养，待菌落扩展至培养皿≥80%面积时，刮去菌丝，置于37℃光照培养箱中，按光：暗=12h:12h产孢3‑5天，用无菌水洗下子孢子，过滤、搅匀，加入0.025% Tween20，通过血球计数板计数，将悬浮液的孢子浓度调整为5×105个孢子／ml备用；3）将水稻种子在室温下用清水浸泡至露白，室温催芽12h后播种于育苗盘内，待秧苗长至三叶一心时，把生长良好的秧苗置于密封的接种桶中，桶内保水以保持湿度≥95%；按每100株苗喷30 ml孢子液，使用雾化喷头，对水稻材料进行喷洒接种稻瘟病菌，力求使整个接种桶呈均匀细雾；接种后立刻密封接种桶，并且严格遮光，于26℃ ~ 28℃，RH=95%培养24 h；4）将接种桶上的密封薄膜和雨布去除，保存在室温25℃~30℃、RH>95 %的高湿环境下培育，5‑7天后观察症状；病级调查参照标准： 0级：无病斑；1级：只有直径为0.5mm的褐色斑点；2级：有直径为0.5‑1mm的褐色病斑；3级：有直径为2mm的褐色眼状病斑，中央灰色，边缘褐色；4级：有长3‑4mm的灰色梭形病斑，边缘褐色；5级：病斑达到最大5mm，甚至多个病斑连片，叶枯死；出现暗绿色急性病斑或叶节瘟也属于这一类型。
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- 本发明涉及一种抗菌不锈钢抗真菌性能检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；美蓝染色后菌悬液活菌含量CB血球板计数及接种菌液CB标定；lgCB‑相对荧光强度对数值lgIB标曲建立；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IB测定及其活菌含量CB和TB推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的不锈钢抗真菌性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养24h/48h后对照样品和抗菌样品，测定回收液IB并以lgIB表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的抗菌不锈钢抗真菌性能检测的ATP生物荧光lgCB‑lgIB标曲法，将以先进检测技术支撑产品质量提升。
- ATP生物荧光lgCB-lgIB标曲法检测抗菌陶瓷抗细菌性能的方法-201910199712.3
- 李文杰;郝凌云;刘晓慧;郭凤柳;崔宗岩 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种抗菌陶瓷抗细菌性能的检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；OD值‑活菌含量对数值lgCB标曲建立及接种菌液CB标定；lgCB‑相对荧光强度对数值lgIB标曲建立；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IB测定及其活菌含量CB和TB推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的陶瓷抗细菌性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养24h后对照样品和抗菌样品，测定回收液IB并以lgIB表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的陶瓷抗细菌性能检测的ATP生物荧光lgCB‑lgIB标曲法，将以先进检测技术支撑产品质量提升和市场秩序规范。
- ATP生物荧光lgCB-lgIB标准曲线法检测抗菌塑料防霉性能的方法-201910199713.8
- 李文杰;张小东;冯金艳;艾连峰;郝凌云 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种抗菌塑料防霉性能的检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；OD值‑活菌含量对数值lgCB标曲建立及接种菌液CB标定；lgCB‑相对荧光强度对数值lgIB标准曲线建立；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IB测定及其活菌含量CB和TB推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的塑料防霉性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养48h后的对照样品和抗菌样品，测定回收液IB并以lgIB表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的抗菌塑料防霉性能检测的ATP生物荧光lgCB‑lgIB标准曲线法，将以科学先进的检测技术支撑产品质量提升。
- ATP生物荧光lgCB-lgIB标准曲线法检测抗菌皮革防霉性能的方法-201910199714.2
- 李文杰;靳慧达;连素梅;洪伟;崔宗岩 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种抗菌皮革防霉性能检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；OD值‑活菌含量对数值lgCB标曲建立及接种菌液CB标定；lgCB‑相对荧光强度对数值lgIB标准曲线建立；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IB测定及其活菌含量CB和TB推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的皮革防霉性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养48h后的对照样品和抗菌样品，测定回收液IB并以lgIB表征和计算R或A；同时提供结果评价依据。本发明研发的抗菌皮革防霉性能检测的ATP生物荧光lgCB‑lgIB标准曲线法，将以科学先进的检测技术支撑产品质量提升。
- ATP生物荧光lgCA-lgIA标准曲线法检测抗菌陶瓷抗真菌性能的方法-201910199715.7
- 李文杰;刘晓慧;郭凤柳;洪伟;郝凌云 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种抗菌陶瓷抗真菌性能检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；美蓝染色后菌悬液活菌含量CB血球板计数；ATP浓度对数值lgCA‑相对荧光强度对数值lgIA标曲建立及接种菌液活菌CA标定；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IA测定及活菌ATP浓度CA和TA推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的陶瓷抗真菌性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养24h/48h后对照样品和抗菌样品，测定其IA并以lgIA表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的陶瓷抗真菌性检测的ATP生物荧光lgCA‑lgIA标曲法，将以先进检测技术支撑产品质量提升。
- ATP生物荧光lgCB-lgIB标准曲线法检测抗菌橡胶防霉性能的方法-201910199716.1
- 李文杰;周波;贺鹏;孟祥振;郝凌云 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种抗菌橡胶防霉性能的检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；OD值‑活菌含量对数值lgCB标曲建立及接种菌液CB标定；lgCB‑相对荧光强度对数值lgIB标准曲线建立；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IB测定及其活菌含量CB和TB推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的橡胶防霉性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养48h后的对照样品和抗菌样品，测定回收液IB并以lgIB表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的抗菌橡胶防霉性能检测的ATP生物荧光lgCB‑lgIB标准曲线法，将以科学先进的检测技术支撑产品质量提升。
- ATP生物荧光lgCA-lgIA标准曲线法检测抗菌塑料抗细菌性能的方法-201910199717.6
- 李文杰;刘晓慧;杨宇龙;郭凤柳;曹彦强 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种抗菌塑料抗细菌性能检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；ATP浓度对数值lgCA‑相对荧光强度对数值lgIA标曲建立及接种菌液的活菌ATP浓度CA标定；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IA测定及其活菌ATP浓度CA和TA推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的塑料抗细菌性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养24h后的对照样品和抗菌样品，测定回收液IA并以lgIA表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的抗菌塑料抗细菌性能检测的ATP生物荧光lgCA‑lgIA标曲法，将以先进的检测技术支撑产品质量提升和市场秩序规范。
- ATP荧光lgCA-lgIA标曲法评价一次性卫生用品真菌杀灭效果的方法-201910199718.0
- 李文杰;靳慧达;娄巧哲;连素梅;崔宗岩 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种一次性卫生用品真菌杀灭效果评价方法，检测步骤包括：样品提取等要求；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；美蓝染色后菌悬液活菌含量CB血球板计数；ATP浓度对数值lgCA‑相对荧光强度对数值lgIA标曲建立及接种菌液活菌CA标定；中和剂鉴定及杀菌试验；回收液IA测定及CA推算；杀菌率R和灭菌指数A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的卫生用品真菌杀灭效果进行精准定量评价。本发明规定洗脱回收染菌不同时间后的对照样品和试验样品，测定回收液IA并以lgIA表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的一次性卫生用品真菌杀灭效果评价的ATP生物荧光lgCA‑lgIA标曲法，可完善相关评价方法体系。
- ATP生物荧光lgCB-lgIB标准曲线法检测家用电器抗细菌性能的方法-201910199720.8
- 李文杰;艾连峰;钱云开;郝凌云;郭凤柳 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种家用电器抗细菌性能检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；OD值‑活菌含量对数值lgCB标曲建立及接种菌液CB标定；lgCB‑相对荧光强度对数值lgIB标曲建立；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IB测定及其活菌含量CB和TB推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的家电抗细菌性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养24h后对照样品和抗菌样品，测定回收液IB并以lgIB表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的家用电器抗细菌性能检测的ATP生物荧光lgCB‑lgIB标准曲线法，将以科学先进的检测技术支撑产品质量提升。
- ATP生物荧光lgCA-lgIA标曲法评价液体消毒剂细菌杀灭效果的方法-201910199722.7
- 李文杰;崔宗岩;钱云开;闫冀焕;慈颖;宿雅彬 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种液体消毒剂细菌繁殖体杀灭效果评价方法，检测步骤包括：样品提取及最低有效浓度确定；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；ATP浓度对数值lgCA‑相对荧光强度对数值lgIA标曲建立及接种菌液活菌ATP浓度CA标定；中和剂鉴定及定量悬液试验；回收液IA测定及其活菌ATP浓度CA和TA推算；杀灭率R及灭菌指数A计算；结果判定；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的消毒剂细菌繁殖体杀灭效果进行精准定量评价。本发明规定回收作用不同时间后的试验样液和对照样液，测定其IA并以lgIA表征和计算R或A；提供结果判定依据。本发明研发的消毒剂细菌繁殖体杀灭效果评价的ATP生物荧光lgCA‑lgIA标曲法，可完善消毒效果评价方法体系。
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