[发明专利]利用SSR荧光测序技术鉴定酒花纯度的方法有效
| 申请号： | 201810931030.2 | 申请日： | 2018-08-15 |
| 公开（公告）号： | CN108977567B | 公开（公告）日： | 2020-08-04 |
| 发明（设计）人： | 尹花;董建军;余俊红;张志军;岳杰;陈嵘;贺扬;刘明丽;张磊 | 申请（专利权）人： | 青岛啤酒股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 青岛清泰联信知识产权代理有限公司 37256 | 代理人： | 李祺;张洁 |
| 地址： | 266000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提出一种利用SSR荧光测序技术鉴定酒花纯度的方法，属于生物技术领域，能够有效实现酒花混合物中青岛大花和麒麟丰绿的品种区分和纯度鉴定。该技术方案包括人工制备不同质量比例酒花样品，提取DNA；选择两个品种间的特异性引物进行PCR扩增和毛细管电泳分析；以酒花混合比例为横坐标，以酒花品种特异性片段峰面积的比值为纵坐标得到线性回归方程；利用线性回归方程进行酒花样品纯度计算等步骤。本发明能够应用于酒花混合物中青岛大花和麒麟丰绿的品种区分和纯度鉴定，最终实现青岛大花的纯度鉴定，在源头上保证集采酒花品种的真实性，从而为规避青岛大花中掺入麒麟丰绿提供可靠的鉴定手段。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 ssr 荧光 技术 鉴定 酒花 纯度 方法 | ||
【主权项】：
1.利用SSR荧光测序技术鉴定酒花纯度的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取青岛大花和麒麟丰绿以不同比例制备得到的酒花样品混合物的DNA；(2)选取4对SSR引物进行酒花品种鉴定，对提取样品DNA进行PCR扩增，所述4对引物中的正向引物5'端均用Alexa Fluor 750荧光染料进行标记，所述4对SSR引物序列如下：![]()
(3)毛细管电泳荧光检测；(4)数据分析和标准曲线构建；(5)基于构建的标准曲线，在测定酒花样品混合物时，将不同比例下的麒麟丰绿与青岛大花的峰面积比值代入方程，得出青岛大花的实际纯度。
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