[发明专利]一种用于痕量DNA的多重扩增建库方法及其专用试剂盒有效
| 申请号： | 201810840309.X | 申请日： | 2018-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN108929901B | 公开（公告）日： | 2022-02-01 |
| 发明（设计）人： | 王辉;黎一江;郭弘妍;邢婉丽;程京 | 申请（专利权）人： | 博奥生物集团有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;陈晓庆 |
| 地址： | 102206 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于痕量DNA的多重扩增建库方法及其专用试剂盒。本发明的多重扩增建库方法可以实现以痕量DNA甚至单细胞水平的DNA为模板进行多重扩增测序，且全部反应过程可在单管内实现。通过实验证明：本发明的建库方法在单细胞的水平上实现了多达207重的一管式扩增子扩增，且保真度高于现有的商品化试剂盒，不仅具有操作便捷、成本经济、测序质量高和灵敏度高的优点，而且还可以满足两个测序平台的测序需求。适用于高通量低频突变检测领域如ctDNA突变检测领域以及低起始量DNA的胚系突变检测领域如单细胞突变检测筛选。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 痕量 dna 多重 扩增 方法 及其 专用 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.一种用于痕量DNA的多重扩增建库试剂盒，其包括多重扩增体系、引物消化体系和接头连接体系；所述多重扩增体系包括DNA聚合酶、PCR缓冲体系和多重扩增引物；所述引物消化体系包括尿嘧啶‑DNA糖基化酶、尿嘧啶‑N‑糖化酶、核酸外切酶I、8‑氧化鸟嘌呤DNA糖基化酶和Klenow片段中至少一种；所述接头连接体系包括测序接头、T4DNA连接酶和DNA连接酶缓冲液。
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