[发明专利]一种利用无血清培养基生产PEDV灭活疫苗的方法

摘要

本发明涉及一种利用无血清培养基生产PEDV灭活疫苗的方法，所述无血清培养基由基础培养基，牛血清白蛋白，皮质醇，胰岛素，转铁蛋白，谷胱甘肽，胰蛋白酶，牛磺酸和亚硒酸钠组成，其中牛磺酸和亚硒酸钠的重量份配比比例为2‑3:1。该方法不添加动物血清，极大地降低了生产成本，提高了生产的经济效益，并且还避免了血清使用所带来的诸多问题。

主权项

1.一种利用无血清培养基生产PEDV灭活疫苗的方法，所述方法包括如下步骤：步骤（1），Vero细胞的复苏；步骤（2），Vero细胞的传代扩增；步骤（3），在Vero细胞上接种PEDV病毒毒株；步骤（4），收获感染细胞培养上清液，病毒液进行澄清过滤；步骤（5），灭活，即制备得到PEDV灭活疫苗；其中步骤（2）中的传代扩增和步骤（3）中病毒的增殖过程均采用所述无血清培养基；所述无血清培养基由基础培养基，牛血清白蛋白，皮质醇，胰岛素，转铁蛋白，谷胱甘肽，胰蛋白酶，牛磺酸和亚硒酸钠组成，其中牛磺酸和亚硒酸钠的重量份配比比例为2‑3:1；所述的无血清培养基中：所述的基础培养基IMDM或者是RPMI‑1640，或者是二者的混合物；所述的牛血清白蛋白的含量为8‑15mg/mL；所述的皮质醇的含量为15‑25μg/mL；所述的胰岛素的含量为10‑20μg/mL；所述的转铁蛋白的含量为10‑15μg/mL；所述的谷胱甘肽的含量为2‑3mM；所述的胰蛋白酶的含量为3‑5μg/mL；所述的牛磺酸的含量为20‑30μg/mL；所述的亚硒酸钠的含量为10‑12μg/mL。