[发明专利]一种乌头花叶病病原物分子鉴定方法及防治应用在审
| 申请号： | 201810558524.0 | 申请日： | 2018-06-01 |
| 公开（公告）号： | CN108504781A | 公开（公告）日： | 2018-09-07 |
| 发明（设计）人： | 侯大斌;余马;张洪;舒晓燕;唐志康;黄晶;何静;李玉婵 | 申请（专利权）人： | 西南科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 夏艳 |
| 地址： | 621010 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种乌头花叶病病原物分子鉴定方法及防治应用，采集表现出乌头花叶病症状的病样，截取病样的须根进行总RNA提取并去除基因组DNA；然后对所提取的总RNA进行逆转录，获取基因组cDNA；以获取的基因组cDNA为模板，以CMV cp‑F、CMV cp‑R为引物进行RT‑PCR扩增，对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测；若电泳检测结果中出现376bp长度的条带，则初步表明该病样的病原物为CMV亚组II成员中的CMV‑FZ。若测序结果与SEQ.ID.NO.1所示的序列相一致，则确定该病样的病原物为CMV‑FZ。该病毒在乌头中是全株感染，叶片出现深绿色与浅绿色相间的花叶病状，有的品种叶片上还出现深绿色的环纹。在顶部幼嫩叶片上症状最明显。本发明的鉴定方法有利于乌头花叶病的防治。 | ||
| 搜索关键词： | 乌头 病原物 花叶病 基因组cDNA 防治应用 分子鉴定 深绿色 病样 叶片 琼脂糖凝胶电泳检测 须根 电泳检测结果 基因组DNA 总RNA提取 扩增产物 幼嫩叶片 逆转录 浅绿色 总RNA 截取 测序 花叶 环纹 去除 全株 条带 亚组 引物 采集 病毒 感染 防治 表现 | ||
【主权项】：
1.一种乌头花叶病病原物分子鉴定方法，其特征在于，包括以下操作：1)采集表现出乌头花叶病症状的病样，截取病样的须根进行总RNA提取并去除基因组DNA；然后对所提取的总RNA进行逆转录，获取基因组cDNA；2)以获取的基因组cDNA为模板，以CMV cp‑F、CMV cp‑R为引物进行RT‑PCR扩增，对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测；所述的CMVcp‑F：5’‑ATGGACAAATCTGAATCAACCA‑3’；所述的CMVcp‑R：5’‑GACTGTCACCCACACGGTAGAAT‑3’；3)若电泳检测结果中出现376bp长度的条带，则初步表明该病样的病原物为CMV亚组II成员中的CMV‑FZ。
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