[发明专利]一种用于鉴定中药麝香的PCR方法有效
申请号: | 201810076314.8 | 申请日: | 2018-01-26 |
公开(公告)号: | CN108048544B | 公开(公告)日: | 2021-01-05 |
发明(设计)人: | 袁媛;蒋超;赵玉洋;周骏辉;黄璐琦 | 申请(专利权)人: | 中国中医科学院中药研究所 |
主分类号: | C12Q1/6869 | 分类号: | C12Q1/6869;C12Q1/6895;C12N15/11 |
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地址: | 100700 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于鉴定中药麝香的PCR方法。该方法包括:从待测中药样品中提取基因组DNA作为模板,采用引物对(SEQ ID No.1和SEQ ID No.2)进行PCR扩增;对所得PCR产物进行测序;将测序序列与标准序列进行比较,如果测序序列与所述标准序列完全一致或者仅有1个核苷酸的差异,则待测中药样品为麝香;或者以测序序列和标准序列构建NJ树,如果测序序列与标准序列在NJ树的同一个分枝上,则待测中药样品为麝香。本发明所建立的用于鉴定中药麝香的PCR方法快速、准确、科学性强且使用方便,对于确保药材市场中麝香的质量及其临床疗效具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 鉴定 中药 麝香 pcr 方法 | ||
【主权项】:
1.一种用于鉴定中药麝香的PCR方法,包括如下步骤:(a)从待测中药样品中提取基因组DNA作为模板,采用引物对进行PCR扩增,得到PCR产物;所述引物对为如下(a1)或(a2)所示的引物对:(a1)由SEQ ID No.1所示的上游引物和SEQ ID No.2所示的下游引物组成的引物对;(a2)由(a1)中的上游引物和/或下游引物经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列组成的,且与(a1)中所述引物对功能相同的引物对;(b)对步骤(a)所得PCR产物进行测序,获得测序序列;(c)按照如下(c1)或(c2)确定所述待测中药样品是否为麝香:(c1)将所述测序序列与标准序列进行比较,如果所述测序序列与所述标准序列完全一致或者仅有1个核苷酸的差异,则所述待测中药样品为或候选为麝香;反之,则所述待测中药样品不为或候选不为麝香;(c2)以所述测序序列和所述标准序列为数据源,构建NJ树,如果所述测序序列与所述标准序列在NJ树的同一个分枝上,则所述待测中药样品为或候选为麝香;反之,则所述待测中药样品不为或候选不为麝香;所述标准序列选自如下任一:SEQ ID No.3所示核苷酸序列、SEQ ID No.4所示核苷酸序列、SEQ ID No.5所示核苷酸序列。
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