[发明专利]人类肠道病毒71型实时荧光恒温扩增核酸检测方法在审
申请号: | 201810018560.8 | 申请日: | 2018-01-09 |
公开(公告)号: | CN108103244A | 公开(公告)日: | 2018-06-01 |
发明(设计)人: | 杨帆;徐建军;阮伟;孙艳丽;曹丙春;李晋;刘万建 | 申请(专利权)人: | 青岛汉唐生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12R1/93 |
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地址: | 266000 山东省青*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供一种人类肠道病毒71型实时荧光恒温扩增核酸检测方法,先采集粪便样本并进行预处理,其间加入RNA提取液,且预处理完成获得待测样液。接下来设定引物序列,并使用对应的引物配制反应体系,充分混匀后分装并顺序加入RNA样本核酸2μL,盖紧反应管管盖,瞬离使液体集中在管底。最终使用荧光定量PCR仪进行恒温反应,并设置反应温度为60‑65℃,时长1min,重复30‑60个循环,于60‑65℃每分钟末收集荧光信号,并判读结果。如此,有效缩短了检测时间。 | ||
搜索关键词: | 人类肠道病毒71型 预处理 核酸检测 恒温扩增 实时荧光 荧光定量PCR仪 粪便样本 恒温反应 判读结果 引物序列 荧光信号 测样液 核酸 分装 混匀 时长 引物 配制 采集 检测 重复 | ||
【主权项】:
1.一种人类肠道病毒71型实时荧光恒温扩增核酸检测方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、采集粪便样本并进行预处理,其间加入RNA提取液,且预处理完成获得待测样液;S2、设定引物序列,并使用对应的引物配制反应体系,充分混匀后分装并顺序加入RNA样本核酸2μL,盖紧反应管管盖,瞬离使液体集中在管底;S3、使用荧光定量PCR仪进行恒温反应,并设置反应温度为60-65℃,时长1min,重复30-60个循环,于60-65℃每分钟末收集荧光信号,并判读结果。
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