[发明专利]组氨酸工程改造的轻链抗体和用于生成所述抗体的经基因修饰的非人动物

摘要

本申请提供了经基因修饰的非人动物，其中所述非人动物在免疫后表达能够pH依赖地与抗原结合的抗体库。本申请提供了经基因修饰的非人动物，所述动物表达来源于在非人动物的种系中的单一重排的轻链可变区基因的单一轻链可变结构域，其中所述单一重排的轻链可变区基因包含至少一个非组氨酸编码密码子被组氨酸编码密码子的取代。本申请提供了制备非人动物的方法，所述动物表达包含含有组氨酸的通用轻链的抗体。

主权项

一种生产抗体的方法，所述抗体表现出对目标抗原的pH依赖性结合，所述方法包括：生产非人动物，所述非人动物在其种系中包含免疫球蛋白轻链基因座，所述免疫球蛋白轻链基因座包含单一重排的人源免疫球蛋白轻链可变区基因序列，其中所述单一重排的人源免疫球蛋白轻链可变区基因序列包含以所需亲和性结合目标抗原的第一抗体的人源VL和JL区段序列，修饰所述单一重排的人源免疫球蛋白轻链可变区基因序列的所述人源VL和JL区段序列以包含不由对应人源种系VL和JL区段序列编码的组氨酸密码子，在细胞中表达所述第一抗体的免疫球蛋白重链和所述修饰的免疫球蛋白轻链，以及选择在所述细胞中表达的第二抗体，所述第二抗体在中性pH下保留了对所述目标抗原的所需亲和性，并在酸性pH下表现出对所述目标抗原的降低的结合。