[发明专利]一种酶法转化制备D-组氨酸的方法在审
| 申请号： | 201810481090.9 | 申请日： | 2018-05-18 |
| 公开（公告）号： | CN108384818A | 公开（公告）日： | 2018-08-10 |
| 发明（设计）人： | 焦庆才;刘均忠;曹双燕;吴婷;余进海 | 申请（专利权）人： | 南京大学 |
| 主分类号： | C12P13/24 | 分类号： | C12P13/24;C12P13/00;C12R1/40;C12R1/01 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 胡锡瑜 |
| 地址： | 210023 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种酶法转化制备D‑组氨酸的方法。该方法以L‑组氨酸为底物，加入具有氨基酸消旋酶活性的菌体细胞或粗酶液，经消旋反应得到DL‑组氨酸，去除氨基酸消旋酶后，再加入具有组氨酸脱羧酶活性的菌体细胞或粗酶液拆分DL‑组氨酸，得到D‑组氨酸和组胺，最终利用等电点结晶和离子交换树脂相结合的方法分离得到高品质的D‑组氨酸。该方法以L‑组氨酸为底物，双酶级联催化制备D‑组氨酸，同时副产高附加值的组胺，具有反应条件温和，绿色环保，操作简便，生产成本低，适合大规模工业化生产等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 组氨酸 制备 菌体细胞 酶法转化 粗酶液 消旋酶 氨基酸 底物 组胺 大规模工业化生产 离子交换树脂 生物技术领域 等电点结晶 生产成本低 脱羧酶活性 反应条件 绿色环保 消旋反应 高品质 副产 级联 去除 催化 | ||
【主权项】：
1.一种酶法转化制备D‑组氨酸的方法，其特征是由以下步骤构成：(1)将恶臭假单胞菌来源具有氨基酸消旋酶活性的菌株、产气肠杆菌来源具有组氨酸脱羧酶活性的菌株分别在培养基中培养，产生高活力的氨基酸消旋酶、组氨酸脱羧酶；培养基碳源采用葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和/或乳糖，培养基中总碳源质量浓度为1～20g/L；氮源采用牛肉膏、酵母膏、玉米浆、蛋白胨和/或豆饼水解液，培养基中总氮源质量浓度为1～20g/L；(2)以30～200g/L的L‑组氨酸为底物，加入具有氨基酸消旋酶活性的菌体细胞或粗酶液，0.05～0.5g/L的磷酸吡哆醛，20～45℃，用氢氧化钠水溶液控制pH 7～10，酶法消旋，待反应液旋光为零，去除氨基酸消旋酶；反应液中再加入具有组氨酸脱羧酶活性的菌体细胞或粗酶液，盐酸控制pH5～7，25～45℃酶促转化，得到D‑组氨酸和组胺；(3)利用等电点结晶和离子交换树脂相结合的方法分离转化产物，得到高纯度的D‑组氨酸，同时得到高附加值的组胺。
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